Cieľ práce: Overiť aktivitu štyroch dezinfekčných látok určených na dezinfekciu kože, slizníc a rán (chlórhexidín diglukonát, jódpovidon, oktenidín hydrochlorid, superoxidovaná voda) na biofilmovú formu rastu kmeňov Staphylococcus aureus, Escherichia coli a Candida sp. izolovaných od pacientov s infekciami spojenými s prítomnosťou katétra. Materiál a metódy: Testované látky sa aplikovali na 24-hodinový biofilm v jamkách mikrotitračnej platničky; po 20-minútovej expozícii a premytí jamiek sa životnosť mikroorganizmov zisťovala následnou 24-hodinovou kultiváciou v čerstvo pridanom kultivačnom médiu. Tvorba biofilmu sa konfirmovala v paralelnej mikrotitračnej platničke a intenzita vytvoreného biofilmu sa stanovila po jeho zafarbení kryštálovou violeťou spektrofotometricky pri 570 nm. Výsledky: Všetky štyri testované dezinfekčné látky inaktivovali mikroorganizmy v biofilme všetkých kmeňov S. aureus, E. coli, C. albicans, C. krusei a C. glabrata bez ohľadu na intenzitu jeho tvorby. Tri kmene C. tropicalis, tvoriace biofilm veľmi intenzívne, si čiastočne zachovali schopnosť rastu po pôsobení chlórhexidínu a jódpovidónu a 2 kmene po pôsobení oktenidínu. Superoxidovaná voda neovplyvnila vitalitu kvasiniek v masívnom biofilme 1 kmeňa C. tropicalis a mala len čiastočný efekt v prípade ďalších 2 kmeňov. Závery: Testované dezinfekčné látky preukázali in vitro aktivitu na biofilmovú formu rastu všetkých sledovaných mikroorganizmov z katétrových infekcií okrem troch kmeňov C. tropicalis s intenzívnou tvorbou biofilmu. Najúčinnejšou dezinfekčnou látkou v štúdii bol oktenidín. Získané výsledky umožňujú predpokladať, že testované dezinfekčné látky budú u pacientov inaktivovať nielen samostatné mikroorganizmy, ktoré nie sú chránené biofilmom, ale aj mikroorganizmy v lokálne dostupnom biofilme na povrchu katétrov. Problémom zostávajú kmene C. tropicalis, tvoriace na umelých povrchoch hrubú vrstvu biofilmu, ktorá ich čiastočne chráni pred účinkami dezinfekčných látok, testovaných v tejto práci.

Aim of the study: To evaluate the activity of four disinfectious agents used for skin, mucosa and wound disinfection (chlorhexidine digluconate, povidone-iodine, octenidine hydrochloride, super oxygenated water) on the biofilm of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida sp. strains, isolated from patients with catheter-related infections. Material and methods: The tested agents were applied on 24-hours biofilm in the microtiter plate wells. After 20-minutes exposition, the wells were washed, and the microbial vitality was tested by regrowth method after 24-hours cultivation in fresh culture medium. Biofilm formation was confirmed in a parallel microtiter plate; the quantity of produced biofilm was measured after crystal violet staining spectrophotometrically at 570 nm. Results: All four tested disinfectious agents inactivated the biofilm of all S. aureus, E. coli, C. albicans, C. krusei and C. glabrata strains, without respect to the intensity of biofilm production. Three strains of C. tropicalis with intensive biofilm production partially preserved their vitality after exposition to chlorhexidine and povidone-iodine, and 2 strains to octenidine. Super oxygenated water had no effect on yeasts associated with massive biofilm of one C. tropicalis strain, and only partially decreased the vitality of additional two strains. Conclusions: The tested disinfectious agents proved in-vitro antibiofilm activity on all microbial strains from catheter-related infections, with exception of three C. tropicalis strains with intensive biofilm production. Octenidine was found to be the most active agent. The results enable to assume, that the tested disinfectious agents, when applied to patients, will inactivate not only the individual microorganisms not protected by biofilm, but also the biofilm on the catheter surfaces approachable by local application. However, C. tropicalis strains producing massive biofilm, protecting them partially from effects of disinfectious agents tested in the present study, still remain a challenge.

Mikrobiologický ústav LF UK a UNB v Bratislave

Antibiofilm activity of agents for disinfection of skin, mucosa, and wound on microorganisms isolated from patients with catheter-related infections