Východisko. Klasickými cytogenetickými metodami bylo zjištěno, že přibližně 80 % X-chromatin pozitivních mužů má karyotyp 47,XXY, ostatní jsou případy s mozaikou. Cílem práce bylo pomocí metody fluorescenční in situ hybridizace (FISH) prokázat početní odchylky pohlavních chromozomů v mitózách i v jádrech kultivovaných periferních lymfocytů mužů s Klinefelterovým syndromem, porovnat některé klinické ukazatele ve vztahu k cyto- genetickým nálezům, určit rozdíly v citlivosti klasických a molekulárně-cytogenetických metod u těchto mužů a porovnat je s kontrolní skupinou zdravých dárců. Metody a výsledky. Vyšetřili jsme 26 mužů s již dříve diagnostikovaným Klinefelterovým syndromem. Při klasickém cytogenetickém vyšetření mělo 19 pacientů karyotyp 47,XXY, pět mělo mozaiku 47,XXY/46,XY, jeden mozaiku 47,XXY/46,XX a jeden nemocný měl karyotyp 48,XXYY. Porovnali jsme výsledky získané klasickou cytogenetikou a metodou FISH a zjistili malou buněčnou linii s karyotypem 46,XY u všech nemocných. Pro kontrolu jsme vyšetřili i 10 zdravých mužů. Závěry. U mužů s Klinefelterovým syndromem má metoda FISH vyšší senzitivitu pro detekci mozaiky pohlavních chromozomů, než klasická cytogenetika. FISH prokázala u všech vyšetřených pacientů v našem souboru existenci nových vedlejších klonů s početními změnami pohlavních chromozomů, které nebyly zachyceny při klasické cytogenetické analýze.

Background. It was found by classical cytogenetic methods that approximately 80 % of X-chromatin positive males have karyotype 47,XXY and the rest have mosaicism of sex chromosomes. More sensitive molecular-cyto- genetic studies allow to evaluate even non-dividing cells of different tissues and therefore they suggest that there could be more frequent occurrence of patients with numerical changes of gonosomes than quoted in the literature. The aim of this study was to detect numerical changes of sex chromosomes by means of double-colour fluorescence in situ hybridisation (FISH) in dividing and non-dividing nuclei of peripheral lymphocytes of males with Klinefelter’s syndrome, to compare clinical findings with cytogenetic results, to determine differences in sensitivity of classical and molecular-cytogenetic methods and estimatere the values obtained with controls (healthy males). Methods and Results. 26 males with previously diagnosed Klinefelter’s sy were examined. Classical cytogenetic studies consisted of evaluation of at least 20 G-banded mitoses of 72h cultivated peripheral blood. The results we obtained: 19 patients with 47,XXY, 5 mosaics 47,XXY/46,XY, 1 patient mosaic 46,XX/47,XXY and 1 patient 48,XXYY karyotype. The results of double colour FISH and classical cytogenetics were compared and mosaics of cells with normal karyotype 46,XY was found. As a control 10 healthy males were examined and mosaics of gonosomes were not detected. Conclusions. FISH method has a higher sensitivity for detection of sex chromosomes mosaics than classical cytogenetics. The existence of small cellular side clones with 46,XY karyotype or numerical sex chromosome changes which were not determined previously can be proved by FISH in patients with Klinefelter’s sy.

Ústav hematologie a krevní transfúze Praha

Molecular-cytogenetic studies of males with Klinefelter's syndrome proves more frequent sex chromosome mosaicism than classical cytogenetics

Molekulárně-cytogenetická diagnostika prokazuje u mužů s Klinefelterovým syndromem častější mozaiky pohlavních chromozomů než klasická cytogenetika = Molecular-cytogenetic studies of males with Klinefelter's syndrome proves more frequent sex chromosome mosaicism than classical cytogenetics /

Lit: 11

Souhrn: eng