INTRODUCTION: In this study we detail the effect of different fixation agents and the duration of storage has on the immunohistochemical staining positivity of samples of archival embryonic and fetal tissues. MATERIALS AND METHODS: The samples were stained by indirect two-step immunohistochemistry (IHC) method for Ki-67, cyclin A and β-actin. RESULTS: Irrespective of the length of tissue archiving, tissue fixation with 10% neutral buffered formalin had better IHC intensity results in all cases when compared to methacarn-fixed tissues. In the case of β-actin, this difference was statistically significant, while differences in Ki-67 and cyclin A were not. The second aspect studied was which effect tissue block archiving duration has on the IHC reactivity. We demonstrated a statistically significant decrease in IHC positivity for all studied antigens between the samples that were archived for 10-19 or 20-45 years, regardless the fixative solution. CONCLUSION: To the best of our knowledge, the influence that the duration of tissue block archiving has on IHC positivity in human embryo and fetal tissue material has not yet been studied. Although the causes of the IHC positivity decline in archived tissue blocks are not well understood, a possible decrease in IHC over time should be considered, particularly in retrospective studies.
- MeSH
- aktiny analýza MeSH
- antigen Ki-67 analýza MeSH
- barvení a značení normy MeSH
- časové faktory MeSH
- chloroform MeSH
- cyklin A analýza MeSH
- fixace tkání metody MeSH
- fixativa MeSH
- formaldehyd MeSH
- gestační stáří MeSH
- imunohistochemie normy MeSH
- játra embryologie MeSH
- králíci MeSH
- kyselina octová MeSH
- lidé MeSH
- methanol MeSH
- myši MeSH
- placenta embryologie MeSH
- střeva embryologie MeSH
- těhotenství MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- králíci MeSH
- lidé MeSH
- myši MeSH
- těhotenství MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Klíčová slova
- pH detekční metody, histochemické metody,
- MeSH
- acetylcholinesterasa * farmakologie fyziologie nedostatek škodlivé účinky MeSH
- biosenzitivní techniky metody normy přístrojové vybavení MeSH
- butyrylcholinesterasa * farmakologie fyziologie nedostatek škodlivé účinky MeSH
- chemické techniky analytické * využití MeSH
- cholinesterasové inhibitory MeSH
- cholinesterasy farmakologie fyziologie MeSH
- imunohistochemie metody normy přístrojové vybavení MeSH
- kolorimetrie metody normy přístrojové vybavení trendy MeSH
- lidé MeSH
- radiometrie metody normy přístrojové vybavení využití MeSH
- spektrofotometrie metody normy přístrojové vybavení MeSH
- titrace metody normy přístrojové vybavení MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
The TP63 gene gives rise to protein isoforms with different properties and functions due to the presence (TAp63) or absence (ΔNp63) of an N-terminal p53-like transactivation domain. Immunohistochemistry for p63 has clinical value for certain tumour types, but investigations have been hampered by a lack of well characterized antibodies and the inability to discriminate between these N-terminal isoforms with opposite functional properties. We have extensively characterized a series of monoclonal antibodies to recombinant human TAp63 and two commercial p63 monoclonals by Western blot, immunostaining and phage display epitope mapping. Twenty-eight of 29 (96.6 %) novel monoclonals that recognized all p63 isoforms showed substantial cross-reactivity with p73, as did the commercial antibody, 4A4. One novel clone, PANp63-6.1, showed slight cross-reaction with p73 by Western blotting but not immunohistochemistry and the SFI-6 monoclonal did not cross-react with p73 or p53. Phage display revealed that the PANp63-6.1 epitope has one amino acid difference between p63 and p73, the 4A4 epitope is identical in both, whereas the SFI-6 epitope is unique to p63, accounting for these findings. We also produced and characterized a TAp63-specific clone that does not recognize p53 or p73, and we prepared polyclonal sera specific for ΔNp63 isoforms. Immunohistochemistry demonstrated that TAp63 is expressed in a variety of epithelial and other cell types during development, often in a converse pattern to ΔNp63, but has a very limited expression in normal adult tissues and is independent of ΔNp63. TAp63 was expressed in 17.6 % of squamous cancers of cervix that expressed p63, unlike normal cervix where TAp63 was not expressed. TAp63 did not associate with proliferative index, but cervical carcinomas with TAp63 expression showed improved survival. These data highlight the need for rigorous antibody characterization and indicate that p63-isoform identification may improve the clinical value of p63 expression analyses.
- MeSH
- adenokarcinom diagnóza imunologie MeSH
- DNA vazebné proteiny imunologie MeSH
- imunohistochemie metody normy MeSH
- jaderné proteiny imunologie MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- membránové proteiny chemie imunologie MeSH
- monoklonální protilátky diagnostické užití imunologie MeSH
- myši MeSH
- nádorové buněčné linie MeSH
- nádorové supresorové proteiny imunologie MeSH
- nádorový supresorový protein p53 imunologie MeSH
- nádory děložního čípku diagnóza imunologie MeSH
- nádory plic diagnóza imunologie MeSH
- nádory prsu diagnóza imunologie MeSH
- nemalobuněčný karcinom plic diagnóza imunologie MeSH
- protein - isoformy MeSH
- specificita protilátek imunologie MeSH
- spinocelulární karcinom diagnóza imunologie MeSH
- zkřížené reakce MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- myši MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- hodnotící studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- geny erbB-2 genetika MeSH
- imunohistochemie metody normy využití MeSH
- lidé MeSH
- nádory prsu genetika patologie MeSH
- testování odbornosti laboratoří využití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- směrnice pro lékařskou praxi MeSH
- Klíčová slova
- HER-2/neu, in situ hybridizace,
- MeSH
- amplifikace genu MeSH
- financování organizované MeSH
- geny erbB-2 genetika MeSH
- hybridizace in situ fluorescenční metody normy MeSH
- imunohistochemie metody normy MeSH
- invazivní růst nádoru diagnóza genetika MeSH
- lidé MeSH
- lidské chromozomy, pár 17 genetika MeSH
- monoklonální protilátky terapeutické užití MeSH
- nádorové biomarkery analýza MeSH
- nádory prsu diagnóza farmakoterapie genetika MeSH
- prediktivní hodnota testů MeSH
- receptor erbB-2 analýza biosyntéza genetika MeSH
- reprodukovatelnost výsledků MeSH
- trastuzumab MeSH
- výběr pacientů MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Klinické studie dokumentují zvýšené riziko vzniku schizofrenie u dospívajících jedinců ve vztahu k infekci matky během těhotenství nebo u novorozenců s infekčním onemocněním v anamnéze. V naší studii je sledování účinku infekce na vývoj mozku založeno na stimulaci potkaních samic 18. a 19. den (ED 18-19) březosti bakteriálním endotoxinem - lipopolysacharidem (LPS; 0,5 mg/kg, s.c.) ve srovnání s tolerancí k LPS (2 mg/kg) podaného intraperitoneálně Ikrát denně 5.-9. postnatální den (PD 5-9). Rozvoj zánětlivého poškození a jeho dlouhodobé následky jsme hodnotili z hlediska ovlivnění růstové křivky, vybraných parametrů chování („open field" test, test prepulzní inhibice akustické úlekové reakce - PPI/ASR) v období maturace (PD 50) a z hlediska histopatologických změn mozku. Subchronická postnatální aplikace LPS indukovala zpomalený růst mláďat a v rané dospělosti deficit PPI provázený histopatologickými změnami ve vybraných podoblastech hipokampů. Naopak mláďata matek, kterým byl podán LPS v posledních dnech březosti, neměla změněnou růstovou křivku, ale vykazovala PD 50 hyperlokomoci a zvýšenou ASR Tato zjištění svědčí pro rozdílnou vulnerabilitu vyvíjejícího se mozku k infekčnímu zánětu jako rizikovému faktoru pro vznik a rozvoj psychotického chování u dospělého jedince.
Clinic studies correlate a higher risk of schizophrenia with the appearance of maternal infection during pregnancy or newborns ex- posed to infectious. Our animal model of pre/perinatal infection was based on systemic administration of bacterial agent (endot oxin, lipopolysaccharide, LPS) to pregnant rats (embryonic day – /ED/ 18–19; dose 0,5mg/kg s.c.) in comparison to neonatal subchronic administration when male rat pups received LPS in dose 2 mg/kg/day i.p. during postnatal days 5–9 (PD 5–9). The rats were obser ved during an early postpubertal period (PD 50) in relation to persisting morphological damages and behaviour, exhibiting tight rel ationships to behavioural changes in schizophrenia (open field test, prepulse inhibition). Postnatal LPS stimulation induced growth retard ation until weaning, deficit in prepulse inhibition and changes in hippocampal morphology. The maternal infection affected offspring deve- lopmental milestones; in early adult males expressed hyperlocomotion and higher baseline of acoustic startle reaction. These fi ndings document different vulnerability of brain to infectious processes as a risk factor for manifestation psychotic-like behaviour.
- MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- financování organizované MeSH
- hipokampus fyziologie účinky léků MeSH
- imunohistochemie metody normy MeSH
- lipopolysacharidy chemická syntéza nedostatek MeSH
- mikroglie imunologie účinky léků MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- potkani Wistar imunologie psychologie MeSH
- schizofrenie etiologie imunologie MeSH
- úleková reakce genetika účinky léků MeSH
- zánět etiologie komplikace psychologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
