PBL will be isolated from human blood and peptides will be eluted from B27 molecules of AS patients and healthy control. The peptide profiles will be compared by MALDI-TOF and Edman degradation for pool sequencing. PBL will be isolated from human blood and peptides will be eluted from B27 molecules of AS patients and healthy control.Individual peptides will be sequenced by LC/MS and Q-FTMS. Pools of PBL obtained from several AS diseased and healthy individuals will be tested to examine which individualpeptide appears as different,and thus exert a strong representation. Method used for the analysis of individual peptides will be MALDI-TOF. Peptide profiles will be examined from spleen cells of B27 transgenic mice with the ANKENT enthesopathy disease and healthy controls. The overall results will be compared with those obtained from AS patients.

Peptidy izolované z PBL lidské krve budou eluovány z molekul B27 pacientů s AS, dále pacientů s různými formami B27 asociovaných onemocnění a zdravých kontrol. Peptidové profily budou porovnány metodou MALDI-TOF a Edmanovou degradací (pool sequencing). PBL budou izolovány z krve nemocných s AS a zdravých jedinců. Získané peptidy budou eluovány z molekul B27 v obou vyšetřovaných skupinách. Individuální peptidy budou sekvenovány pomocí LC/MS a Q-FTMS. Zjištěné sekvence peptidů eluované z kapsy B27 molekuly u nemocných budou srovnány se sekvencemi publikovanými v v B27-peptide REGISTER (Lopez de Castro, Tissue Antigens 2004). Peptidové profily buněk ze sleziny B27 transgenních myší s ANKENT entesopatií budou porovnány s kontrolními profily. Výsledky budousrovnány s údaji získanými u pacientů s AS.

• MeSH
• ankylózující spondylitida prevence a kontrola   terapie   MeSH
• autoimunita MeSH
• HLA antigeny analýza   MeSH
• HLA-B27 antigen analýza   MeSH
• peptidy analýza   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• biologie
• revmatologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Our pereliminary results show the possibility of pool sequencing of peptides isolated from the grooves of HLA-B27 molecules from 400 ml blood. This technology will be further elaborated to obtain peptide profiles (PP) from HLA molekules from 200 ml bloodMethodology, which enables to establish PP from small numbers of cells, will be applied for comparison of PP from patients with ankylosing spondylarthrosis and healthy individuals. The reults will contribute to understand the role of HLA in autoimmunity. Numerous data will be obtained on PP of HLA molecules from diseased and healthy individuals. Statistical methods will be elaborated to enable detailed and critical evaluation of differences in PP from healthy and diseased individuals.

Předběžné výsledky nám umožnily pool sekvenování peptidů získaných z kapsy HLA-B27 molekul z 400 ml krve. Tento postup bude propracován tak, aby umožnil stavovení peptidického profilu (PF) z HLA molekul z 200 ml krve. Metodologie umožňující vyšetření PFHLA molekul z malého (200 ml) množství krve bude použita pro srovnání PF u nemocných s ankylozující spondylartritidou a zdravých jedinců. Výsledek přispěje k pochopení významu HLA antigenů pro vznik autoimunity. Budou získány údaje o PF HLA molekul od zdravých a nemocných jedinců. Budou vypracovány statistické metody umožňující kritické a detailní posouzení rozdílů v PF zdravých a nemocných jedinců.

• MeSH
• ankylózující spondylitida imunologie   MeSH
• autoimunita MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• HLA-B27 antigen analýza   krev   MeSH
• imunologické faktory MeSH
• spondylartritida imunologie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• revmatologie
• biochemie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Navrhujeme izolaci a frakcionaci peptidů z kapsy molekul HLA a srovnání profilu u nemocných a kontrol.Studie přispěje k pochopení funkce HLA u onemocnění,upřesní diagnózu a naznačí cestu k léčbě autoimunních onemocnění.

• MeSH
• autoimunitní nemoci diagnóza   MeSH
• beta-2-mikroglobulin MeSH
• chromatografie kapalinová využití   metody   MeSH
• HLA antigeny MeSH
• HLA-B27 antigen analýza   MeSH
• mapování epitopu využití   metody   MeSH
• spektrofotometrie využití   metody   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• radiologie, nukleární medicína a zobrazovací metody
• chemie, klinická chemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR