The transmembrane adaptor protein NTAL (non-T-cell activation linker) participates in signalosome assembly in hematopoietic cells, but its exact role in cell physiology remains enigmatic. We report here that BM-derived mast cells from NTAL-deficient mice, responding to Ag alone or in combination with SCF, exhibit reduced spreading on fibronectin, enhanced filamentous actin depolymerization and enhanced migration towards Ag relative to WT cells. No such differences between WT and NTAL(-/-) BM-derived mast cells were observed when SCF alone was used as activator. We have examined the activities of two small GTPases, Rac and Rho, which are important regulators of actin polymerization. Stimulation with Ag and/or SCF enhanced activity of Rac(1,2,3) in both NTAL(-/-) and WT cells. In contrast, RhoA activity decreased and this trend was much faster and more extensive in NTAL(-/-) cells, indicating a positive regulatory role of NTAL in the recovery of RhoA activity. After restoring NTAL into NTAL(-/-) cells, both spreading and actin responses were rescued. This is the first report of a crucial role of NTAL in signaling, via RhoA, to mast cell cytoskeleton.

• MeSH
• adaptorové proteiny signální transdukční MeSH
• aktiny genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• antigeny imunologie   MeSH
• buňky kostní dřeně cytologie   imunologie   metabolismus   MeSH
• cytoskelet genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• mastocyty cytologie   imunologie   metabolismus   MeSH
• myši knockoutované MeSH
• myši MeSH
• proteiny genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• rac proteiny vázající GTP genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• rho proteiny vázající GTP genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• rhoA protein vázající GTP MeSH
• signální transdukce genetika   imunologie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Názvy látek
• adaptorové proteiny signální transdukční MeSH
• aktiny MeSH
• antigeny MeSH
• LAT2 protein, mouse MeSH Prohlížeč
• proteiny MeSH
• rac proteiny vázající GTP MeSH
• rho proteiny vázající GTP MeSH
• rhoA protein vázající GTP MeSH
• RhoA protein, mouse MeSH Prohlížeč

Adenylate cyclase toxin (CyaA or ACT) is a key virulence factor of pathogenic Bordetellae. It penetrates phagocytes expressing the alpha(M)beta(2) integrin (CD11b/CD18, Mac-1 or CR3) and paralyzes their bactericidal capacities by uncontrolled conversion of ATP into a key signaling molecule, cAMP. Using pull-down activity assays and transfections with mutant Rho family GTPases, we show that cAMP signaling of CyaA causes transient and selective inactivation of RhoA in mouse macrophages in the absence of detectable activation of Rac1, Rac2, or RhoG. This CyaA/cAMP-induced drop of RhoA activity yielded dephosphorylation of the actin filament severing protein cofilin and massive actin cytoskeleton rearrangements, which were paralleled by rapidly manifested macrophage ruffling and a rapid and unexpected loss of macropinocytic fluid phase uptake. As shown in this study for the first time, CyaA/cAMP signaling further caused a rapid and near-complete block of complement-mediated phagocytosis. Induction of unproductive membrane ruffling, hence, represents a novel sophisticated mechanism of down-modulation of bactericidal activities of macrophages and a new paradigm for action of bacterial toxins that hijack host cell signaling by manipulating cellular cAMP levels.

• MeSH
• adenylátcyklasový toxin imunologie   metabolismus   MeSH
• AMP cyklický imunologie   MeSH
• antigeny CD11b genetika   imunologie   MeSH
• antigeny CD18 genetika   imunologie   MeSH
• Bordetella pertussis enzymologie   imunologie   MeSH
• buněčná membrána imunologie   metabolismus   MeSH
• buněčné linie MeSH
• faktory depolymerizující aktin imunologie   metabolismus   MeSH
• GTP-fosfohydrolasy imunologie   metabolismus   MeSH
• GTP-vázající protein RAC2 MeSH
• makrofágový antigen 1 imunologie   metabolismus   MeSH
• makrofágy imunologie   metabolismus   MeSH
• mikrofilamenta imunologie   metabolismus   MeSH
• myši MeSH
• neuropeptidy imunologie   metabolismus   MeSH
• pertuse enzymologie   imunologie   MeSH
• rac proteiny vázající GTP imunologie   metabolismus   MeSH
• rac1 protein vázající GTP MeSH
• rho proteiny vázající GTP imunologie   metabolismus   MeSH
• rhoA protein vázající GTP MeSH
• signální transdukce imunologie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Názvy látek
• adenylátcyklasový toxin MeSH
• AMP cyklický MeSH
• antigeny CD11b MeSH
• antigeny CD18 MeSH
• faktory depolymerizující aktin MeSH
• GTP-fosfohydrolasy MeSH
• makrofágový antigen 1 MeSH
• neuropeptidy MeSH
• rac proteiny vázající GTP MeSH
• rac1 protein vázající GTP MeSH
• Rac1 protein, mouse MeSH Prohlížeč
• rho proteiny vázající GTP MeSH
• rhoA protein vázající GTP MeSH
• RhoA protein, mouse MeSH Prohlížeč
• Rhog protein, mouse MeSH Prohlížeč