Cíl práce: Diagnostika Bartonella henselae metodou polymerázové řetězové reakce (PCR) v exstirpovaných uzlinách 10 pacientů se sérologickým průkazem nemoci z kočičího škrábnutí. Materiál a metody: Soubor z období 2015–2018 zahrnoval 10 pacientů se sérologicky prokázanou nemocí z kočičího škrábnutí, všichni pacienti měli pozitivitu IgG protilátek proti B. henselae, 6 pacientů současně i pozitivitu IgM protilátek. Jednalo se o 4 muže a 6 žen, celkem 7 dětí a 3 dospělé ve věkovém rozmezí 5–52 let. Vyšetřeno bylo 11 exstirpovaných uzlin uložených v parafinových blocích od 10 pacientů, varianty granulomatózního zánětu byly zjištěny u 9 pacientů, chlapec ve věku 13 let měl Hodgkinův lymfom. Pro izolaci DNA byla použita komerční souprava cobas ® DNA Sample preparation Kit (Roche) a pro detekci DNA Bartonella sp. metodou real-time PCR komerční souprava BactoReal® Kit Bartonella spp. (Ingenetix) využívající detekci gltA genu specifického pro rod Bartonella. Výsledky: Průkaz bartonely v histologickém preparátu metodou PCR byl pozitivní či hraničně pozitivní u 4 z 10 pacientů. U jednoho pacienta byly vyšetřeny 2 uzliny s pozitivním výsledkem jen v jedné uzlině. Výsledek byl pozitivní u dospělého muže, slabě pozitivní u 3 dětí. Dva z těchto 4 pacientů měli histologický nález granulomatózně-abscedujícího a 2 pacienti granulomatózně-nekroticko-abscedujícího zánětu. Pozitivita či hraniční pozitivita PCR byla zjištěna u 4 pacientů s pozitivitou protilátek třídy IgM proti B. henselae, ale u žádného pacienta s negativitou IgM protilátek. Rovněž chlapec s lymfomem měl negativní výsledek PCR diagnostiky. Závěr: Kombinace sérologického vyšetření s histologickým vyšetřením uzlin a PCR metodou může zlepšit diagnostiku nemoci z kočičího škrábnutí.

Objective: The diagnosis of Bartonella henselae by polymerase chain reaction (PCR) in lymph nodes removed in 10 patients with serologically confirmed evidence cat-scratch disease. Material and methods: The 2015–2018 group consisted of 10 patients with serologically confirmed cat-scratch disease, all of them having positive IgG antibodies and 6 patients also positive IgM antibodies against B. henselae. The group included 4 men and 6 women, 7 children and 3 adults, aged 5–52 years. Eleven lymph nodes obtained from the 10 patients were formalin-fixed paraffin-embedded. Variants of granulomatous inflammation were found in 9 patients; a 13-year-old boy had Hodgkin’s lymphoma. DNA isolation was per- formed with cobas ® DNA Sample Preparation Kit (Roche). DNA of Bartonella spp. was detected by real-time PCR with BactoReal ® Kit Bartonella spp. (Ingenetix) detecting the gltA gene specific for the genus Bartonella. Results: Four of the 10 patients tested positive or borderline positive for Bartonella when their histological material was analyzed by PCR. One patient with 2 lymph nodes examined showed a positive result for only 1 lymph node. One adult male had a positive result; three children showed borderline positive results. Of those, two patients had suppurative granulomatous and the other 2 patients had necrotizing suppurative granulomatous inflammation as histological findings. All 4 patients had positive IgM antibodies against B. henselae. The boy with lymphoma had a negative PCR result. Conclusion: Serological tests combined with histological examination of lymph nodes and PCR may improve the diagnosis of cat-scratch disease.

Centrum epidemiologickýc studií LF OU Ostrava

CGB laboratoř a s Ostrava

Klinika infekčního lékařství FN Ostrava

Oddělení molekulární biologie Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě

Ústav epidemiologie a ochrany veřejného zdraví LF OU Ostrava

Use of PCR for diagnosing cat-scratch disease

Literatura