Východisko. Morfologická a imunofenotypizační vyšetření u B nehodgkinských maligních lymfomů (B-NHL) jsou v některých případech (15 %) nedostačující k detekci neoplastické populace. Cílem práce bylo využít abnor- málních změn v genomu NHL a detekovat malignitu na molekulární úrovni pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR). Metody a výsledky. Bylo vyšetřeno 90 pacientů (48 mužů, věkové rozmezí 18 - 76 roků, průměrný věk 53 let, a 42 žen, věkové rozmezí 20 - 86 roků, průměrný věk 54 let) s různým typem onemocnění B-NHL na přítomnost klonálního přeskupení (restrukturace) genu pro těžký řetězec imunoglobulinů (gen IgH) a 32 pacientů (12 mužů, věkové rozmezí 45 - 69 roků, průměrný věk 52 let, a 20 žen, věkové rozmezí 29 - 85 roků, průměrný věk 53 let) s diagnózou centrocyto-centroblastický lymfom (CCCB) na translokaci t(14,18) z DNA izolované z lymfatických uzlin, kostní dřeně a periferní krve. Translokace (14,18) byla nalezena u 38 % vyšetřovaných lymfatických uzlin, 36 % kostní dřeně a u 50 % periferní krve. IgH PCR pozitivita závisela na typu analyzovaného lymfomu. Zatímco u nízkomaligních onemocnění byla klonální restrukturace zjištěna u všech vyšetřovaných, u vyššího stupně malig- nity byla o třetinu nižší (62 %). U folikulárních lymfomů pozitivita IgH PCR závisela na zdroji DNA. V kostní dřeni bez leukemizace byla pozitivita zjištěna u 50 % vyšetřovaných, v kostní dřeni s leukemizací pak u 64 %. V periferní krvi s infiltrací kostní dřeně bez leukemizace bylo nalezeno 71 % a v případě, kdy byla periferní krev a kostní dřeň bez morfologických změn, 64 % pozitivních případů. Společným použitím IgH PCR a t(14,18) PCR jsme detekovali neoplastickou populaci u 81 % nemocných s folikulárním lymfomem. Závěry. Detekce klonálního přeskupení IgH genu a t(14,18) pomocí PCR jsou vhodnou doplňující metodikou pro stanovení maligních populací lymfocytů u B-NHL, obzvláště v případech, kdy morfologická a imunofenotypizační kritéria nepřináší jednoznačný výsledek.

Background. Morphology and immunological marker analysis are insufficient to detect neoplastic population in some cases (15%) of non-Hodgkin´s lymphomas (B-NHL). Aim of the study was to detect malignancy at molecular level using polymerase chain reaction. Methods and Results. We examined a diverse set of B-NHL (90 patients - 48 men, range 18 - 76 years, mean age 53 years and 42 women, range 20 - 86 years, mean age 54 years) to detect immunoglobulin heavy chain (IgH) rearrangement. 32 patients with centroblastic-centrocytic lymphomas (12 men, range 45 - 64 years, mean age 52 years and 20 women, range 29 - 85 years, mean age 53 years) were also studied for translocation (14,18). DNA was isolated from lymphatic nodes, bone marrows and peripheral blood. Translocation (14,18) was founded in 38 % lymphatic nodes, 36 % bone marrows and in 50 % of peripheral blood. The detection rate of IgH PCR varried according to the morphologic type of the analyzed lymphoma specimen. A high detection rate (100%) was observed in low-grade lymphoma, while in high-grade lymphoma was in 62 %. In bone marrows samples from follicular lymphomas, IgH PCR positivity was observed in 50 % cases without leukaemic blood picture and in 64 % cases with lymphoma cells in peripheral blood picture. In peripheral blood with bone marrow infiltration, but without the presence of lymphoma cells (morphological assessment) we observed 71 % IgH PCR positive samples. In case, when bone marrow and peripheral blood were morphologic negative, we identified 64 % positive cases. Using t(14,18) and IgH PCR we detected neoplastic population in 81 % follicular lymphomas. Conclusions. IgH PCR and t(14,18) PCR are convenient additional technology for detection of neoplastic lymphocytes in B-NHL, particularly when morphology and immunological marker analysis are insufficient.

UK 1 LF VFN 1 interní klinika Praha

Detection and significance of chromosomal abnormalities in patients with non-Hodgkin's lymphomas by polymerase chain reaction

Detekce a význam chromozomálních abnormalit u nemocných s nehodgkinskými maligními lymfomy metodou polymerázové řetězové reakce = Detection and significance of chromosomal abnormalities in patients with non-Hodgkin's lymphomas by polymerase chain reaction /

Detection and significance of chromosomal abnormalities in patients with non-Hodgkin's lymphomas by polymerase chain reaction /

Lit: 20

Souhrn: eng