Kontext: Infekční onemocnění covid-19 je spojeno s endotelovou dysfunkcí. Ověřuje se představa možnosti opravy endotelové buňky pomocí endotelových progenitorových buněk (endothelial progenitor cell, EPC) s použitím inhibitorů angiotenzin konvertujícího enzymu (ACEI); podle této představy by se tak mohla zlepšit angiogeneze EPC. Metody: Jedná se o skutečně experimentální in vitro studii s uspořádáním s kontrolní skupinou vytvořenou až po testu. Mononukleární buňky byly izolovány z periferní žilní krve pacienta s chronickým koronárním syndromem, který měl v anamnéze infekční onemocnění covid-19. Buňky byly kultivovány ve speciálním médiu po dobu sedmi dní a buňky EPC byly identifikovány imunocytochemicky pomocí protilátek proti buňkám CD34 radioaktivně značeným fluoresceinizothiocyanátem (FITC) s vyšetřením pod fluorescenčním mikroskopem. Buňky byly rozděleny do dvou skupin, kontrolní a do skupiny s aplikací lisinoprilu v dávce 50 μM. Morfologie a spojení tubulů byly zkoumány pomocí analyzátoru obrázků výrobce Wimasis. Koncentrace von Willebrandova faktoru (vWF) a CD31 byly měřeny metodou ELISA, následovanou statistickým srovnáním obou skupin, přičemž za statisticky významnou byla považována hodnota p < 0,05. Výsledky: Po 144hodinové kultivaci byly buňky EPC identifikovány pomocí světelné a fluorescenční mikroskopie. Parametry tvorby tubulů včetně pokryté plochy (29,6 ± 15,68 vs. 61,8 ± 25,41; p 0,13), celkového počtu tubulů 387 ± 101,55 vs. 382,67 ± 158,53; p 0,97), větvení (163 ± 72,52 vs. 179,66 ± 53,5; p 0,543) a celkového počtu kliček (40,66 ± 30,73 vs. 52,66 ± 5,77; p 0,543) nevykazovaly mezi kontrolní skupinou a skupinou s aplikací lisinoprilu žádný rozdíl. Pokud se týče sérologických biomarkerů, hodnoty CD31 se mezi kontrolami a skupinou s aplikací lisinoprilu statisticky významně nelišily (2 903,58 ± 578,08 vs. 3 361,89 ± 391,24; p 0,319), nicméně hodnoty vWF byly statisticky významně vyšší ve skupině s aplikací lisinoprilu (98,670 ± 3,240 vs. 91,181 ± 2,443; p 0,033). Závěr: U pacientů se stabilní ischemickou chorobou srdeční po prodělaném infekčním onemocnění covid-19 může lisinopril ovlivňovat angiogenezi buněk EPC, jak dokazuje zvyšování hodnot parametrů tvorby tubulů a statisticky významný nárůst koncentrace von Willebrandova faktoru.
Background: COVID-19 infection is associated with endothelial dysfunction. The concept of endothelial cell repair utilizing endothelial progenitor cells (EPCs) with the use of angiotensin-converting enzyme inhibitors (ACEIs) has been developing which is known for its potential for EPC's angiogenesis improvement. Methods: This is a true experimental in vitro study with post-test only control group design. Mononuclear cells were isolated from peripheral venous blood of patient with chronic coronary syndrome and history of COVID-19. The cells then cultured on special media for 7 days and EPC was identified using immunocytochemical examination with labelled anti-CD34 cells FITC-under fluorescence microscope examination. The cells were divided into two groups consisted of control group and 50 μM lisinopril-treated group. The morphology and tube connections were analyzed using Wimasis image analyzer. The von Willebrand factor (vWF) and CD31 concentrations were also measured by ELISA. Statistical comparison between both groups was performed and p-value < 0.05 was considered significant.
- MeSH
- angiogeneze účinky léků MeSH
- antigeny CD34 MeSH
- COVID-19 komplikace MeSH
- dospělí MeSH
- endoteliální progenitorové buňky * účinky léků MeSH
- fluorescenční mikroskopie MeSH
- imunohistochemie metody přístrojové vybavení MeSH
- koronární nemoc farmakoterapie komplikace MeSH
- lidé MeSH
- lisinopril * aplikace a dávkování MeSH
- statistika jako téma MeSH
- techniky in vitro MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- klinická studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Adiponectin (APN), an adipose tissue-excreted adipokine, plays protective roles in metabolic and cardiovascular diseases. In this study, the effects and mechanisms of APN on biological functions of rat vascular endothelial progenitor cells (VEPCs) were investigated in vitro. After administrating APN in rat VEPCs, the proliferation was measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) method, the apoptotic rate was test by Flow cytometry assay, mRNA expression of B-cell lymphoma-2 (Bcl-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) was determined by real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), and protein expression of mechanistic target of rapamycin (mTOR), signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) and phospho-STAT3 (pSTAT3) was analyzed by Western blot. It was suggested that APN promoted the optical density (OD) value of VEPCs, enhanced mRNA expression of Bcl-2 and VEGF, and inhibited cell apoptotic rate. Furthermore, protein expression of pSTAT3 was also increased in the presence of APN. Moreover, APN changed-proliferation, apoptosis and VEGF expression of VEPCs were partially suppressed after blocking the mTOR-STAT3 signaling pathway by the mTOR inhibitor XL388. It was indicated that APN promoted biological functions of VEPCs through targeting the mTOR-STAT3 signaling pathway.
- MeSH
- adiponektin farmakologie MeSH
- buněčné linie MeSH
- cévní endotel účinky léků metabolismus MeSH
- endoteliální progenitorové buňky účinky léků fyziologie MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- proliferace buněk účinky léků fyziologie MeSH
- signální transdukce účinky léků fyziologie MeSH
- sulfony farmakologie MeSH
- TOR serin-threoninkinasy antagonisté a inhibitory biosyntéza MeSH
- transkripční faktor STAT3 antagonisté a inhibitory biosyntéza MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH