The present study was performed to evaluate the antibacterial activities of an antimicrobial peptide (CSpK14) and the synergies thereof with β-lactams against vancomycin-resistant Staphylococcus aureus (VRSA) and Enterococci (VRE). Our strain was isolated from fermented food (kimchi), which is 99.79 % homologous with Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum FZB42(T). CSpK14 was purified to homogeneity by diammonium sulfate precipitation, concentration, dialysis, and followed by two-stage chromatographic separation, i.e., Sepharose Cl-6B and Sephadex G-25 chromatography, and had a molar mass of ~4.6 kDa via Tricine SDS-PAGE and in situ examination. It was stable at pH 6.0-11.5 and temperature up to 80 °C. In addition, it was also stable with various metal ions, solvents, and proteases. The N-terminal amino acid sequence was H-Y-D-P-G-D-D-S-G-N-T-G and did not show any significant homology with reported peptides. However, it shows some degrees of identity with alpha-2-macroglobulin and ligand-gated channel protein from different microorganisms. CSpK14 significantly reduced the minimum inhibitory concentrations (MICs) of β-lactams and had no effect on non-β-lactams against VRSA and VRE. MICs of CSpK14/oxacillin and CSpK14/ampicillin were reduced by 8- to 64-fold and 2- to 16-fold, respectively. The time killing assay between CSpK14/oxacillin (2.29-2.37 Δlog10CFU/mL at 24 h) and CSpK14/ampicillin (2.30-2.38 Δlog10CFU/mL at 24 h) being >2-fold and fractional inhibitory concentration index ˂0.5 revealed synergy. Furthermore, the biofilms formed by VRSA and VRE were reduced completely. CSpK14 was simple to purify, had low molecular mass, was stable over a wide pH range or tested chemicals, had broad inhibitory spectrum, and possessed potent synergistic antimicrobial-antibiofilm properties. CSpK14 synergistically enhanced the efficacy of β-lactams and is therefore suitable for combination therapy.

• MeSH
• ampicilin farmakologie   MeSH
• antibakteriální látky biosyntéza   izolace a purifikace   farmakologie   MeSH
• Bacillus amyloliquefaciens klasifikace   imunologie   metabolismus   MeSH
• biofilmy účinky léků   růst a vývoj   MeSH
• chromatografie iontoměničová MeSH
• enterokoky rezistentní vůči vankomycinu účinky léků   růst a vývoj   MeSH
• fylogeneze MeSH
• kationické antimikrobiální peptidy biosyntéza   izolace a purifikace   farmakologie   MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• mikrobiální testy citlivosti MeSH
• oxacilin farmakologie   MeSH
• rezistence na vankomycin účinky léků   MeSH
• sekvence aminokyselin MeSH
• stabilita proteinů MeSH
• Staphylococcus aureus účinky léků   růst a vývoj   MeSH
• synergismus léků MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

• MeSH
• algoritmy MeSH
• antibakteriální látky aplikace a dávkování   MeSH
• beta-laktamasy izolace a purifikace   účinky léků   MeSH
• enterobakteriální infekce enzymologie   genetika   klasifikace   MeSH
• Enterococcus faecium účinky léků   MeSH
• hematologické nádory komplikace   mikrobiologie   MeSH
• komise odborníků MeSH
• kontrola infekce metody   normy   organizace a řízení   MeSH
• lidé MeSH
• methicilin rezistentní Staphylococcus aureus * izolace a purifikace   patogenita   účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin * genetika   účinky léků   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• směrnice pro lékařskou praxi MeSH

Nozokomiální infekce představují nežádoucí komplikaci zdravotnické péče prováděné v nemocnicích, s řadou negativních následků, jako jsou nárůst morbidity a mortality, prodloužení doby hospitalizace, provázenou vzestupem přímých i nepřímých nákladů na zdravotnickou péči. Příznivé podmínky pro vznik a šíření infekcí jsou zejména u nemocných v intenzívní péči. Souvisí s rostoucí komorbiditou pacientů, častým využíváním invazívních technik léčby, koncentrací takto těžkých, často imunokompromitovaných nemocných v uzavřeném prostředí pracovišť intenzívní péče a častým používáním antibiotik. Přes velký pokrok v poznání patofyziologických principů vzniku a přenosu nozokomiálních infekcí zůstávají tyto infekce závažným problémem i dnes.

Nosocomial infections represent an undesirable complication of hospital medical care with a range of negative consequences such as increased morbidity and mortality, longer hospitalization, accompanied by the increase of direct and indirect costs of medical care. We see particularly favourable conditions for the emergence and spread of infection in patients in intensive care units. They are linked with increasing comorbidity of patients, frequent use of invasive treatment techniques, concentration of severely impaired, often immunocompromised patients in closed intensive care departments environment and frequent use of antibiotics. Currently nosocomial infections remain a serious problem despite the great progress in understanding the pathophysiological mechanisms of their emergence and transmission.

• Klíčová slova
• infekce krevního řečiště, bariérový režim, potenciálně patogenní organismy, kolonizace,
• MeSH
• antibakteriální látky aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• antibiotická rezistence genetika   imunologie   MeSH
• antiinfekční látky aplikace a dávkování   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• infekce spojené se zdravotní péčí diagnóza   etiologie   terapie   MeSH
• jednotky intenzivní péče využití   MeSH
• katétrové infekce diagnóza   etiologie   farmakoterapie   MeSH
• Klebsiella klasifikace   patogenita   účinky léků   MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiologické jevy genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• mnohočetná léková rezistence genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• přenos infekční nemoci prevence a kontrola   MeSH
• rezistence na methicilin imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin imunologie   účinky léků   MeSH
• Streptococcaceae klasifikace   patogenita   účinky léků   MeSH
• ventilátorová pneumonie diagnóza   farmakoterapie   prevence a kontrola   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Úvod: K vážným problémům současné medicíny patří stoupající odolnost patogenních bakterií k antimikrobním léčivům. Možnosti řešení problému bakteriální rezistence lze spatřovat především ve snížení spotřeby antibiotik a zvýšení kvality jejich používání. Důležitou oblastí je však i vývoj nových antimikrobních léčiv a jejich uplatnění v klinické praxi. K novým antibiotikům patří tigecykhn ze skupiny glycylcyklinů. Cílem předložené práce bylo stanovení jeho in vitro účinnosti na vybrané multirezístentní bakterie. Materiál a metody: Z klinického materiálu pacientů hospitalizovaných ve Fakultní nemocnici Olomouc byly izolovány enterobakterie s produkcí ESBL a AmpC širokospektrých beta-laktamáz, methicilin-rezistentní kmeny Staphylococcus aureus (MRSA) a vankomycinrezistentní enterokoky (VRE). U těchto izolátů byla stanovena citlivost k tigecyklinu standardní diluční mikrometodou. Výsledky: Celkem bylo testováno 350 izolátů (100 MRSA, 100 VRE, 100 ESBL-pozitivních a 50 AmpC-pozitivních enterobakterií). V případě MRSA a VRE nebyla zaznamenána rezistence k tigecyklinu a minimální inhibiční koncentrace (MIC) nepřesáhla hodnotu 0,25 mg/l u VRE a 0,5 mg/l u MRSA. V případě ESBL-pozitivních enterobakterií byla prokázána 97% citlivost (rozmezí MIC < 0,06-4 mg/l), u AmpC-pozitivních enterobakterií bylo zaznamenáno rozmezí MIC < 0,03-2 mg/l a citlivost dosáhla hodnoty 98 %. Závěr: Tigecyklin lze považovat za vhodnou alternativu pro léčbu infekcí způsobenými uvedenými multirezistentnímí kmeny.

Currently, one of the most serious problems in medicine is the increasing resistance of pathogenic bacteria to antimicrobial drugs. Bacterial resistance may potentially be solved in particular by decreasing the consumption of antibiotics and increasing the quality of their use. Equally important, however, is the development of new antimicrobial drugs and their use in clinical practice. One of the new antibiotic agents is tigecycline of the glycylcycline group. The presented work aimed at assessing its in vitro effect on selected multiresistant bacteria. MATERIAL AND METHODS: Clinical samples were collected from patients hospitalized in the University Hospital Olomouc to isolate ESBL- and AmpC beta-lactamase-producing enterobacteria, methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains and vancomycin-resistant enterococci (VRE). In the isolates, susceptibility to tigecycline was determined by the standard microdilution method. RESULTS: A total of 350 isolates were tested (100 MRSA, 10 0 VRE, 100 ESBL-positive and 50 AmpC-positive enterobacteria). In the cases of VRE and MRSA, no resistance to tigecycline was detected and the minimum inhibitory concentrations (MIC) did not exceed 0.25 mg/l and 0.5 mg/l, respectively. In ESBL-positive enterobacteria, 97% susceptibility (MIC range = or <0.06 to 4 mg/l) was detected; in AmpC-positive enterobacteria, the MIC range was = or <0.03-2 mg/l and susceptibility reached 98 %. CONCLUSION: Tigecycline may be considered a suitable alternative in the treatment of infections caused by the above-mentioned multiresistant strains.

• MeSH
• antibakteriální látky farmakologie   MeSH
• beta-laktamasy biosyntéza   MeSH
• Enterobacteriaceae metabolismus   účinky léků   MeSH
• Enterococcus účinky léků   MeSH
• methicilin rezistentní Staphylococcus aureus účinky léků   MeSH
• mikrobiální testy citlivosti MeSH
• minocyklin analogy a deriváty   farmakologie   MeSH
• mnohočetná bakteriální léková rezistence MeSH
• rezistence na vankomycin účinky léků   MeSH

Autori analyzujú výskyt nozokomiálnych infekcií na ich pracovisku v rokoch 1999–2006. Výskyt kolísal od 1,92 % až po 4,24 % v jednotlivých rokoch s priemerom 3,12 %. Najčastejšie sa vyskytovali ranové infekcie, febrility spojené s pozitívnymi hemokultúrami a močové infekcie. Priemerná doba hospitalizácie pri nozokomiálnej infekcii sa predĺžila 3,5krát a stúpli náklady na liečbu. Upozorňujú aj na sporadický výskyt multirezistentných kmeňov – MRSA, MRCoNS, ESBL+ Klebsiella spp., Proteus spp., Enterobacter spp. a E. coli. Zásadný význam majú dôsledné preventívne opatrenia šírenia infekcie, týkajúce sa prameňov nákazy, zdravotníckeho materiálu, prerušenia ciest prenosu, ochrany vnímavých jedincov a zisteného výskytu nozokomiálnych nákaz.

The authors analyze the prevalence of nosocomial infections in their facility between 1999 and 2006. The annual rates ranged from 1.92 % to 4.24 %, with an average prevalence of 3.12 %. The most frequent were wound infections, febrile conditions associated with positive blood culture and urinary tract infections. In nosocomial infections, the average length of hospitalization increased by a factor of 3.5 and treatment costs rose. Sporadically, multiresistant strains were detected, such as MRSA, MRCoNS, ESBL+ Klebsiella spp., Proteus spp., Enterobacter spp. and E. coli. Measures preventing infections from spread are of crucial importance. These are concerned with the source of infection, medical supplies, breaking the route of transmission, protection of susceptible individuals and detected nosocomial infections.

• MeSH
• beta-laktamová rezistence imunologie   účinky léků   MeSH
• chirurgie statistika a číselné údaje   trendy   MeSH
• Escherichia coli patogenita   účinky léků   MeSH
• infekce chirurgické rány komplikace   prevence a kontrola   MeSH
• infekce močového ústrojí komplikace   prevence a kontrola   MeSH
• infekce spojené se zdravotní péčí ekonomika   komplikace   prevence a kontrola   MeSH
• mnohočetná léková rezistence imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na methicilin imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin imunologie   účinky léků   MeSH
• Staphylococcus aureus patogenita   účinky léků   MeSH

Glycylcykliny jsou semisyntetické deriváty tetracyklinů se širokým spektrem účinku. Prvním zástupcem, který se dostal do klinického používání, je tigecyklin. Tigecyklin se na ribozomy váže s vyšší afinitou a v jiné prostorové orientaci než tetracykliny. In vitro je tigecyklin aktivní proti mnoha grampozitivním, gramnegativním, atypickým i anaerobním bakteriím. Na kmeny jednoho druhu bakterií působí tigecyklin stejně bez ohledu na jejich citlivost nebo rezistenci k jiným antibiotikům. Zvlášť významná je tato skutečnost u kmenů bakterií rezistentních k lékům volby, jejichž počet v ČR vzrůstá. Patří mezi ně Staphylococcus aureus rezistentní k oxacilinu (MRSA), Enterococcus faecium rezistentní k vankomycinu (VRE) a producenti širokospektré b-laktamázy (ESBL), zejména E. coli. Tigecyklin je indikován k léčbě komplikované infekce kůže a měkkých tkání, zejména u nozokomiálních infekcí vyvolaných MRSA a komplikovaných intraabdominálních infekcí (se smíšenou grampozitivní i gramnegativní flórou).

Glycylcyclines are semisynthetic derivatives of tetracyclines with a broad spectrum of activity. Tigecycline is the first member of the glycylcycline class to be put into clinical use. Tigecycline binds to bacterial ribosomes with greater affinity and in a different pattern than tetracyclines. In vitro , tigecycline is active against multiple Gram-positive, Gram-negative, atypical and anaerobic bacteria. It is equally effective against all strains of a species regardless of their susceptibility or resistance to other antibiotics. This fact is particularly relevant in view of bacterial strains resistant to the drugs of choice, the number of which is ever increasing in the Czech Republic. These are oxacillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), vancomycin-resistant Enterococcus faecium (VRE) and extended-spectrum beta-lactamase producers, in particular E. coli . Tygecycline is indicated for use in the treatment of complicated infections of the skin and soft tissues, primarily of hospital infections caused by MRSA and severe intraabdominal infections with the co-involvement of Gram-positive and Gram-negative bacterial species.

• Klíčová slova
• Tygacil,
• MeSH
• bakteriologické techniky metody   MeSH
• léčivé přípravky MeSH
• lidé MeSH
• minocyklin farmakologie   MeSH
• rezistence na methicilin účinky léků   MeSH
• rezistence na tetracyklin účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin účinky léků   MeSH
• těhotenství účinky léků   MeSH
• tetracyklin farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• těhotenství účinky léků   MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• MeSH
• acetamidy terapeutické užití   MeSH
• antibakteriální látky imunologie   terapeutické užití   MeSH
• artroplastiky kloubů škodlivé účinky   MeSH
• bakteriální léková rezistence genetika   imunologie   účinky záření   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• lidé MeSH
• ortopedie metody   MeSH
• osteomyelitida imunologie   komplikace   terapie   MeSH
• rezistence na methicilin genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• stafylokokové infekce genetika   imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• antibakteriální látky izolace a purifikace   metabolismus   MeSH
• bakteriální léková rezistence genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• biofilmy růst a vývoj   účinky léků   MeSH
• financování vládou MeSH
• lysostafin imunologie   MeSH
• oxacilin MeSH
• rezistence na vankomycin genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• Staphylococcus aureus genetika   imunologie   růst a vývoj   MeSH

• MeSH
• antibakteriální látky * škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• bacitracin škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• Bacteria MeSH
• bakteriální léková rezistence * fyziologie   imunologie   účinky léků   MeSH
• bakteriologie trendy   MeSH
• cefalosporiny škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• kombinace léků trimethoprim a sulfamethoxazol škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• makrolidy škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• peniciliny škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• rezistence na ampicilin fyziologie   imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na chloramfenikol fyziologie   imunologie   účinky léků   MeSH
• rezistence na vankomycin fyziologie   imunologie   účinky léků   MeSH
• Staphylococcus aureus * patogenita   účinky léků   MeSH
• statistika jako téma MeSH
• tetracykliny škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH