Cervikální hlen je viskózní kapalina fungující jako zátka děložního čípku. V cervikálním hlenu můžeme detekovat produkty endometriálních a cervikálních žláz. Cervikální hlen je dále obohacen transudátem pocházejícím z vejcovodů a proteiny pocházející z vaječníků, peritonea a vzdálených tkání. Se zvyšující se hladinou ovariálních estrogenů se vlastnosti cervikálního hlenu mění tak, že umožňují snadnější odběr a zpracování. Z tohoto důvodu jsme vybrali skupinu deseti pacientek léčených kontrolovanou ovariální hyperstimulací pro in vitro fertilizaci v centru asistované reprodukce. Tato studie se zaměřuje na proteomickou charakterizaci cervikálního hlenu a na buněčnou a tkáňovou lokalizaci identifikovaných proteinů. Nejvíce intenzivními proteiny identifikovanými v cervikálním hlenu jsou muciny, ale bylo nalezeno také mnoho méně abundantních proteinů vnitrobuněčného původu. Analýza tkáňových expresí odhalila mnoho proteinů, které jsou kromě tkání ženských reprodukčních orgánů exprimovány také v jiných tkáních a mimo jiné také proteiny specifické pro varlata, játra, placentu, oční sítnici a mozeček. Tato studie dále potvrzuje vhodnost cervikálního hlenu jako zdroje proteomických biomarkerů nejen pro diagnostiku ženského reprodukčního traktu.
Cervical mucus is a viscous fluid functioning as a cervix plug. Products of the endometrial and cervical glands can be detected in the cervical mucus. Cervical mucus is further enriched with transudate originating from the fallopian tubes and proteins originating from the ovaries, peritoneum and distant tissues. With increasing levels of ovarian estrogens, the properties of cervical mucus for possible collection and processing change appropriately. For these reasons, we chose a group of 10 patients treated in the center of assisted reproduction by controlled ovarian stimulation for in vitro fertilization. This study focuses on the proteomic characterization of cervical mucus and localizes the possible sources of the identified proteins. The most abundant proteins were extracellular proteins, mainly mucins; however, most of the identified proteins, present usually in lower quantities, were of intracellular origin. The tissue analysis revealed that proteins from female reproductive organs are also expressed in other tissues in addition to female reproductive organs, but also proteins specific to the testis, liver, placenta, retina, and cerebellum. This study confirms the suitability and high potential of cervical mucus as a source of proteomic biomarkers not only for the diagnosis of the female reproductive tract.
- Klíčová slova
- tkáňové exprese,
- MeSH
- cervikální hlen * chemie MeSH
- klinická studie jako téma MeSH
- lidé MeSH
- proteomika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Cervical mucus (CM) is a viscous fluid that is produced by the cervical glands and functions as a uterine cervix plug. Its viscosity decreases during ovulation, providing a window for non-invasive sampling. This study focuses on proteomic characterization of CM to evaluate its potential as a non-invasively acquired source of biomarkers and in understanding of molecular (patho)physiology of the female genital tract. The first objective of this work was to optimize experimental workflow for CM processing and the second was to assess differences in the proteomic composition of CM during natural ovulatory cycles obtained from intrauterine insemination (IUI) cycles and in vitro fertilization (IVF) cycles with controlled ovarian hyperstimulation. Proteomic analysis of CM samples revealed 4370 proteins involved in processes including neutrophil degranulation, cellular stress responses, and hemostasis. Differential expression analysis revealed 199 proteins enriched in IUI samples and 422 enriched in IVF. The proteins enriched in IUI were involved in phosphatidic acid synthesis, responses to external stimulus, and neutrophil degranulation, while those enriched in IVF samples were linked to neutrophil degranulation, formation of a cornified envelope and hemostasis. Subsequent analyses clarified the protein composition of the CM and how it is altered by hormonal stimulation of the uterus.
- MeSH
- biologické markery MeSH
- cervikální hlen * MeSH
- fertilizace in vitro MeSH
- lidé MeSH
- proteom MeSH
- proteomika MeSH
- umělá inseminace * MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Klíčová slova
- receptivita endometria,
- MeSH
- biopsie MeSH
- cervikální hlen MeSH
- endometrium * diagnostické zobrazování MeSH
- fertilizace in vitro MeSH
- hysteroskopie MeSH
- implantace embrya MeSH
- infertilita * MeSH
- lidé MeSH
- ultrazvuk MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Cíl studie: Děložní hrdlo – cervix uteri – je důležitou součástí dělohy, má specifickou stavbu a funkci. Jeho poruchy mohou být příčinou závažných reprodukčních potíží a těhotenských komplikací. Zajišťuje bariéru mezi prostředím pochvy a endometria. Důležitým faktorem jeho správné funkce je kromě anatomické stavby také cervikální sekret. V průběhu menstruačního cyklu dochází k jeho dynamickým změnám. Rozsáhlý výzkum přináší nové poznatky o celulárních a molekulárních biomarkerech v cervikálním sekretu přítomných, které mohou přispět k diagnostice poruch lidské reprodukce. Cílem práce je prezentovat současné poznatky o funkci děložního hrdla a cervikálního sekretu při diagnostice poruch plodnosti. Typ studie: Přehledová práce. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika Lékařské fakulty Masarykovy univerzity a FN Brno; Porodnicko-gynekologická klinika FN a LF UP Olomouc; Katedra ošetřovatelství a porodní asistence Lékařské fakulty Masarykovy univerzity a FN Brno. Metodika: Literární rešerše databáze PubMed publikované do února 2020 s termíny zaměřenými na: "cervical mucus", "sperm cervical mucus intraction, "cervical mucus composition", "cervical biomarkers". Výsledky: Literární rešerší byly shrnuty aktuální poznatky o roli děložního hrdla a cervikálního sekretu v oblasti lidské reprodukce. Analýza molekulárních a celulárních biomarkerů v cervikálním sekretu může přispět k diagnostice poruch plodnosti. Závěr: Specifická analýza buněčného a molekulárního složení cervikálního sekretu přináší důležité poznatky o jeho fyziologické funkci a možných poruchách. Poskytuje informace o aktivitě a receptivitě endometria, průběhu těhotenství a jeho patologiích včetně rizika předčasného porodu.
Objective: Uterine cervix is an important part of female reproductive system. It has a specific structure and function. Disorders of cervix may cause severe reproductive and pregnancy complications. It creates a barrier between intruterine and vaginal environment. Cervical mucus is one of the important factors of correct cercvical function. It udergoes dynamic changes during the menstrual cycle. Latest research brings new knowledge about cellular and molecular biomarkers present in cervical mucus, which may contribute to better diagnosis of human reproduction disorders. Objective of this article is to present contemporary knowledge of the role of cervical mucus in human reproduction. Design: Review article. Setting: Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine, Masaryk university and University Hospital Brno; Department of Obstetrics and Gynecology, University Hospital Faculty of Medicine, Palacky University, Olomouc; Department of Nursing and Midwifery, Faculty of Medicine, Masaryk university and University Hospital Brno. Methods: PubMed was searched for articles in English indexed until February 2020 with terms of: "cervical mucus", "sperm cervical mucus intraction", "cervical mucus composition", "cervical biomarkers". Results: Literary research has summarized contemporary knowledge about the uterine cervix and cervical mucus and their role in human reproduction. Analysis of molecular and cellular biomarkers in cervical mucus can be useful in diagnostics of infertility. Conclusion: Analysis of cellular and molecular composition of cervical mucus brings new knowledge about its fysiological fuction and possible disorders. It provides information about endometrial activity and receptivity, course of pregnancy and its possible complications such as risk of preterm labour.
- Klíčová slova
- cervikální biomarkery,
- MeSH
- cervikální hlen * MeSH
- cervix uteri anatomie a histologie fyziologie patofyziologie MeSH
- fertilita MeSH
- komplikace těhotenství etiologie MeSH
- lidé MeSH
- proteom MeSH
- těhotenství MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- těhotenství MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Cíl studie: Je známo, že zvýšený počet NK buněk bývá spojován s autoimunitními poruchami a že hraje svoji úlohu i v neplodnosti. Cílem našeho výzkumu bylo sledování denzity NK buněk CD56+ a CD16+ v ovulačním cervikálním sekretu a v endometriu u žen se sníženou plodností i v souvislosti s aktuálním stavem protilátek proti fosfolipidům, spermiím i proti HHV-6. Typ studie: Původní práce. Název a sídlo pracoviště: Poradna pro imunologii reprodukce, Genetika - Plzeň. Metodika: Sedmdesát dva náhodně vybraných žen ve věku 20 - 39 (průměrný věk 32,3) let jsme rozdělili na padesát sedm pacientek s opakovanými doposud nevysvětlitelnými potraty a patnáct zdravých fertilních žen. Sledovali jsme hormonální stav, včetně ovulace, humorální autoimunitní odpovědi ve screeningu reprodukční imunologie, trombofilní stavy, karyotypizaci, hysteroskopické nálezy a imunohistologicky i endometrium. V období odběrů ovulačních cervikálních sekretů (OCM) a endometria pacientky neměly žádné klinické ani laboratorní nálezy vaginitidy. U jedné z pacientek byl diagnostikován antifosfolipidový syndrom, jedna žena má diabetes mellitus I. Uterinní NK buňky CD56+ a CD16+ a NK buňky v OCM jsme idetifikovali imunochemicky, antifosfolipidové protilátky klasickou ELISA metodou. Použili jsme také nepřímý MAR-test ke sledování lokálních protilátek proti spermiím, dále nepřímou imunofluorescenci k detekci serových a OCM IgM, IgG protilátek proti HHV-6 v době ovulace. Výsledky: Vysokou denzitu NK buněk CD56+ a CD16 v OCM a endometriu jsme nalezli pouze u dvou žen s opakovanými potraty. NK buňky v OCM v jiných vzorcích pacientek nenalezli. U dvaceti tří (40 %) pacientek jsme zjistili prevalenci vysoké denzity NK buněk CD56+, NK CD16+ u jedenácti (19 %), pozitivitu u obou společně, tedy NK buněk CD 56+ a D 16+ u osmi (14 %). Aktuální sérové hladiny a v OCM v IgG proti HHV-6 byly u všech vyšetřovaných žen nezvýšené. U žádné ženy nebyly přítomny cervikální spermaglutinační protilátky. Závěr: Srovnávali jsme denzitu NK buněk CD56+ a CD16+ v ovulačním sekretu a v sekrečním endometriu u nfertilních pacientek. Naše výsledky prokázali slizniční buněčnou aktivitu v cervikální oblasti v období ovulace jen u dvou infertilních žen. Vyloučili jsme abnormální počet NK buněk z důvodu celkové nebo lokální infekce. Otázka ale zůstává otevřená pro další plánovaný výzkum jsou cervikální NK buňky fixované, nebo migrují z endometria do OCM?
Objective: An increased number of NK cells is associated with autoimmune disorder and is known to play a role in infertility. The aim of our research was to monitor the density of NK cells CD56+ and CD16+ in ovulatory cervical mucus (OCM) and in endometrium in infertile women as well as in connection with the actual status of antibodies against phospholipids, sperm and HHV-6 antibodies. Type of study: Original aticle. Setting: Genetika - Plzeň. Methods: Seventy-two randomly selected women aged 20 -39 (mean age: 32.3) years old resulted in fifty-seven patients with repeated unexplained miscarriages, and fifteen fertile healthy women. The hormonal status was studied including ovulation, the humoral autoimmune responses to eight phospholipids, trombophilia, karyotyping, hysteroscopy, and endometrium immunohistology. Patients were without any clinical and laboratory symptoms of vaginitis at the time of OCM sampling and endometrium study. In one patient antiphospholipid syndrome was present, and in one woman diabetes mellitus was identified. Uterine NK cells CD56+ , CD16+ and NK cells in OCM were identified by immunocytochemistry, antiphospholipid antiboides by ELISA. We used indirect MAR-test for study of local spermagglutinating antibodies in OCM. Indirect immunofluorescent method was used for detection of serum and OCM IgM, IgG antibodies against HHV-6 levels at the time of ovulation. Results: We found both high density of NK cells CD56+ and CD16+ in OCM and in endometrium in only two infertile women with repeated abortions. NK cells in OCM were missing in other samples of patients. The prevalence of high density of NK cells CD56+ in the endometrium was seen in twenty three (40%), NK cells CD16+ in eleven (19%), NK cells 56+ and NK cells 16+ together in eight (14%). Levels of serum and OCM IgG against HHV-6 in all examined patients were not elevated, no cervical sperm antibodies were found. Conclusion: We compared density of NK cells CD56+ and CD16+ in OCM and secretory endometrium in all infertile patients. Our results show that cell mucosal activity in the cervical area at the time of ovulation in two infertile patients was evident. We excluded the abnormal number of NK cells owing to local and general viral infection (HHV-6). But our question still remains are cervical NK cells fixed or still migrating from endometrium into OCM? New research is planned.
- MeSH
- buňky NK * MeSH
- cervikální hlen cytologie MeSH
- dospělí MeSH
- endometrium cytologie MeSH
- klinická studie jako téma MeSH
- lidé MeSH
- lidský herpesvirus 6 MeSH
- mladý dospělý MeSH
- ženská infertilita * etiologie patofyziologie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Cíl studie: Stavba a správná funkce endometria je nezbytná pro implantaci embrya, vývoj těhotenství a porod. Je výsledkem působení mnoha činitelů – anatomické a histologické stavby, hormonálních vlivů, signálních drah na molekulárně genetické úrovni. Málo známým faktorem je přítomnost mikroorganismů na povrchu endometria. Tradičně byla děložní dutina považována na sterilní prostředí, nové poznatky tento pohled zásadně mění. Cílem práce je prezentovat současné poznatky o mikrobiomu endometria a jeho významu pro implantaci a vývoj embrya. Typ studie: Přehledová práce. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika Lékařské fakulty Masarykovy univerzity a FN Brno; Porodnicko-gynekologická klinika FN a LF UP Olomouc. Metodika: Literární rešerše databáze PubMed publikované do června 2018 s termíny zaměřenými na „uterine microbiome analysis“ a „endometrial receptivity“. Výsledky: Zásadní informace o kolonizaci endometria bakteriemi přinesly nové diagnostické metody jejich průkazu pomocí analýzy rib ozomální RNA v podjednotce 16S, které jsou schopny prokázat přítomnost a přesně identifikovat bakterie klasickými kultivačními metodami neprokazatelné. Předpokládá se, že mikrobiom endometria moduluje funkci endometriálních buněk a lokálního imunitního systému, svou přítomností a produkcí obranných látek brání rozvoji patogenních mikroorganismů. Závěr: Mikrobiom endometria a jeho aktivita je zatím málo známým faktorem receptivity endometria.
Objective: Structure and correct function of endometrium is necessary for embryo implantation, pregnancy development and childbirth. It is a result of many factors – anatomical and histological structure, hormonal effects and signalling pathways at the molecular genetic level. A little known phenomenon is the presence of microorganisms on the endometrium. Traditionally, the uterine cavity was considered sterile, but new findings have been changing this view fundamentally. The aim of this work is to present new findings on endometrial microbiome and its importance for embryo implantation and development. Design: Review article. Setting: Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine, Masaryk University and University Hospital Brno; Department of Obstetrics and Gynecology, University Hospital Faculty of Medicine, Palacky University Olomouc. Methods: PubMed was searched for articles in English indexed until 30th June 2018 with terms of „uterine microbiome analysis“ and „endometrial receptivity“. Results: The vital information on bacterial colonization of endometrium brought new diagnostic methods for their detection based on ribosomal RNA analysis in 16S subunit, which are capable of detection and exact identification of bacteria that cannot be detected by classical cultivation methods. The endometrial microbiome is assumed to modulate the function of endometrial cells and local immunity system, it prevents growth of pathogenic microorganisms by its presence and production of protective substances. Conclusion: Endometrial microbiome seems to be important factor of endometrial receptivity.
- MeSH
- buněčná imunita MeSH
- cervikální hlen * MeSH
- endometrium * fyziologie mikrobiologie MeSH
- implantace embrya MeSH
- lidé MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Cíl studie: Přehled problematiky mechanismů receptivity endometria při implantaci embrya a možnosti její diagnostiky. Typ studie: Přehledový článek. Název a sídlo pacoviště: Porodnicko-gynekologická klinika, FN a LF UP Olomouc; Ústav molekulární a translační medicíny, LF UP Olomouc. Výsledky: Endometrium je velmi dynamická tkáň procházející cyklickou proliferací, diferenciací a transportem buněk, zvláště pak buněk imunitního systému. Vše se děje v závislosti na změně cirkulujících ovariálních hormonů estradiolu a progesteronu. Remodelování endometria v době implantace embrya je kontrolováno v časoprostoru intenzitou senescence deciduálních buněk a efektivitou jejich imunologické likvidace. Receptivita endometria může být dnes hodnocena jak na bázi transkriptomického profilování biopsie endometria pomocí ERA systému, tak i proteomickou analýzou endometriálního sekretomu nebo cervikálního hlenu pomocí metod diferenční gelové elektroforézy (DIGE) a hmotnostní spektrometrie (MS). Závěr: Vzhledem k nejnovějším poznatkům v oblasti fyziologie a molekulární biologie endometria by bylo zajímavé aplikovat proteomické přístupy v hledání kandidátních biomarkerů ze vzorků získaných pokud možno neinvazivními postupy a aplikovat je v klinické praxi.
Objective: Literature review of endometrial receptivity in embryo implantation and its diagnostic possibilities. Design: Literature review. Setting: Department of Obstetrics and Gynecology, University Hospital, Faculty of Medicine, Palacky University, Olomouc; Institute of Molecular and Translational Medicine, Faculty of Medicine and Dentistry, Palacky University, Olomouc. Results: Endometrial tissue is very dynamic, undergoing cyclic proliferation, differentiation and cell transportation, especially of immune system cells under the influence of circulating estradiol and progesterone. Endometrial remodelling during embryo implantation is controlled by decidual cells senescence and effectivity of their immunologic destruction. Endometrial receptivity can be assessed by transcriptomic profiling of endometrial biopsy using ERA system or proteomic analysis of either endometrial secretome or cervical mucus by gel electrophoresis (DIGE) or mass spectrometry (MS). Conclusion: With respect to recent discoveries in endometrial physiology and molecular biology, clinical application of proteomic approaches in research of potential biomarkers of endometrial receptivity could be of interest.
- Klíčová slova
- endometriální receptivita, proteomická analýza,
- MeSH
- cervikální hlen MeSH
- endometrium * MeSH
- implantace embrya * MeSH
- lidé MeSH
- sekretom MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Chemokines are chemotactic cytokines produced by leukocytes and other types of cells including tumor cells. Their action is determined by the expression of cognate receptors and subsequent signaling in target cells, followed by the modulation of cytoskeletal proteins and the induction of other responses. In tumors, chemokines produced by neoplastic/stroma cells control the leukocyte infiltrate influencing tumor growth and progression. Tumor cells also express functional chemokine receptors responding to chemokine signals, promoting cell survival, proliferation and metastasis formation. Chemokines may be detected in serum of cancer patients, but due to the paracrine nature of these molecules, more significant concentrations are found in the tumor adjacent, non-vascular fluids, collectively called tumor proximal fluids. This review summarizes the expression of CC and CXC chemokines in these fluids, namely in interstitial fluid, pleural, ascitic, and cyst fluids, but also in urine, saliva, cerebrospinal fluid, cervical secretions and bronchoalveolar lavage fluid. Most comparative clinical studies reveal increased chemokine levels in high-grade tumor proximal fluids rather than in low-grade tumors and benign conditions, indicating shorter survival periods. The data confirm peritumoral fluid chemokines as sensitive diagnostic and prognostic markers, as well as offer support for chemokines and their receptors as potential targets for antitumor therapy.
- MeSH
- ascitická tekutina chemie MeSH
- bronchoalveolární lavážní tekutina chemie MeSH
- cervikální hlen chemie MeSH
- chemokiny metabolismus MeSH
- extracelulární tekutina chemie MeSH
- lidé MeSH
- metastázy nádorů MeSH
- moč chemie MeSH
- mozkomíšní mok chemie MeSH
- nádory metabolismus MeSH
- pleura metabolismus MeSH
- receptory chemokinů metabolismus MeSH
- sliny chemie MeSH
- tělesné tekutiny chemie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- přehledy MeSH
Identification of vaginal fluids is an important step in the process of sexual assaults confirmation. Advances in both microbiology and molecular biology defined technical approaches allowing the discrimination of body fluids. These protocols are based on the identification of specific bacterial communities by microfloraDNA (mfDNA) amplification. A multiplex real time-PCR assay (ForFLUID kit) has been developed for identifying biological fluids and for discrimination among vaginal, oral and fecal samples. In order to test its efficacy and reliability of the assay in the identification of vaginal fluids, an interlaboratory evaluation has been performed on homogeneous vaginal swabs. All the involved laboratories were able to correctly recognize all the vaginal swabs, and no false positives were identified when the assay was applied on non-vaginal samples. The assay represents an useful molecular tool that can be easily adopted by forensic geneticists involved in vaginal fluid identification.
- MeSH
- cervikální hlen mikrobiologie MeSH
- DNA bakterií genetika MeSH
- dospělí MeSH
- Enterococcus faecalis genetika izolace a purifikace MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce * MeSH
- laboratoře normy MeSH
- Lactobacillus genetika izolace a purifikace MeSH
- lidé MeSH
- multiplexová polymerázová řetězová reakce * MeSH
- soudní lékařství normy MeSH
- Staphylococcus genetika izolace a purifikace MeSH
- Streptococcus genetika izolace a purifikace MeSH
- vagina mikrobiologie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- hodnotící studie MeSH
- MeSH
- akupunkturní dráhy MeSH
- akupunkturní terapie * metody MeSH
- čchi MeSH
- cervikální hlen MeSH
- dospělí MeSH
- infertilita * diagnóza terapie MeSH
- lidé MeSH
- menstruační cyklus fyziologie MeSH
- nemoci ledvin MeSH
- ovulace fyziologie MeSH
- tradiční čínská medicína * metody využití MeSH
- ženská infertilita diagnóza patologie prevence a kontrola terapie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH