Projekt je zaměřen na stanovení vztahu mezi množstvím a poměrem prozánětlivých M1 a protizánětlivých M2 makrofágů v lidské renální arterii a v přilehlé perivaskulární tukové tkáni u zdravých dárců ledvin - žen. Subpopulace makrofágů budou korelovány ke specifickým rizikovým faktorům aterosklerózy včetně reprodukčního statusu a plazmatických markerům subklinického zánětu. Přímý efekt nízkomolekulárních látek uvolňovaných tukovou tkání na efflux cholesterolu z makrofágů a adhezi a migraci monocytů bude stanoven v tkáňové kultuře.; The relationship of the content and proportion of pro-inflammatory M1 and anti-inflammatory M2 macrophages between the human artery and adjacent perivascular adipose tissue will be determined (tissues obtained in kidney transplantation procedure from living kidney donors - women). The proportion of the macrophage subpopulation will be correlated to traditional as well as non-traditional risk factors of atherosclerosis, including reproductive status and markers of subclinical inflammation in circulation. The direct effect of molecules released from adipose tissue on macrophage cholesterol efflux, monocyte adhesion, and migration will be determined in cell cultures.

• MeSH
• arteria renalis patologie   MeSH
• ateroskleróza epidemiologie   MeSH
• dárci tkání MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy patologie   MeSH
• rizikové faktory kardiovaskulárních chorob MeSH
• tuková tkáň patologie   MeSH
• zánět MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• kardiologie
• angiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Projekt je zaměřen na studium mechanismů přirozené imunity u transplantací ledvin. Studovány budou parametry aktivace lidských monocytů v časném potransplantačním období a při komplikacích léčby (oddálená funkce štěpu/rejekce/infekce). U pacientů po transplantaci ledviny budou monitorovány solubilní formy myeloidních antigenů (sCD14, sCD163, S1008/S10014) jako potenciální biomarkery aktivace monocytů a makrofágů, v průběhu komplikací léčby bude vyšetřováno také zastoupení monocytárních subpopulací CD14+CD16+ a CD14+CD163+ v periferní krvi. Na tkáňovém modelu bude sledován vliv ko-kultivovaných makrofágů na aktivaci (indukce genů a sekrece prozánětlivých cytokinů, exprese aktivačních membránových znaků) renálních epiteliálních buněk a na jejich reparační schopnosti (rychlost obnovy mechanicky porušené konfluentní vrstvy). Dále budou porovnávány na úrovni mRNA známky aktivace monocytů při kokultivaci s autologními vs. allogenními v.s. xenogenními buňkami za účelem posoudit možnost jejich případné allo- či xeno-reaktivity.; The project is focused on the study of innate immune mechanisms in kidney transplantation. The parameters of human monocytes activation will be studied in early post-transplant period and in treatment complications (delayed graft function/rejection/infection). Soluble forms of myeloid antigens (sCD14, sCD163, S100A8/S100A9) will be monitored in kidney transplant patients as potential biomarkers of monocyte/macrophage activation, in the case of complications, proportions of monocytes subpopulations CD14+CD16+ and CD14+CD163+ in peripheral blood will be also evaluated. Using an co-culture model, the effect of macrophages on renal epithelial activation (gene induction and release of cytokines, expression of activation membrane markers) and reparative ability (renewal of mechanicaly damaged monolayer) will be studied. Furthermore, mRNA markers of monocyte activation in a co-culture with autologous v.s. allogenic v.s. xenogenic cells will be tested to asses potential allo (xeno-) reactivity of innate immune cells.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• epitelové buňky imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy imunologie   MeSH
• monocyty imunologie   MeSH
• přirozená imunita MeSH
• rejekce štěpu imunologie   MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• transplantologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Analyzovat možný přímý vliv tukové tkáně na aterosklerotické změny u člověka s využitím tkáňových vzorků odebraných v průběhu transplantace. Velikost perivaskulární tukové tkáně stanovit v explantovaných srdcích metodou kvantitativní mikroskopické stereologie u skupin pacientů lišících se stupněm koronární aterosklerózy. Fenotypizovat populace makrofágů izolovaných z viscerální a podkožní tukové tkáně zdravých jedinců a osob s pokročilou aterosklerózou, porovnat velikosti subpopulací a stanovit expresi pro- a protizánětlivých genů v jednotlivých typech tukové tkáně. Korelovat nově získané parametry s hodnotou známých rizikových faktorů aterosklerózy.; A possible direct effect of adipose tissue to atherosclerotic changes in men will be analyzed using perivascular adipose tissue measurement in hearts explanted during heart transplantation. The size of perivascular adipose tissue will be analyzed by quantitative microscopic stereology in two groups differing in atherosclerosis development. Phenotype of macrophages isolated from visceral and subcutaneous adipose tissue of healthy individuals and patients with advanced atherosclerosis will be compared as well as gene expressions of pro- and anti-inflammatory genes at the same tissues. These data will be compared individually with traditional risk factors of atherosclerosis.

• MeSH
• ateroskleróza MeSH
• exprese genu MeSH
• makrofágy MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• tuková tkáň MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• angiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Biologické účinky látek manumycinového typu budou testovány pomocí modelu tkáňových kultivací s lidskými liniemi monocytů/makrofágů (THP-1) a epiteliálních linií. Pro screening potenciálního efektu testovaných látek na tvorbu prozánětlivých cytokinů a chemokinů bude využita multiplexová kvantitativní RT-PCR s následným měřením koncentrací cytokinů, imunofenotypizací a funkčními testy. Kmeny streptomycet produkující manumycinové látky budou identifikovány pomocí genového screeningu, bude provedena izolace a charakterizace nových látek, konstrukce kosmidových knihoven a genetická manipulace horního polyketidového řetězce manumycinů (délka, štěpení, saturace) včetně genového "shufflingu" mezi producenty.; Biological effects of manumycin-related compounds will be tested using a tissue culture models with human monocyte/macrophages (THP-1) and epithelial cell lines. For a screening of potential effect of tested compounds on pro-inflammatory cytokines and chemokines production, multiplex qRT-PCR will be used followed by measurement of proinflammatory cytokine concentrations, immunophenotypying and functional tests. Genetic screening will be used for identification of streptomycete strains producing manumycine-related compounds with consequent isolation and characterization of new compounds, construction of cosmid libraries, and genetic manipulations with the upper polyketide chain of manumycins (length, branching, saturation) including gene shuffling between producers.

• MeSH
• azithromycin MeSH
• cytokiny MeSH
• epitelové buňky MeSH
• genetické techniky MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• imunomodulace MeSH
• klarithromycin MeSH
• kosmidy MeSH
• makrofágy MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• Streptomyces MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• biologie
• farmacie a farmakologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Buňky imunitního systému infiltrující nádory, včetně tumor asociovaných makrofágů (TAM) a regulačních T lymfocytů (Treg), interagují jak se samotnými nádorovými buňkami, tak i s fibroblasty, endoteliemi, extracelulární matrix apod. Analýza vzájemných vztahů nádorových buněk spinocelulárních karcinomů hlavy a krku (HNSCC), včetně podskupiny vykazující shodné fenotypové znaky jako buňky kmenové, s okolními tkáněmi a zejména s buňkami imunitního systému - korelace počtu TAM s mírou neoangiogeneze (u řady malignit korelující s negativní prognózou), převažující polarizace TAM populace na M2 fenotyp, infiltrace CD4+ Tregy i CD8+ supresory a analýza cytokinového profilu v prostředí HNSCC jsou hlavními cíly navrhovaného projektu. Předpokládané výsledky by mohly pomoci upřesnit diagnostické prostředky a mohly by být dalším krokem v úvahách o ovlivnění imunitní odpovědi jako součásti protinádorové léčby.; Tumor infiltrating cells of the immune system, including tumor associated macrophages (TAM) and regulatory T lymphocytes (Treg) interact not only with tumor cells but also with fibroblasts, endothelia, extracellular matrix etd. Analysis of interactions of tumor cells, including tumor cells expressing phenotypic markers corresponding to stem cells, with the surrounding tissues and especially with the cells of the immune system – correlation of TAM numbers with density of neoangiogenesis (in several malignancies correlation with negative prognosis was proved), dominant M2 phenotypic polarization of TAM population, infiltration of CD4+ Treg and CD8+ suppressor cells, and analysis of cytokine profile in HNSCC are the main goals of the proposed project. Expected results would allow us to improve diagnostic methods and would be the next step to speculate about modulation of immune reaction as an integral part of anti-tumor therapy.

• MeSH
• makrofágy MeSH
• nádorové kmenové buňky MeSH
• nádorové mikroprostředí MeSH
• nádory hlavy a krku MeSH
• prognóza MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• spinocelulární karcinom MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Projekt vymezuje úlohu monocytární subpopulace CD14+CD16+ v transplantačních reakcích proti ledvinnému alotransplantátu a u protilátkové rejekce. Monitorováno bude zastoupení subpopulací monocytů v periferní krvi osob po transplantaci ledviny s ohledem na klinický stav, výskyt alospecifických protilátek a imunosupresivní režim. Stanoveno bude také zastoupení T regulačních buněk (CD3+CD25+Foxp3+) a vyšetřeny genové polymorfismy CD16 molekuly. Na modelu lidské monocyto-makrofágové line THP-1 bude pomocí cytokinů indukována a dále modulována exprese CD14+CD16+ fenotypu s ohledem na současné změny v cytokinovém a chemokinovém genotypu. Ke stimulaci budou využity prozánětlivé cytokiny z rodiny IL-1 (IL-1beta, IL-18, IL-33) a TNF alfa a dále i cytokiny související s koncepcí Th1/Th2/Th17 polarizace (IFN gama, IL-4, IL-13, IL-23, IL-17). Projekt může přispět ke kvalitnějšímu monitorování pacientů po transplantaci ledviny a novým poznatkům o cytokinových interakcích při diferenciaci mononukleárních fagocytů.; The project outlines the role of CD14+CD16+ monocyte subpopulation in transplant reactions against the kidney allograft and in antibody mediated rejection. Monitoring of peripheral monocyte subpopulations will be performed with respect to clinical parameters, occurence of allospecific antibodies, and immunosupressive schedule. The determination of T regulatory cells (CD4+CD25+Foxp3+) and gene polymorphisms of CD16 molecule will be assessed. In a model of human monocyte/macrophage cell line THP-1, the expression of CD14+CD16+ phenotype will be induced by cytokines and the genotype will be assessed with respect to chemokine and cytokine production. Cytokines from IL-1 family (IL-1beta, IL-18, IL-33) and TNF alfa and furthermore, cytokines associated withTh1/Th2/Th17 polarization (IFN gama, IL-4, IL-13, IL-23, IL-17) will be used as stimuli. The project may contribute to better monitoring of kidney transplant patients and new information on cytokine interactions in mononuclear phagocyte differentiation.

• MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• CD antigeny analýza   krev   MeSH
• cytokiny analýza   MeSH
• interleukin-12 sekrece   MeSH
• monitorování imunologické MeSH
• NF-kappa B fyziologie   MeSH
• podskupiny lymfocytů MeSH
• prekurzorové buňky monocytů-makrofágů MeSH
• rejekce štěpu MeSH
• TNF-alfa sekrece   MeSH
• transplantace ledvin imunologie   MeSH
• výběr pacientů MeSH
• zkracování telomer MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• nefrologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Centrálním žilním katetrem bude aplikován fyziologický roztok či monoklonální protilátka proti epidermal growth factor nebo transforming growth factor beta.V každé uvedené skupině zvířat bude provedena parciální resekce jater či ligace portální žíly. Bude ultrasonograficky sledována hypertrofie funkčního nebo ponechaného jaterního parenchymu. Budou stanoveny sérové hladiny biochemických parametrů a růstových faktorů vztahujících se k regeneraci jater. Bude stanovena mitotická aktivita v regenerátu. Experiment má za cíl ozřejmit vliv monoklonální protilátky proti prasečímu EGF nebo TGF-ß na průběh regenerace jater a tím přispět k posouzení vhodnosti aplikace biologické léčby v časném předoperačním období. Cíle projektu jsou v souladu s prioritami účelové podpory: nové využití klinických možností kombinace molekulárně cílené léčby s klasickými léčebnými postupy, zavádění nových chirurgických postupů a vypracování nových algoritmů pro terapii.; Through the central venous catheter will be repeatedly applied the physiological solution or porcine recombinant monoclonal antibody against epidermal growth factor or transforming growth factor beta. Afterwards left hemihepatectomy or ligationof portalvein branches for right lobes will be performed in presented experimental groups. The hypertrophy of functional or remnant liver parenchyma will be monitored by ultrasonography. The serum levels of biochemical parameters and growth factors with relationto liver regeneration will be assessed. The mitotic activity will be evaluated in regenerating liver parenchyma. The aim of experiment is to demonstrate the influence of the monoclonal antibody against porcine EGF and TGF- ß upon liver regeneration and contribute to appreciation of eligibility of application of biological therapy in early preoperative period.

• MeSH
• biologická terapie MeSH
• epidermální růstový faktor antagonisté a inhibitory   MeSH
• hepatocyty MeSH
• Kupfferovy buňky MeSH
• nádory jater chirurgie   MeSH
• prasata MeSH
• regenerace jater MeSH
• terapeutická embolizace MeSH
• vena portae MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hepatologie
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

I. V plánovaném projektu bude stanovována a provnávána aktivita peritoneálních makrofágů po laparoskopických a laparotomických výkonech. Aktivita těchto makrofágů odráží stav lokální imunitní reakce. II. V první experimentální části budou porovnávány aktivity makrofágů 24 a 72 hodin po laparoskopických a laparotomických operací u 100 pokusných zvířat. Zároveň bude stanovena aktivita i periferních makrofágů a provedeno porovnání s peritoneálními. III. V druhé klinické části bude u pacientů po laparoskopických a laparotmických výkonech proveden 24 a 72 hodin po operaci odběr sekretu z drénu a stanovena aktivita peritoneálních makrofágů. Též bude porovnána s aktivitou makrofágů odebraných z periferní krve. IV. Během sledování pacientů budou 24 hodin po operaci provedeny odběry markerů celkové imunitní reakce (Il-1, IL-6, TNF, CRP, orosomukoid).; I. The project in concern will determine and compare the activity of the peritoneal macrophages after laparoscopic and laparotomic procedures. Their activity reflects the quality of the local immune response. II. The first, i.e. experimental part will compare the activity of the macrophages 24 and 72 hours after laparoscopic and laparotomic procedures in 100 experimental animals. Simultaneously, the activity of peripheral macrophages will be determined and compared to the peritoneal macrophages. III. The other, i.e. clinical part will involve patients who underwent laparoscopic and laparotomic procedures. 24 and 72 hours after a procedure, secretion from a drain will be collected from every patient. The activity of the peritoneal macrophages will alsobe determined and compared to the activity of the macrophages taken from peripheral blood. IV. The markers of the overall immune response will be collected from all patients 24 hours after being operated (Il-1, IL-6, TNF, CRP, orosomucoid).

• MeSH
• aktivace makrofágů imunologie   MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• laparoskopie MeSH
• miniinvazivní chirurgické výkony MeSH
• peritoneální makrofágy MeSH
• peritoneální nádory MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• vnitřní lékařství
• onkologie
• chirurgie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Bude zavedena (a optimalizována) metoda, která stanovuje eflux - odtok nadbytečného cholesterolu z periferních buněk na částice HDL - reverzní transport cholesterolu (RTC). S pomocí této metody bude rychlost RTC sledována u tří nutričních stavů, u kterých prosté měření koncentrace HDL nemusí vypovídat o skutečném stavu reverzního transportu cholesterolu z periferních buněk a u reprezentativního vzorku české populace.; Methods for eflux of cholesterol from cell membrane determination will be introduced and otpimized. Reverse cholesterol transport (RTC) will be measured with this method in 3 nutritional situations in which simple determination of HDL cholesterol need not correspond to actual status of RTC (cholesterol eflux from pheripheral cells).

• MeSH
• alkoholické nápoje škodlivé účinky   MeSH
• apolipoprotein A-I metabolismus   MeSH
• biologický transport MeSH
• cholesterol metabolismus   MeSH
• dietoterapie MeSH
• lipoproteiny HDL metabolismus   MeSH
• makrofágy chemie   MeSH
• obezita patofyziologie   MeSH
• odběr biologického vzorku MeSH
• redukční dieta MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• vnitřní lékařství
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Pomocí PCR-SSP bude posouzen význam genových polymorfismů prozánětlivých cytokinů (TNF alfa, IL-1 beta, IL-6 a IL-18) pro prognózu a výskyt komplikací u pacientů po transplantaci ledviny, tento genotyp bude korelován k hladinám cytokinů v séru. Na in vitro modelu lidského renálního epitelu bude po stimulaci prozánětlivými cytokiny analyzována pomocí hybridizační metody GeneArrays exprese genů pro chemokiny s ohledem na na časovou dynamiku jejich sekrece. S využitím buněčné linie renálního epitelu, primárních buněk proximálních tubulů a makrofágové line THP-1 bude studována exprese prozánětlivých genů a fenotypické změny indukované v epitelu po mezibuněčném kontaktu s monocyty/makrofágy.; Gene polymorphisms of proinflammatory cytokines (TNF alpha, IL-1 beta, IL-6, and IL-18) will be studied using PCR-SSP with respect to prognosis and incidence of complications in kidney transplant patients, the genotype will be correlated to serum levels.In vitro model of renal epithelium stimulated with proinflammatory cytokines will be used to study time course of chemokine gene induction using GeneArrays method together with immunochemical detection of the protein released. Induction of proinflammatory cytokines and phenotypic changes induced in epithelium by cell-cell contact with macrophages will be studied in tissue culture model with renal proximal tubular cells, renal epithelial cell line, and THP-1 macrophage line.

• MeSH
• chemokiny MeSH
• cytokiny MeSH
• epiteloidní buňky MeSH
• makrofágy MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• přirozená imunita MeSH
• rejekce štěpu MeSH
• testování histokompatibility MeSH
• transplantace ledvin MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• nefrologie
• transplantologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR