Impaired closure of diabetic ulcers is a serious complication decreasing quality of patient's life. The cause is overexpression of metalloproteinases (MMPs) during reepithelialization. Inhibitors of metalloproteinases are low effective so far and their use leads to serious side effects. The proposed translational research is focused on preclinical development of a system for treatment of impaired closure of ulcers. It’s based on effective and safe gene therapy – RNA interference of selected MMP. The carrier, nanodiamonds – the carbon nanomaterial with the lowest known toxicity – bears polyethyleneimine which stabilizes the therapeutic siRNA and facilitates its transfection. The whole system is incorporated in nanofibers which serve for localized release of the therapeutic complex and maintenance of constant siRNA level for the time necessary for the closure of ulcer. The completion of project will enable to follow with preclinical trials in vivo using primates and possible translation of the therapeutic procedure to clinical outputs.

Špatné hojení ran je závažnou komplikací léčby diabetes zhoršující kvalitu života pacienta. Příčinou této poruchy je nadměrná exprese matrixových metaloproteinas (MMP) při reepitelizaci rány. Inhibitory MMP jsou zatím málo účinné a jejich použití vede k vážným vedlejším efektům. Předkládaný projekt spadá do oblasti translační medicíny a je zaměřený na preklinický vývoj systému pro léčbu špatně se hojících ran. Je založen na vysoce účinné a bezpečné genové terapii - RNA interferenci vybraných MMP. Jednotlivé stavební kameny systému již byly uchazeči funkčně vyzkoušeny a zde jsou synergicky využity. Nosičem jsou nanodiamanty – uhlíkový nanomateriál s nejnižší známou toxicitou – s navázaným polyethyleniminem, umožňujícím stabilizaci terapeutické siRNA a její transfekci do buněk. Celý systém bude inkorporován do nanovláken potřebných pro lokalizované uvolnění terapeutického komplexu a udržení stabilní hladiny siRNA po dobu nutnou k zahojení rány. Vyřešení projektu umožní pokračování in vivo zkoušek na primátech a potenciální translaci terapeutické procedury do klinického použití.

• MeSH
• hojení ran účinky léků   MeSH
• komplikace diabetu farmakoterapie   MeSH
• malá interferující RNA terapeutické užití   MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• nanodiamanty terapeutické užití   MeSH
• nosiče léků MeSH
• terapie založená na RNAi MeSH
• translační biomedicínský výzkum MeSH
• uvolňování léčiv MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• farmacie a farmakologie
• genetika, lékařská genetika
• diabetologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Observational studies based on analyses of clinical registries and databases are necessary tools to assess the efficacy and safety of the treatment modalities in real-life clinical practice. In our project we aim to assess the safety and efficacy of biological therapies of the Rheumatoid Arthritis (RA) through analyses of the data of the National Registry for Biological Therapy ATTRA. The complementary project is the analysis of the data recorded in the DYNAMO-RA (DYNAmic MOnitoring of RA) database referring to the prospective cohort of patients with RA followed-up in the Institute of Rheumatology through the protocol-based intensive monitoring program. Part of the DYNAMO-RA project is evaluation of the use of the standardized ultrasound joint score (the German U-7 score) and certain biomarkers (Calprotectin, MMP-3, IL-6) for monitoring of treatment response, and stratification of patients for the single treatment strategies.

Nezbytným nástrojem hodnocení bezpečnosti a účinnosti léčby v reálné klinické praxi jsou observační studie založené na analýzách klinických registrů a databází. V našem projektu se zaměřujeme na vyhodnocení bezpečnosti a účinnosti biologické léčby revmatoidní artritidy (RA) analýzou dat z národního registru biologické léčby ATTRA. Komplementárním projektem je analýza prospektivní kohorty pacientů s RA sledovaných v Revmatologickém ústavu pomocí protokolem řízené monitorace v rámci výzkumné databáze DYNAMO-RA (DYNAmická MOnitorace-RA). Součástí projektu je zhodnocení přínosu ultrazvukového sledování pomocí standardizovaného nástroje (German US-7 score), validizace české verze multidimensionálního dotazníku zdravotního stavu (MDHAQ) a posouzení přínosu některých perspektivních biomarkerů (Calprotectin, MMP-3, IL-6) pro monitoraci léčebné odpovědi a stratifikaci pacientů pro jednotlivé léčebné strategie.

• MeSH
• biologická terapie MeSH
• biologické markery MeSH
• epidemiologické monitorování MeSH
• imunologické faktory MeSH
• interleukin-6 analýza   MeSH
• kvalita života MeSH
• leukocytární L1-antigenní komplex analýza   MeSH
• matrixová metaloproteinasa 3 analýza   MeSH
• progrese nemoci MeSH
• průzkumy a dotazníky MeSH
• registrace MeSH
• revmatoidní artritida MeSH
• ultrasonografie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• revmatologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The project completes aims of "Resort Programme of Research and Development II of Ministry of Health for years 2009-2011": at the area of finding of new diagnostic genetic markers of diseases or of identification of genetic predisposition markers for a high pulse pressure. This is the way to find new approaches in coronary and cerebrovascular diseases prevention. New ways how to influence the pulse pressure level will be useful because its level is a serious predictor of cardiovascular mortality. The high pulse pressure could become one of the new therapeutic target. The results of the project could accost a large professional public in cardiology, pathophysiology, molecular biology, clinical pharmacology and pharmacogenetics.

Projekt naplňuje cíle "Resortního programu výzkumu a vývoje II MZ na léta 2009-2011": v oblasti vypracování nových dignostických postupů vycházejících z genetické identifikace chorob, respektive z genetické identifikace predispozice k vysokému pulsnímu tlaku a tím hledání nových postupů v prevenci koronárních a cerebrovaskulárních chorob. Výsledky projektu mohou vést k hledání nových cest k ovlivnění hodnoty pulsního tlaku, který je významným prediktorem kardiovaskulární mortality. Vysoký pulsní tlak byse tak mohl stát jedním z terapeutických cílů. Předpokládaný okruh příjemců řešení je odborná veřejnost v oblasti kardiologie, fyziologie a molekulární biologie, klinické farmakologie a farmakogenetiky.

• MeSH
• celogenomová asociační studie MeSH
• inhibitory ACE MeSH
• inhibitory matrixových metaloproteinas MeSH
• kardiovaskulární nemoci MeSH
• krevní tlak MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• polymorfismus genetický MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• kardiologie
• angiologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The intraamniotic infection is a main reason of the preterm labor and could lead to the systemic fetal inflammatory response syndrome(FIRS). FIRS is also associated with perinatal morbidity and mortality, independent of its association with premature birth. We try to use proteomics to identify the amniotic fluid protein profile characteristic of intrauterine inflammation and FIRS and we will evaluate amniotic fluid level interleukin 8 and matrix metalloproteinase 8 in patients with preterm rupture of the membranes and we will describe the difference between fetuses with and without intraamniotic infection and FIRS. At least, we try to characterize the changes in fetal blood cortisol and dehydroepiandrosterone sulphate levels for early prediction of intraamniotic infection and FIRS.

Mezi nejčastější příčinu předčasného porodu patří intraamniální infekce, která v některých případech může vést až ke vzniku syndromu fetální zánětlivé odpovědi (FIRS), který je doprovázen zvýšením perinatální morbidity a mortality, a to nezávisle na gestačním stáří plodu. Primárním záměrem projektu je pomocí moderních nástrojů proteomiky charakterizovat rozdíly mezi proteinovým složením plodové vody u pacientek s předčasným odtokem plodové vody (PPROM) s a bez intraamniální infekce, či FIRS plodu. Taktoidentifikované proteiny by v budoucnu mohly sloužit jako biomarkery pro diagnostiku intraamniální infekce, či FIRS. Dalším záměrem je sledování rozdílů v koncentracích IL-8 (IL-8) a matrix metalloproteinasy 8 (MMP-8) v plodové vodě pacientek s PPROM s abez intraamniální infekce, či FIRS. Posledním dílčím úkolem je ověření je využití změn poměru hladin kortizolu a DHEA-S ve fetální krvi k rychlé poporodní diagnostice FIRS.

• MeSH
• amnion patologie   MeSH
• chorioamnionitida MeSH
• infekční komplikace v těhotenství prevence a kontrola   MeSH
• interleukin-8 analýza   diagnostické užití   MeSH
• matrixové metaloproteinasy analýza   diagnostické užití   MeSH
• plodová voda MeSH
• předčasný porod etiologie   mortalita   prevence a kontrola   MeSH
• proteom analýza   MeSH
• proteomika metody   MeSH
• syndrom systémové zánětlivé reakce MeSH

• Konspekt
• Gynekologie. Porodnictví
• NLK Obory
• gynekologie a porodnictví
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Aneurysm of the abdominal aorta (AAA) is still on the leading positions in the death causes of the men older than 60. AAA etiology has not still, in spite of an intensive research, been cleared up. These days we speak about a multifactorial etiology, presumably a higher degradation of matrix of an aortic wall thanks to a higher activity of matrixmetaloproteinases (MMPs) and an inflammatory reaction proceeding in an aortic wall probably play an important role. It is presumable that above mentioned processes are connected with one another. Recently a pharmacological influencing of AAA has been discussed as one of a possible form of the treatment. Above all the influencing of a proceeding inflammatory reaction. In our study we would like to try to prove an influence of satins (inhibitors 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-co-enzyme A reductase) to decelarate the growth of experimentally created AAA.

Aneuryzma abdominální aorty (AAA) je stále na předních příčkách v příčinách úmrtí mužů nad 60 let. Etiologie AAA není i přes intenzivní výzkum stále zcela vyjasněna. V dnešní době hovoříme o multifaktoriální etiologii, pravděpodobně hraje důležitou rolizvýšené odbourávání matrix aortální stěny díky vyšší aktivitě matrixmetaloproteináz (MMPs) a zánětlivá reakce probíhající ve stěně aorty. Je pravděpodobné, že výše uvedené procesy spolu navzájem souvisí (např. zánětlivá reakce zvyšuje expresi matrixmetaloproteináz, ateroskleróza potencuje vstup zánětlivých buněk do stěny cévy atp.). V poslední době se jako jedna z možností léčby diskutuje farmakologické ovlivnění AAA. Především ovlivnění probíhající zánětlivé reakce. V naší studii bychom se chtěli pokusit o prokázání vlivu statinů (inhibitorů 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-koenzym A reduktázy) na zbrzdění nárůstu experimentálně vytvořeného AAA.

• MeSH
• aneurysma břišní aorty etiologie   farmakoterapie   MeSH
• aterosklerotický plát MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• modely u zvířat MeSH
• prasata MeSH
• statiny aplikace a dávkování   farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• zánět farmakoterapie   MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• angiologie
• farmacie a farmakologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of this study is to analyse the activity of MMP-2, MMP-9 and their inhibitors in MS and to assess their relationship to the disease activity, its form, and any correlation with the clinical disability and therapeutic influences and further to toexamine the possible association between genetic polymorphism in candidate genes with multiple sclerosis.The study is to include 80 MS patients and 50 healthy controls. MMP-2, MMP-9, TIMP-2 TIMP-1 serum levels will be quantified by ELISA. Serum levels will beassessed at the beginning of the study, during exacerbations and at the end of the study. Genetic analysis will be performed by standard molecular biology practice.DNA and RNA will be isolated from blood.The PCR method,restrict and heteroduplex analysis are to be employed. MMPs are a promising biological marker that enables us to assess the activity of the disease and to monitor the effects of treatment.

Cílem práce je analýza aktivity MMP-2,MMP-9 a jejich inhibitorů a hodnotit vztah k aktivitě, formě choroby, tíži klinického postižení a ovlivnění léčbou.Určit asociační vztah genetických polymorfismů lokalizovaných v kandidátních genech s MS. Soubor budetvořen asi 80-ti pacienty s roztroušenou sklerózou dle Mc Donaldových kriterií jistou, kontrolní soubor bude složen z 50-ti zdravých dobrovolníků. Stanovení hladin MMP-2,MMP-9,TIMP-2 a TIMP-9 v periferní krvi bude provedeno metodou ELISA. Hladiny budouměřeny na počátku sledovaného období, dále vždy při atace a na konci sledovaného období. Genotypizace MMPs bude provedena metodami molekulární biologie.Bude odebráno 10 ml periferní krve s následnou izolací DNA a RNA Bude použita metoda PCR, restrikční analýza a heteroduplexová analýza.MMPs jsou slibným biologickým markerem, který by umožňoval laboratorní monitoraci onemocnění a hodnocení efektu léčby u pacientů s RS.

• MeSH
• ELISA MeSH
• genotyp MeSH
• imunogenetické jevy MeSH
• inhibitory matrixových metaloproteinas MeSH
• matrixová metaloproteinasa 2 analýza   krev   MeSH
• matrixová metaloproteinasa 9 analýza   krev   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• roztroušená skleróza diagnóza   terapie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• neurologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Peripheral blood monocytes will be obtained after the blood withdrawal and synovial fibroblasts after the mechanical and enzymatical modifications of the synovial tissue obtained during the joint surgery. Extracellular roles will be studied by stimulatory experiments with an additional inhibition of the RAGE and intracellular roles by means of gene silencing using small interfering (si) RNA. Nucleofector device Amaxa will be used for cell transfection. Gene expression of apoptotic molecules (bax, bcl-family, XIAP, smac), pro-inflammatory cytokines (TNF, IL-1, IL-6 and MCP-1) and matrix degrading enzymes (MMP-1, MMP-3 and MMP-13) will be analyzed using real-time PCR. The protein synthesis will be confirmed by means of ELISA and Western-blot. Activationof the programmed cell death pathway will be measured using fluorimetric Caspase-3 activity assay.

Periferní krevní monocyty budou získány stočením krve po krevním odběru a synoviální fibroblasty po mechanické a enzymatické úpravě synoviální tkáně získané během transplantace kloubu. Extracelulární působení bude studováno pomocí stimulačních experimentů s využitím inhibice receptoru RAGE a intracelulární úloha pomocí utlumení genové exprese za použití malého inhibitoru (si) RNA s využitím nukleofekčního přístroje Amaxa. Genová exprese apoptotických molekul (bax, bcl rodiny, XIAP, smac), prozánětlivýchcytokinů (TNF, IL-1, IL-6 a MCP-1) a matrix degradujících enzymů (MMP-1, MMP-3 a MMP-13) bude analyzována pomocí real-time PCR. Syntéza proteinů bude potvrzena pomocí metod ELISA a Western-blot. Aktivace dráhy vedoucí k programované smrti buněk bude analyzována pomocí fluorimetrické eseje měřící aktivitu kaspázy-3.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytokiny MeSH
• malá interferující RNA MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• proteiny S100 MeSH
• revmatoidní artritida patofyziologie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• revmatologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

1. Systematic observation of levels of invasiveness parameters and of NSCLC tumour metastasizing parameters in a tumorous tissue, and in the part of NSCLC patient ´s lung not affected by the tumour. 2. Comparison of commonly used NSCLC onco-markers sensitivity and of the parameters of a tumour biological activity. Search of the optimum combination of onco-markers and parameters of tumour biological activity in dependence on its histological type. 3. To work out an assessment prognostic index of a stageof the malignant process aggressivity, including system affection and expected response to operation and, possibly, following adjuvant therapy of NSCLC patients. 4. Optimizing of NSCLC patients selection for adjuvant post-operation treatment.

1. Systematické sledování hladin parametrů invazivity a metastazování nádoru (NSCLC), v tumorozní tkáni a tumorem nepostižené části plíce pacienta s NSCLC pomocí kvantitativní RT-PCR a současně je sledovat i imunoanalyticky v séru. 2. Srovnání senzitivity standardně používaných onkomarkerů NSCLC s parametry biologické aktivity nádoru. Určení optimální kombinace onkomarkerů a parametrů biologické aktivity nádoru v závislosti na histologickém typu. 3. Vypracovat prognostický index odhadu stupně agresivitymaligního procesu, včetně systémového postižení a předpokládané odpovědi na operační a event. následnou adjuvantní léčbu nemocncýh s NSCLC. 4. Optimalizovat výběr pacientů s NSCLC k adjuvantní pooperační léčbě.

• MeSH
• adjuvantní chemoterapie MeSH
• imunoanalýza MeSH
• management péče o pacienta MeSH
• matrixové metaloproteinasy analýza   MeSH
• nemalobuněčný karcinom plic terapie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• přežití bez známek nemoci MeSH
• prognóza MeSH
• staging nádorů MeSH
• tkáňové inhibitory metaloproteinas analýza   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

We plan to detect the markers of activation of the endotel in women with higher incidence of preeclampsia-eg.the mother with diabetes mellitus and chronic hypertension. The control group is composd of healthy pregnant women without any medication. We antipate statistically significant higher levels of endotehelial makers in the group risk pregnancies compared to healthy women

Plánujeme vyšetřování markerů aktivace endotelu u těhotných, u nichž byla prokázána vyšší četnost preeklampsie - tedy u diabetiček a hypertoniček, kontrolní soubor budou tvořit zdravé těhotné ženy. Předpokládáme potvrzení hypotézy o významném rozdílu v hodnotách sledovaných parametrů u těhotenství s pozdějším rozvojem preeklampsie ve srovnání s graviditami probíhajícími fyziologicky. Při zjištění statisticky významné korelace předpokládáme možnou predikci rozvoje preeklampsie u ohrožených těhotných. Tato riziková skupina by pak mohla výrazně profitovat z přísnější dispenzarizace a eventuální preventivní terapie profylaktickými dávkami LMWH se snížením mateřské a perinatální morbidity a mortality.

• MeSH
• biologické markery analýza   MeSH
• cévní endotel patofyziologie   MeSH
• heparin nízkomolekulární terapeutické užití   MeSH
• hypertenze indukovaná těhotenstvím MeSH
• mateřská mortalita MeSH
• matrixová metaloproteinasa 2 MeSH
• matrixová metaloproteinasa 9 MeSH
• morbidita MeSH
• preeklampsie MeSH
• těhotenství při diabetu MeSH
• těhotné ženy MeSH

• Konspekt
• Gynekologie. Porodnictví
• NLK Obory
• angiologie
• biologie
• gynekologie a porodnictví
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of the study is to assess the association of four mostly discussed candidate genes (connexin 37, plasminogen activator inhibitor -1, stromelysin-1 and lymfotoxin-alfa) with acute coronary syndroms and their sequales. Candidate genes under study will be evaluated in 2000-2500 patients with acute coronary syndromes admitted to Coronary Care unites and in the representative sample of the Czech population (n=2600)in cross-sectional study and in prospective study. This project should evaluate the effect of genetical determination on the incidence of acute coronary syndromes and their acute and late complications.

Cílem projektu je stanovit úlohu čtyř nejvíce diskutovaných kandidátních genů (connexin 37, inhibitor tkáňového aktivátoru 1, stromelysin-1 a lymfotoxin alfa) na výskyt a komplikace akutních koronárních syndromů v české populaci. Sledované kandidátní geny budou stanoveny u pacientů s akutním koronárním syndromem (n=2000-2500) a u reprezentativního vzorku české populace. Úloha těchto kandidátních genů bude hodnocena jednak průřezově, jednak prospektivně po 12měsíčním sledování. Navrhovaná studie by mělastanovit vliv genetické determinace na výskyt a komplikace koronárních příhod ve vysoce rizikové české populaci na rozsáhlém a neselektovaném vzorku pacientů s koronárními syndromy.

• MeSH
• akutní nemoc MeSH
• genetické asociační studie MeSH
• infarkt myokardu genetika   MeSH
• inhibitor aktivátoru plazminogenu 1 analýza   MeSH
• konexiny analýza   MeSH
• koronární nemoc genetika   komplikace   MeSH
• lymfotoxin-alfa analýza   MeSH
• matrixová metaloproteinasa 3 analýza   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• populace genetika   MeSH
• prospektivní studie MeSH
• průřezové studie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• biologie
• kardiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR