Nejvíce citovaný článek - PubMed ID 4947178
Uptake of amino acids by actidione-treated yeast cells. II. Effect of incubation conditions and metabolic inhibitors
A gap1 can1 mutant of Saccharomyces cerevisiae with a single lysine transport system remaining was used to study detailed kinetics of this transport. Its half-saturation constant was 78 mumol per litre, its maximum rate of transport was 0.29 mumol L-lysine per g dry matter per minute, both parameters being lower by more than an order of magnitude in comparison with the GAP system. The pH optimum lay at very acid values of about 3, the temperature dependence without any transition point showed an activation energy of 48 kJ/mol. The transport was inhibited by common metabolic inhibitors (3'-chlorophenylhydrazonomalononitrile, antimycin, 2-deoxy-D-glucose, sodium arsenate) as well as by a membrane-active one (uranyl nitrate). The specificity of the system was extremely high, none of the natural amino acids acting as competitor to L-lysine. The maximum accumulation ratio attained (at about 5 mg dry matter per mL) was 100: 1-120: 1, in agreement with the measured protonmotive force under the assumption of 1 H+ ion being transported with 1 lysine molecule. The ratio decreased with increasing external concentration of lysine to as little as 4: 1 at 1 mmol lysine per litre. It also decreased with increasing suspension density and it was at extremely low suspension densities (0.2 mg dry matter per mL) that ratios of as much as 500: 1 were reached. Application of group-specific inhibitors showed that the active site of the carrier contains an essential histidine residue.
Inhibitors of energy metabolism (3-chlorophenylhydrazonomalononitrile, antimycin A, iodoacetamide, dicyclohexylcarbodiimide) but not of transport (uranyl ions) stimulate at low concentrations the uptake of L-leucine, L-glutamic acid, L-arginine and, to a lesser degree, of 2-aminoisobutyric acid in Saccharomyces cerevisiae. The effect is apparent only after augmenting the energy reserves of cells by preincubation with D-glucose or, more strikingly, with ethanol. It is absent in a mutant (op1) lacking the translocation system for ADP--ATP in mitochondria. The presence of two different energy reserves for amino acid transport is indicated (one in energy-poor, the other in energy-rich cells). The stimulating effect appears to be caused by a retarded degradation of the transport proteins as occurs at a lowered level of mitochondria-produced ATP.
- MeSH
- adenosintrifosfát metabolismus MeSH
- aktivní transport účinky léků MeSH
- aminokyseliny metabolismus MeSH
- antimycin A farmakologie MeSH
- dicyklohexylkarbodiimid farmakologie MeSH
- jodacetamid farmakologie MeSH
- karbonylkyanid-m-chlorfenylhydrazon farmakologie MeSH
- kinetika MeSH
- leucin metabolismus MeSH
- Saccharomyces cerevisiae metabolismus MeSH
- uran farmakologie MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- adenosintrifosfát MeSH
- aminokyseliny MeSH
- antimycin A MeSH
- dicyklohexylkarbodiimid MeSH
- jodacetamid MeSH
- karbonylkyanid-m-chlorfenylhydrazon MeSH
- leucin MeSH
- uran MeSH
- MeSH
- aminokyseliny metabolismus MeSH
- chromatografie DEAE-celulózová MeSH
- gelová chromatografie MeSH
- koncentrace vodíkových iontů MeSH
- kultivační média MeSH
- pufry MeSH
- Saccharomyces cerevisiae metabolismus MeSH
- vazba proteinů * MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- aminokyseliny MeSH
- kultivační média MeSH
- pufry MeSH
- MeSH
- aerobióza MeSH
- aktivní transport MeSH
- aminokyseliny metabolismus MeSH
- anaerobióza MeSH
- buněčná membrána metabolismus MeSH
- dinitrofenoly farmakologie MeSH
- dusičnany farmakologie MeSH
- isoleucin metabolismus MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- koncentrace vodíkových iontů MeSH
- kultivační média MeSH
- kvasinky metabolismus MeSH
- kyselina asparagová metabolismus MeSH
- kyseliny aminoisomáselné metabolismus MeSH
- lysin metabolismus MeSH
- mitosporické houby MeSH
- teplota MeSH
- tryptofan metabolismus MeSH
- uran farmakologie MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- aminokyseliny MeSH
- dinitrofenoly MeSH
- dusičnany MeSH
- isoleucin MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- kultivační média MeSH
- kyselina asparagová MeSH
- kyseliny aminoisomáselné MeSH
- lysin MeSH
- tryptofan MeSH
- uran MeSH
- MeSH
- aktivní transport účinky léků MeSH
- aminokyseliny metabolismus MeSH
- anaerobióza MeSH
- cykloheximid farmakologie MeSH
- cystein metabolismus MeSH
- glycin metabolismus MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- kyselina asparagová metabolismus MeSH
- leucin metabolismus MeSH
- lysin metabolismus MeSH
- methionin metabolismus MeSH
- monosacharidy metabolismus MeSH
- Saccharomyces cerevisiae účinky léků metabolismus MeSH
- stereoizomerie MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- aminokyseliny MeSH
- cykloheximid MeSH
- cystein MeSH
- glycin MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- kyselina asparagová MeSH
- leucin MeSH
- lysin MeSH
- methionin MeSH
- monosacharidy MeSH
- MeSH
- aerobióza MeSH
- dusičnany farmakologie MeSH
- hexosy metabolismus MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- kultivační média MeSH
- pentosy metabolismus MeSH
- permeabilita buněčné membrány účinky léků MeSH
- Saccharomyces účinky léků růst a vývoj metabolismus MeSH
- thorium farmakologie MeSH
- transport elektronů účinky léků MeSH
- uran farmakologie MeSH
- xylosa metabolismus MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- dusičnany MeSH
- hexosy MeSH
- izotopy uhlíku MeSH
- kultivační média MeSH
- pentosy MeSH
- thorium MeSH
- uran MeSH
- xylosa MeSH
- MeSH
- aktivní transport MeSH
- aminokyseliny metabolismus MeSH
- biologický transport MeSH
- chloridy metabolismus MeSH
- cykloheximid farmakologie MeSH
- draslík farmakologie MeSH
- dusičnany metabolismus MeSH
- fosfáty metabolismus MeSH
- glycin metabolismus MeSH
- kyselina asparagová metabolismus MeSH
- lysin metabolismus MeSH
- Saccharomyces cerevisiae účinky léků MeSH
- Saccharomyces účinky léků metabolismus MeSH
- sírany metabolismus MeSH
- sodík farmakologie MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- aminokyseliny MeSH
- chloridy MeSH
- cykloheximid MeSH
- draslík MeSH
- dusičnany MeSH
- fosfáty MeSH
- glycin MeSH
- kyselina asparagová MeSH
- lysin MeSH
- sírany MeSH
- sodík MeSH