Východisko. Imunofenotypizace maligních lymfomů je dnes již nezbytnou podmínkou pro jejich správnou klasifikaci a následně pro stanovení terapie a prognózy pacienta (SZO). Přestože možnosti klasické imunohistologie v řezech (parafinových i zmražených) se v posledních letech významně rozšířily, je výhodné kombinovat je s vyšetřením průtokovou cytometrií. Hlavní předností průtokové cytometrie je možnost současné aplikace dvou a více protilátek značených různými fluorochromy v jednom vzorku. Limitací je nutnost vyšetřovat pouze nativní materiál. Metody a výsledky. Metodu průtokové cytometrie jsme spolu s histologickým a imunohistochemickým vyšetřením použili pro diagnostiku primárních non-Hodgkinských lymfomů z B buněk (B-NHL) a ke stagingu respektive k restagingu v kostní dřeni. Na sestavě 90 pacientů s prokázaným nebo suspektním B-NHL jsme zjistili shodu výsledků v 89 % hodnocených primárních nádorů a v 85 % hodnocených kostních dření. Celková úspěšnost průtokové cytometrie pro určení infiltrace vzorku B lymfomem byla 89 %. Závěry. Imunofenotypizace pomocí průtokové cytometrie významně přispívá ke zpřesnění klasifikace maligních lymfomů z B buněk. V některých případech není dokonce nutné doplnit imunohistochemické vyšetření. Obzvláště výhodné je využití metody při stanovení klonality pomocí povrchových markerů, kdy je průtoková cytometrie významně specifičtější i senzitivnější než imunohistochemické vyšetření v histologickém řezu. Využití imunofenotypizace pomocí průtokové cytometrie jako pomocné metody v korelaci s morfologickými nálezy zrychluje a zpřesňuje diagnostiku maligních lymfomů z B buněk.

Background. Immunophenotyping of malignant lymphomas becomes necessary for the correct classification, for the design of therapy and for prognosis projection (WHO). Although the spectrum of classic immunohistochemical (IHC) examinations in paraffin embedded or frozen sections has recently considerably extended, IHC should preferably be combined with flow cytometry. The main advantage of flow cytometry is a synchronous application of two or more antibodies marked with various fluorochromes in one sample. The method is limited by utilizing native material only. Methods and Results. The flow cytometry combinedwith histological and IHC investigations were used in diagnosis of primary non-Hodgkin’s lymphomas of B-cell origin (B-NHL) and for bone marrow staging or restaging. We studied 90 patients with confirmed or suspected B-NHL and we found a good correlation in 89 % of samples of primary lymphomas and in 85 % of bone marrow samples when IHC and flow cytometry results were compared. The overall efficacy of the flow cytometry determination in lymphoma infiltration of the samples was 89 %. Conclusions. Immunophenotyping utilizing flow cytometry contributes to diagnosis and classification of B-cell lymphomas in the significant proportion of investigated patients. In some cases it is even unnecessary to employ IHC examination of tissue sections. The method is especially suitable for determination of monoclonal populations of B-cells by detection of cell surface markers because it is more specific and sensitive than IHC. The immunophenotyping by flow cytometry as an auxiliary method and in correlation with morphological findings it can make the diagnosis of B-cell lymphomas faster and more specific.

Ústav patologie a molekulární medicíny 2 LF UK a FNM Praha

Correlation of flow cytometry and morphological findings in diagnosis of malignant B-cell lymphomas

Korelace výsledků průtokové cytometrie a morfologických nálezů v diagnostice maligních lymfomů z B buněk = Correlation of flow cytometry and morphological findings in diagnosis of malignant B-cell lymphomas /

Lit: 18

Souhrn: eng