The human Na+ /H+ antiporter NHA2 (SLC9B2) transports Na+ or Li+ across the plasma membrane in exchange for protons, and is implicated in various pathologies. It is a 537 amino acids protein with an 82 residues long hydrophilic cytoplasmic N-terminus followed by a transmembrane part comprising 14 transmembrane helices. We optimized the functional expression of HsNHA2 in the plasma membrane of a salt-sensitive Saccharomyces cerevisiae strain and characterized in vivo a set of mutated or truncated versions of HsNHA2 in terms of their substrate specificity, transport activity, localization, and protein stability. We identified a highly conserved proline 246, located in the core of the protein, as being crucial for ion selectivity. The replacement of P246 with serine or threonine resulted in antiporters with altered substrate specificity that were not only highly active at acidic pH 4.0 (like the native antiporter), but also at neutral pH. P246T/S versions also exhibited increased resistance to the HsNHA2-specific inhibitor phloretin. We experimentally proved that a putative salt bridge between E215 and R432 is important for antiporter function, but also structural integrity. Truncations of the first 50-70 residues of the N-terminus doubled the transport activity of HsNHA2, while changes in the charge at positions E47, E56, K57, or K58 decreased the antiporter's transport activity. Thus, the hydrophilic N-terminal part of the protein appears to allosterically auto-inhibit cation transport of HsNHA2. Our data also show this in vivo approach to be useful for a rapid screening of SNP's effect on HsNHA2 activity.
- MeSH
- lidé MeSH
- Na(+)-H(+) antiport * chemie genetika MeSH
- protony * MeSH
- Saccharomyces cerevisiae genetika metabolismus MeSH
- sekvence aminokyselin MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
1 list ; 46 x 36 cm
Las Meninas', 1656 - Dvorní dámy "Rodina" - Markéta Habsburská (Marguerite-Thérèse d'Autriche) s dvorními dámami, vpravo trpasličí dívka, zachycené při portrétování autorem obrazu.
- MeSH
- chování MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- rodina MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Sociologie
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- sociologie
- NLK Publikační typ
- grafické listy
- O autorovi
- Habsburkové (rod) Autorita
1 list ; 46 x 36 cm
Dvorní dámy "Rodina" 1656 - Markéta Habsburská (Marguerite-Thérèse d'Autriche) s dvorními dámami, vpravo trpasličí dívka.
- MeSH
- chování MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- rodina MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- knižní ilustrace MeSH
- Konspekt
- Sociologie
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- sociologie
- O autorovi
- Habsburkové (rod) Autorita
1 list ; 46 x 36 cm
El bufón "Calabacillas", llamado erróneamente "Bobo de Coria" 1637-1639 - šašek "Calabacillas", řečený "Bobo de Coria"
- MeSH
- achondroplazie MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Lékařské vědy. Lékařství
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- lékařství
- NLK Publikační typ
- grafické listy
1 list ; 46 x 36 cm
Sebastian de Morra, 1644 - portrét
- MeSH
- achondroplazie MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Lékařské vědy. Lékařství
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- lékařství
- NLK Publikační typ
- grafické listy
1 list ; 46 x 36 cm
El Nino de Vallecas, 1635-1645 - sedící trpaslík.
- MeSH
- achondroplazie MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Lékařské vědy. Lékařství
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- lékařství
- NLK Publikační typ
- grafické listy
1 list ; 46 x 36 cm
Dvorní trpaslík se psem.
- MeSH
- achondroplazie MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Lékařské vědy. Lékařství
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- lékařství
- NLK Publikační typ
- grafické listy
1 list ; 46 x 36 cm
Portrét trpaslíka krále Filipa IV.
- MeSH
- achondroplazie MeSH
- lékařství v umění MeSH
- postižení MeSH
- Publikační typ
- fotografie MeSH
- Konspekt
- Lékařské vědy. Lékařství
- NLK Obory
- zdravotně postižení
- lékařství
- NLK Publikační typ
- grafické listy