Glioblastoma multiforme (GBM) is the common malignant brain tumour in adults and despite aggressive treatment it remains virtually incurable with a poor prognosis and median survival of 12 months following resection, radiotherapy and chemotherapy. Therapeutic approaches to GBM immunotherapy have had limited success, principally due to the protected brain barrier and the immunosuppressive tumour microenvironment. New research indicates the possibility of using immune effector cells that effectively destroy malignant GBM cells. Our previous study showed innate gamma-delta (gd) T cells were highly reactive to GBM tumour. The aim of the proposed project is cellular and molecular analyses of gd T cells in patients before and during treatment, including the detailed characterization of their interactions with GBM cells and identification of significant markers within the tumour microenvironment responsible for therapy resistance and relapse of the disease. The current research interests aiming to eliminate residual tumour cells by gd T cells provide a platform for GBM immunotherapy.

Multiformní glioblastom (GBM) je běžný maligní nádor mozku u dospělých a navzdory agresivní léčbě zůstává prakticky nevyléčitelný se špatnou prognózou a mediánem přežití 12 měsíců po resekci, radioterapii a chemoterapii. Terapeutické přístupy k imunoterapii GBM mají omezenou úspěšnost, zejména v důsledku chráněné bariéry mozku a imunosupresivního mikroprostředí nádoru. Nový výzkum naznačuje možnost použití imunitních efektorových buněk, které účinně zničí maligní GBM buňky. Naše předchozí studie ukázala, že vrozené gamma-delta (gd) T buňky byly vysoce reaktivní na nádor GBM. Cílem navrhovaného projektu je buněčná a molekulární analýza gd T buněk u pacientů před a během léčby včetně podrobné charakterizace jejich interakcí s GBM buňkami a identifikace významných markerů v mikroprostředí nádorů, které jsou odpovědné za rezistenci na terapii a relapsu onemocnění. Současné výzkumné záměry zaměřené na odstranění reziduálních nádorových buněk pomocí gd T buněk poskytují platformu pro imunoterapii GBM.

• Klíčová slova
• tumour microenvironment, nádorové mikroprostředí, glioblastoma, glioblastom, Gammadelta T buňky, Gammadelta T cells,

• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Next generation sequencing (NGS) and other new methods brought a large amount of data on tumour biology and facilitated the development of new methods for diagnostics and minimal residual disease (MRD) detection. The transfer of those methods into routine management is complicated by their numbers, costs and redundancy. In international cooperation we want to develop a tool for simultaneous detection of clonality, MRD and profile of immunoglobulin and T-cell receptor gene rearrangements in infiltrating physiological lymphocytes. The methodology will unite and simplify the current methods, while providing new data on immune response. We will validate the method on retrospective cohort of patients with anaplastic large cell lymphoma and prospectively on samples from children and adolescents with lymphoma. The utility in non-lymphoid malignancies will be tested in children with low-and high-grade gliomas. Next to the standardized methodology, the project will bring new information on the composition of infiltrating immune cells (mainly T lymphocytes) and a potential for immunotherapy.

Nové metody jako sekvenování nové generace (NGS) přinesly obrovské množství informací o nádorové biologii a umožnily vývoj nových metod pro diagnostiku a sledování zbytkové choroby (MRN). Transfer nových metod do praxe je komplikován jejich množstvím, finanční náročností i redundancí. V mezinárodní spolupráci chceme vyvinout nástroj na simultánní detekci klonality, MRN a profilu přestaveb genů pro imunoglobuliny a T-buněčné receptory infiltrujících fyziologických lymfocytů. Postup bude sjednocovat a zjednodušovat stávající metodiky a zároveň poskytne nová data o imunitní odpovědi na nádor. Metodu chceme validovat na retrospektivní kohortě pacientů s anaplastickým velkobuněčným lymfomem a prospektivně na vzorcích dětských a adolescentních pacientů s lymfomy. Využití u jiných než lymfoidních malignit chceme testovat u dětí s mozkovými tumory (low- a high-grade gliomy). Výstupem projektu bude kromě standardizovaného metodického postupu prohloubení znalostí o složení a funkci infiltrujících imunitních buněk (především T lymfocytů) a zmapování prostoru pro cílení imunoterapie.

• Klíčová slova
• sekvenování nové generace, průtoková cytometrie, minimální reziduální nemoc, minimal residual disease, flow cytometry, lymfom, lymphoma, Next-generation sequencing, immune monitoring, cell-free DNA, tumor infiltrující lymfocyty, Immune checkpoints, imunomonitoring, imunitní kontrolní body, přestavby genů pro imunoglobuliny a T-buněčné receptory, gamadelta T lymfocyty, immunoglobulin and T-cell rearrangement, gammadelta T lymphocytes, volná nádorová DNA, tumour infiltrating lymphocytes,

• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR