The aim of the project is to detect circulating tumor cells (CTC) in peripheral blood of patients with metastatic prostate cancer before and during the cytotoxic therapy. Detection will be performed by the method of immunomagnetic separation and RNA isolation from this fraction. Then we will perform the cultivation of the detected cells including the cultivation in milieu of cytotoxic agents. In the next stage the genetic profile of the detected cells will be assessed (a panel of 24 genes) and a similar profile will be evaluated also in histological specimen of a primary tumor. Analysis results will be correlated to the clinical course of disease and the prognostic factors of treatment effect on CTC count decline and patients‘ survival will be determined.

Cílem projektu je detekovat cirkulující nádorové buňky (CTC) v periferní krvi u pacientů s metastatickým karcinomem prostaty před cytotoxickou léčbou a v jejím průběhu. Detekce bude provedena metodou imunomagnetické separace buněk a izolací RNA z této frakce. Dále proběhne kultivace části detekovaných buněk včetně kultivace v prostředí cytotoxických látek. V další fázi bude hodnocen genetický profil zjištěných buněk (stanovení panelu 24 genů) a obdobný profil také u histologického preparátu primárního tumoru. Výsledky analýz budou vztaženy na klinický průběh onemocnění a budou stanoveny prognostické faktory účinku léčby na pokles CTC a přežití pacientů.

• MeSH
• analýza přežití MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• exprese genu MeSH
• imunomagnetická separace MeSH
• individualizovaná medicína MeSH
• nádorové buněčné linie cytologie   MeSH
• nádorové cirkulující buňky MeSH
• nádory prostaty rezistentní na kastraci diagnóza   MeSH
• prognóza MeSH
• prostatický specifický antigen analýza   MeSH
• RNA analýza   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• andrologie
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Tissue concentration of steroid metabolites will be measured in experimental models of IBD activity of 11 HSD will be estimated in tisue homogenates.Expression mRNA 11 HSD1 and mRNA 11 HSD2 will be estimated by RT-PCR Separation of immune cells by densitcentrifugation and mmunomagnetic separator.Monitoring of PEG2 concentration a expression of COX-2 and PLA2 in cell culture of enterocytes will be followed-up. Receptors of PPAR gama could modulate expression of 11HSD

Na zvířecím modelu zánětlivých střevních chorob bude stanovena tkáňová koncentrace metabolitů steroidů a aktivity 11 HSD budou stanoveny v homogenátech. Exprese mRNA 11HSD 1 a mRNA 11HSD2 bude stanovena RT-PCR. Separace imunitních buněk densitní centrifugací a imunomagnetickou selekcí.Monitorace koncentrace PEG2 a exprese COX-2 a PLA2 v buněčných kulturách enterocytů.Inhibice periferního metabolismu glukokortikoidů u experimentálních modelů.

• MeSH
• cytokiny MeSH
• experimenty na zvířatech MeSH
• glukokortikoidy metabolismus   MeSH
• hydroxysteroidní dehydrogenasy MeSH
• idiopatické střevní záněty MeSH
• imunomagnetická separace MeSH
• myši MeSH
• prostaglandiny MeSH
• receptory aktivované proliferátory peroxizomů MeSH
• Check Tag
• myši MeSH

• Konspekt
• Fyziologie člověka a srovnávací fyziologie
• NLK Obory
• gastroenterologie
• endokrinologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Isolation of Id protein from plasmapheresis product of patients with MM is possible in sufficient amount for repeated vaccination Imunomagnetic separetion is used to prepared myeloma cell suspension from bone marrow aspirate with more than 75% of myelomacells for preparation of TAA from myeloma cells lysate

Id protein lze připravit z plasmy nemocných s mnohočetným myelomem v dostatečném množství pro opakující se podání vakciny. K příparvě TAA z lýzovaných myelomových buněk lze využít imunomegnetickou separací připraveného koncentrovaného vzorku buněk s vícenež 75% zastoupením myelomových buněk

• MeSH
• imunoglobuliny MeSH
• imunomagnetická separace MeSH
• mnohočetný myelom MeSH
• protinádorové vakcíny MeSH
• reakce antigenu s protilátkou MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

To optimize immunomagnetic selection of hematopoietic stem cells, for maximum achievable purity, yield. and recovery parameters. To find the best combination of cytokines which would allow maximum expansion of granulocytic progenitor cells in the ex vivoculture. To verify the possibility of expansion of megakaryocytic progenitor cells in ex vivo culture in the presence of specific cytokines. To evaluate results by morphology, immunophenotyping, and cultivation of CFU-GM and CFU-Meg colonies.

Optimalizovat omunogemagnetický systém selekce hematopoetických buněk s cílem maximální výtěžnosti a čistoty buněčné frakce - srovnání metody positivní selekce CD34+ buněk a negativní selekce Lin-buněk. Identifikovat nejvhodnější složení cytokinové směsi, jež umožní maximální expanzi granulocytárních progenitorových buněk v in vitro kultuře v serum-free a stroma-free mediu. Ivěřit možnost expanze megakaryocytárních progenitorů v in vitro kultuře v přítomnosti specifických cytokinů-progenitory budou analyzovány technikou kultivace CFU-Meg. Zhodnotit a srovnat výsledky ex vivo expanzí pomocí imunofenotypizace, morfologické analýzy a přímou kultivací progemitorů CFU-GM a CFU-Meg.

• MeSH
• cytokiny MeSH
• hematopoetické kmenové buňky MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• imunomagnetická separace MeSH
• kultivované buňky MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Project will be intented on Samonella, Campylobacter and L.monocytogenes detection from food chain. Determination of selected pathogens will be performed by immunological methods - ELISA and IMS. For the diagnostic of Salmonella, a method will be prepared and verified based on the detection of a specific gene with the help of PCR.

Projekt bude zaměřen na detekci salmonel,kampylobakterů a L.monocytogenes z potravinového řetězce. Stanovení vybraných patogenů bude prováděno imunologickými metodami - ELISA a IMS. Pro diagnostiku salmonel bude vypracována a ověřena metoda založená na detekci specifického genu pomocí PCR.

• MeSH
• imunoanalýza využití   metody   MeSH
• imunochemie využití   metody   MeSH
• imunomagnetická separace využití   metody   MeSH
• kontaminace potravin analýza   MeSH
• latex fixační testy využití   metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce využití   metody   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• nutriční terapie, dietoterapie a výživa
• chemie, klinická chemie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR