Chromý a kol. v r. 2009 zjistili, že stanovení celkové sérové bílkoviny biuretovým činidlem za použití albuminových kalibrátorů, vypracované v r. 1981 Doumasovou pracovní skupinou jako kandidáta na referenční metodu, poskytuje výsledky s neakceptovatelnou systematickou pozitivní chybou, způsobenou zejména endogenním sérovým bilirubinem a lipidy. Zjistili též, že k nápravě stačí užít bíkovinné standardy na bázi séra nebo plasmy, které jsou komutabilní se vzorky pacientů, a jsou certifikovány Kjeldahlovou metodou. V našich dvou předchozích publikacích, (Chromý a kol., 2015 a Vinklárková a kol., 2015), jsme ověřili Kjeldahlovy postupy užívané v laboratorní medicíně. Zvolili jsme přímou analýzu ze sraženiny bílkovin promyté kyselinou trichloroctovou a prověřili jsme její analytické provozní parametry. V této práci popisujeme zjednodušenou analýzu s modifikovanou Kjeldahlovou digesční baňkou, kterou lze přímo připojit k tomu přizpůsobené Parnes-Wagnerově destilační aparatuře a uvádíme její validační parametry. Zjednodušenou Kjeldahlovu metodu navrhujeme jako standardní operační postup pro stanovení celkové bílkoviny v referenčních materiálech užívaných v klinické chemii.
Chromý et al. found in 2009, that albumin-calibrated analysis of serum total protein with biuret reagent according to a candidate reference method developed by Doumas working group in 1981, provide results with unacceptable positive bias, caused namely by endogeneous serum bilirubin and lipids. They also found, that a simplest way to rectify this defect, is the use of serum and/or plasma-based protein standards, commutable with patients samples, which are certified by the Kjeldahl method. In our foregoing two articles, (Chromý et al., 2015, and Vinklárková et al., 2015), we reviewed Kjeldahl methods adopted by laboratory medicine, selected a direct analysis on washed protein precipitates with trichloroacetic acid and verified its preliminary analytical performance parameters. In this article, we describe a simplified Kjeldahl analysis with modified digestion flask, now directly connectable to accordingly adapted Parnas and Wagner distillation unit, and present its re-validation. Simplified Kjeldahl method is suggested as a standard operating procedure for total protein in reference materials used in clinical chemistry.
To select a Kjeldahl procedure suitable for the determination of total protein in reference materials used in laboratory medicine, we reviewed in our previous article Kjeldahl methods adopted by clinical chemistry and found an indirect two-step analysis by total Kjeldahl nitrogen corrected for its nonprotein nitrogen and a direct analysis made on isolated protein precipitates. In this article, we compare both procedures on various reference materials. An indirect Kjeldahl method gave falsely lower results than a direct analysis. Preliminary performance parameters qualify the direct Kjeldahl analysis as a suitable primary reference procedure for the certification of total protein in reference laboratories.
- MeSH
- klinická chemie přístrojové vybavení metody MeSH
- lidé MeSH
- proteiny chemie MeSH
- referenční hodnoty MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
