Real-time quaking-induced conversion assay (RT-QuIC) exploits templating activity of pathogenic prion protein for ultrasensitive detection of prions. We have utilized second generation RT-QuIC assay to analyze matching post-mortem cerebrospinal fluid and skin samples of 38 prion disease patients and of 30 deceased neurological controls. The analysis of cerebrospinal fluid samples led to 100% sensitivity and 100% specificity, but some samples had to be diluted before the analysis to alleviate the effect of present RT-QuIC inhibitors. The analysis of the corresponding skin samples provided 89.5% sensitivity and 100% specificity. The median seeding dose present in the skin was one order of magnitude higher than in the cerebrospinal fluid, despite the overall fluorescent signal of the skin samples was comparatively lower. Our data support the use of post-mortem cerebrospinal fluid for confirmation of prion disease diagnosis and encourage further studies of the potential of skin biopsy samples for intra-vitam prion diseases ́ diagnostics.
- MeSH
- biotest MeSH
- Creutzfeldtova-Jakobova nemoc * diagnóza mozkomíšní mok MeSH
- kůže metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- prionová bílkovina MeSH
- prionové nemoci * diagnóza MeSH
- priony * metabolismus MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Diagnostika prionových onemocnění je obtížná vzhledem k jejich heterogenitě a překryvu klinických příznaků s jinými neurodegenerativními chorobami. Doposud dostupné diagnostické metody neměly dostatečnou citlivost a specificitu. V roce 2018 byla do diagnostických kritérií (WHO) zařazena metoda RT‐QuIC (Real Time Quacking Induced Conformation assay), která využívá pro detekci prionů jejich schopnost agregovat nativní rekombinantní prionový protein. Agregace je sledována v reálném čase pomocí fluorescenční sondy. Metoda je extrémně citlivá a specifická. Naše výsledky potvrzují, že umožňuje detekci prionů v mozkomíšním moku pacientů za jejich života, krátce po objevení příznaků onemocnění.
Diagnostics of prion diseases is difficult due to their heterogeneity and overlap of clinical symptoms with other neurodegenerative disorders. Till now utilized diagnostics methods did not have sufficient sensitivity and specificity. In 2018 WHO diagnostic criteria were updated by the inclusion of RT-QuIC assay (Real Time Quacking Induced Conformation), which utilizes the ability of prions to aggregate native recombinant prion protein for their detection. The aggregation is monitored in real time using fluorescent probe. The assay is extremely sensitive and specific. Our results confirms that it allows detection of prions in cerebrospinal fluid of living patients shortly after the appearance of symptoms.
- MeSH
- Creutzfeldtova-Jakobova nemoc diagnóza MeSH
- diferenciální diagnóza MeSH
- klinické laboratorní techniky metody MeSH
- lidé MeSH
- prionové nemoci * diagnóza MeSH
- priony analýza mozkomíšní mok MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
