The timely and exact diagnosis of prosthetic joint infection (PJI) is crucial for surgical decision-making. Intraoperatively, delivery of the result within an hour is required. Alpha-defensin lateral immunoassay of joint fluid (JF) is precise for the intraoperative exclusion of PJI; however, for patients with a limited amount of JF and/or in cases where the JF is bloody, this test is unhelpful. Important information is hidden in periprosthetic tissues that may much better reflect the current status of implant pathology. We therefore investigated the utility of the gene expression patterns of 12 candidate genes (TLR1, -2, -4, -6, and 10, DEFA1, LTF, IL1B, BPI, CRP, IFNG, and DEFB4A) previously associated with infection for detection of PJI in periprosthetic tissues of patients with total joint arthroplasty (TJA) (n = 76) reoperated for PJI (n = 38) or aseptic failure (n = 38), using the ultrafast quantitative reverse transcription-PCR (RT-PCR) Xxpress system (BJS Biotechnologies Ltd.). Advanced data-mining algorithms were applied for data analysis. For PJI, we detected elevated mRNA expression levels of DEFA1 (P < 0.0001), IL1B (P < 0.0001), LTF (P < 0.0001), TLR1 (P = 0.02), and BPI (P = 0.01) in comparison to those in tissues from aseptic cases. A feature selection algorithm revealed that the DEFA1-IL1B-LTF pattern was the most appropriate for detection/exclusion of PJI, achieving 94.5% sensitivity and 95.7% specificity, with likelihood ratios (LRs) for positive and negative results of 16.3 and 0.06, respectively. Taken together, the results show that DEFA1-IL1B-LTF gene expression detection by use of ultrafast qRT-PCR linked to an electronic calculator allows detection of patients with a high probability of PJI within 45 min after sampling. Further testing on a larger cohort of patients is needed.

• MeSH
• alfa-defensiny analýza   genetika   MeSH
• biologické markery analýza   MeSH
• dospělí MeSH
• infekce spojené s protézou diagnóza   mikrobiologie   MeSH
• interleukin-1beta analýza   genetika   MeSH
• karboxylesterhydrolasy analýza   MeSH
• laktoferrin analýza   genetika   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• náhrada kyčelního kloubu škodlivé účinky   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• stanovení celkové genové exprese MeSH
• synoviální tekutina chemie   MeSH
• totální endoprotéza kolene škodlivé účinky   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• alfa-defensiny diagnostické užití   genetika   imunologie   MeSH
• gramnegativní bakterie účinky léků   MeSH
• hygiena MeSH
• infekce spojené s protézou * diagnóza   prevence a kontrola   terapie   MeSH
• infekce spojené se zdravotní péčí farmakoterapie   patologie   prevence a kontrola   přenos   MeSH
• kontrola infekce metody   MeSH
• kostní cementy terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• pooperační komplikace prevence a kontrola   MeSH
• pooperační péče metody   MeSH
• protézy kloubů mikrobiologie   MeSH
• rizikové faktory MeSH
• směrnice pro lékařskou praxi jako téma MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

Type 1 diabetes (T1D) is an autoimmune disease caused by T-cell mediated destruction of pancreatic beta cells. Recently, small cationic α-defensin molecules have been implicated in the pathogenesis of certain inflammatory and autoimmune diseases. The purpose of this study was to assess the α-defensin expression in patients with T1D and elucidate the cellular source of their production. Our results show that 30% of patients exhibit increased levels of α-defensin mRNAs in their capillary blood. Quantitative RT-PCR performed on FACS-sorted granulocytes identified CD15(dull)/CD14(weak) population as the cellular source of α-defensins. Surprisingly, this granulocyte subpopulation displayed augmentation of α-defensin expression in all T1D patients tested. The determination of cell surface markers, expression of cell-specific genes and confocal microscopy identified CD15(dull)/CD14(weak) cells as eosinophils. The presence of transcriptionally active eosinophils in diabetic patients suggests that eosinophils could be a part of an intricate innate immune cellular network involved in the development of diabetes.

• MeSH
• alfa-defensiny krev   genetika   imunologie   MeSH
• antigen Lewis X imunologie   MeSH
• antigeny CD14 imunologie   MeSH
• autoimunita MeSH
• beta-buňky imunologie   metabolismus   patologie   MeSH
• diabetes mellitus 1. typu krev   genetika   imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• eozinofily imunologie   metabolismus   patologie   MeSH
• exprese genu MeSH
• imunologická tolerance MeSH
• lidé MeSH
• messenger RNA biosyntéza   MeSH
• mladiství MeSH
• peroxidasa krev   genetika   imunologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• předškolní dítě MeSH
• přirozená imunita MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• předškolní dítě MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Defensiny jsou antimikrobiální a imunomodulační peptidy, které jsou důležitou součástí přirozené imunity. Autoři stručně charakterizují přirozenou imunitu, chemickou stavbu a funkci defensinů. Zabývají se především lidskými defensiny na respiračních sliznicích a jejich účinkem na bakterie, a to hlavně na grampozitivní bakterii Staphylococcus aureus. Defensiny mají přímý destrukční účinek na bakteriální stěnu, ale mají i imunomodulační účinek. Lidské defensiny dělíme podle struktury na alfa a beta 1, beta 2, beta 3 a beta 4. Alfa jsou v granulocytech, ve sliznici urogenitálního a intestinálního traktu. Beta defensiny jsou ve všech epiteliálních tkáních. V epitelu dýchacích cest jsou beta defensiny 1 produkovány konstitučně a beta defensiny 2 a 3 jsou indukovány jako odpověď na infekční agens. Některé bakterie mohou modifikovat svoji stěnu tak, aby byly méně citlivé na defensiny. U bakterie Staphylococcus aureus byly zjištěny geny Dlt a MprF, které jsou zodpovědné za modifikaci kyseliny teichoové a phosphatidylglycerolu v membráně takovým způsobem, že se sníží atraktivita bakterie pro pozitivně nabité defensiny. Poruchy těchto genů způsobují zvýšenou senzitivitu této bakterie na defensiny. Nové poznatky o antimikrobiálních peptidech nám umožňují lépe rozumět infekčním onemocněním a nabízejí nové perspektivy v terapii těchto onemocnění.

Defensins are antimicrobial and immunomodulation peptides, which are the important part of natural immunity. The authors briefly characterize natural immunity, chemical structure and function of defensins. The review deals preferentially with human defensins on respiratory mucous membranes and their effects on bacteria, mainly on gram-negative Staphylococcus aureus. Defensins exert a direct destructive effect on bacterial wall, but they possess an immunomodulation effect as well. Human defensins are divided according to their structure to alpha, beta 1, beta 2, beta 3 and beta 4. Alpha defensins are in granulocytes, in mucosa of urogenital and intestinal tract. Beta defensins are in all epithelial tissues. In the epithelium of respiratory pathways beta defensins 1 are produced constitutively and beta defensins 2 and 3 are induced as a response to infection agents. Some bacteria can modify their wall and thereby become less sensitive to defensins. In the bacteria Staphylococcus aureus the genes Dlt and Mrpf were found responsible for modification of teichoic acid and phosphatidylglycerol in the membrane in such a way that it decreases attractiveness of the bacteria for the positively charged defensins. Defects in these genes caused increased sensitivity of this bacterium to defensins. New knowledge of antibacterial peptides helps us to understand better infectious diseases and offers new perspectives in the therapy of these diseases.

• MeSH
• alfa-defensiny genetika   imunologie   klasifikace   MeSH
• beta-defensiny genetika   imunologie   klasifikace   MeSH
• defensiny imunologie   klasifikace   terapeutické užití   MeSH
• financování organizované MeSH
• imunologické faktory genetika   imunologie   MeSH
• kationické antimikrobiální peptidy genetika   imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• rezistence dýchacích cest fyziologie   genetika   imunologie   MeSH
• Staphylococcus aureus genetika   imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH