Rezistence ke karbapenemům u gramnegativních nefermentujících tyčinek zahrnuje několik typů mechanismů – enzymatickou inaktivaci, aktivní eflux, modifikaci cílového místa a změny v expresi proteinů ve vnější membráně [1]. V České republice byl již v roce 2011 zachycen kmen Acinetobacter baumannii nesoucí geny pro karbapene- mázy NDM-1 a OXA-23, který však byl izolován od pacienta, který pobýval v Egyptě [2]. Naše sdělení popisuje 3 pacienty s infekcemi vyvolanými kmeny Acinetobacter baumannii s průkazem genů kódujících enzym OXA- 23. Vzhledem ke skutečnosti, že pacienti prokazatelně nepobývali v poslední době v zahraničí, lze předpokládat českou provenienci těchto kmenů.
Carbapenem resistance in gram-negative non-fermentative rods involves several types of mechanisms – enzy- matic inactivation, active efflux, target site modification, and changes in porin expression in the outer membrane [1]. An Acinetobacter baumannii strain carrying genes for carbapenemases NDM-1 and OXA-23 was isolated in the Czech Republic in 2011 from a traveller to Egypt [2]. Our report describes three cases of infection caused by Acinetobacter baumannii encoding the OXA-23 enzyme. As these three patients demonstrably had not been abroad, it can be assumed that these strains are of Czech provenance.
- MeSH
- Acinetobacter baumannii * izolace a purifikace účinky léků MeSH
- bakteriální léková rezistence genetika MeSH
- beta-laktamasy genetika MeSH
- beta-laktamová rezistence * genetika MeSH
- DNA bakterií genetika MeSH
- genotyp MeSH
- infekce bakteriemi rodu Acinetobacter mikrobiologie MeSH
- karbapenemy * farmakologie MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- polymerázová řetězová reakce MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
Cíl práce: Zhodnocení kinetických parametrů izolovaných širokospektrých beta-laktamáz a vyhodnocení jejich substrátové specifity. Materiál a metodika: Ve studii bylo použito 40 kmenů Escherichia coli s prokázanou produkcí širokospektrých beta-laktamáz (ESBL), jejichž typ byl určen pomocí polymerázové řetězové reakce a sekvencováním. Kmeny byly uloženy v bakteriologické sbírce na Ústavu mikrobiologie FN a LF UP v Olomouci a pocházely z klinického materiálu od pacientů z JIP Fakultní nemocnice Ostrava a Krajské nemocnice T. Bati ve Zlíně. Kmeny byly sbírány od hospitalizovaných pacientů v období jednoho roku (1. 1. 2009–31. 12. 2009). Izolované enzymy byly použity ke spektrofotometrickému měření specifických aktivit hydrolýzy antibiotik. Beta-laktamáza z šesti vybraných kmenů byla přečištěna a použita pro měření dalších kinetických parametrů. Výsledky: Měření specifických aktivit v lyzátech s částečně purifikovaným enzymem (širokospektrou beta-laktamázou CTX-M-15 nebo CTX-M-27) ukázalo, že nejlépe hydrolyzovaným antibiotikem byl cefazolin. Širokospektrá beta-laktamáza typu CTX-M-15 měla nejvyšší afinitu k cefoperazonu, nejvyšší katalytickou účinnost a vysokou hydrolytickou aktivitu k cefazolinu. Hodnoty kinetických parametrů přečištěných ESBL typu CTX-M-27 se mírně lišily mezi kmeny a vykazovaly vysokou afinitu k cefoperazonu a cefuroximu, vysokou hydrolytickou aktivitu pro cefazolin a silnou katalytickou účinnost k cefazolinu a cefotaximu. Závěry: Srovnání naměřených dat umožnilo vyhodnotit cefazolin jako nejlepší substrát pro použité ESBL. K cefazolinu vykazovaly studované enzymy velice silnou hydrolytickou aktivitu a katalytickou účinnost.
Objective: Evaluation of kinetic parameters isolated extended spectrum beta-lactamases and evaluation of their substrate specifities. Materials and methods: Fourty strains of Escherichia coli with evidence of producing extended spectrum beta-lactamases (ESBLs) and their designated type by polymerase chain reaction and sequencing was used in the study. Strains were stored in bacteriological collection at the Department of Microbiology Teaching Hospital and Palacký University and originated from clinical specimens of ICU, Faculty Hospital Ostrava and Regional Hospital of T. Bata patients. Strains were collected from hospitalized patients in one year (1. 1. 2009–31. 12. 2009). The isolated enzymes were used for spectrofotometric measurement of specific activities by hydrolysis of antibiotics. Beta-lactamases of the six selected strains were purified and used for the measurement of other kinetic parameters. Results: Measurement of specific activities in lysates with partially purified enzyme (beta-lactamases CTX-M-15 or CTX-M-27) showed that the best hydrolyzed antibiotic was cefazolin. Extended spectrum beta-lactamase-type CTX-M-15 had the highest affinity for cefoperazon, the highest catalytic efficiency and high hydrolytic efficiency against cefazolin. The values of kinetic parameters of purified type ESBLs CTX-M-27 was slightly different between strains and showed a high efficiency against cefoperazone and cefuroxime, high hydrolytic activity against cefazolin and strong catalytic effeciency against cefazolin and cefotaxime. Conclusion: Comparison of the measured data enabled to evaluate cefazolin as the best substrate for used ESBLs. The studied enzymes showed very strong hydrolytic activity and catalytic efficiency against cefazolin.
