Cíl práce: Chemiluminiscenční metodou s luminolem vyhodnotit produkci reaktivních kyslíkových částic (ROS) v nativním ejakulátu a v suspenzi spermií a posoudit korelaci těchto dvou metod. Typ studie: Prospektivní laboratorní studie. Název a sídlo pracoviště: Porodnicko-gynekologická klinika LF UP a FN Olomouc. Metodika: Soubor tvořilo 17 fertilních dobrovolníků, 19 normospermiků z infertilních párů, kde byl prokázán ženský faktor neplodnosti a 15 normospermiků s idiopatickou neplodností páru. Produkce ROS byla vyšetřena stejnou chemiluminiscenční metodou s luminolem současně ve vzorcích nativního ejakulátu i vzorcích suspenze promytých spermií. Výsledky: Hodnoty ROS v nativním ejakulátu byly řádově nižší než v suspenzi spermií. Nebyly zjištěny statisticky významné rozdíly mezi produkcí ROS u fertilních dobrovolníků a mužů z neplodných párů. Byla potvrzena korelace mezi log ROS v nativním ejakulátu a v suspenzi promytých spermií v PBS u všech tří skupin (FV r=0,85, p=1,5×10-5; NM r=0,76, p<2×10-4; NMI r=0,75, p<1,5×10-3). Závěr: Měření ROS v nativním ejakulátu je jednodušší, rychlejší a lépe odráží aktuální úroveň oxidačního stresu než měření v suspenzi spermií. Zavedení této metody měření ROS může doplnit algoritmus diagnostiky i léčby mužské neplodnosti a být vodítkem pro antioxidační či antibiotickou léčbu.
Objective: To determine Reactive Oxygen Species (ROS) production in neat semen and spermatozoa suspension using chemiluminescence and to examine correlation between both methods. Subject: Prospective laboratory study. Setting: Department of Obstetric and Gynecology, University Hospital, Olomouc. Methods: The study included fertile volunteers (FV, n = 17), men from infertile couples (NM, n = 19) and men with idiopathic infertility (NMI, n = 15). ROS levels were determined by the same method in neat and washed semen samples. Results: The ROS production in neat semen was lower than that in spermatozoa suspension. There was no significant diference in ROS production between volunteers and males from infertile couples. There was a significant correlation between log ROS in neat semen and in spermatozoa suspension in studied groups (FV r=0.85, p=1.5×10-5; NM r=0.76, p<2×10-4; NMI r=0.75, p<1.5×10-3). Conclusions: Measurement of ROS in neat semen is simpler, faster and better reflecting the actual level of oxidative stress than the same measurement in spermatozoa suspension. The implementation of this method can complement the algorithm of diagnostics and treatment of male infertility and be helpful in selection of patients for antioxidant or antibiotic treatment.
- Klíčová slova
- reaktivní kyslíkové částice, nativní ejakulát, chemiluminescence,
- MeSH
- analýza spermatu MeSH
- financování organizované MeSH
- lidé MeSH
- luminiscenční měření MeSH
- mužská infertilita diagnóza MeSH
- oxidační stres MeSH
- prospektivní studie MeSH
- spermie sekrece MeSH
- statistika jako téma MeSH
- suspenze MeSH
- volné radikály analýza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
Cíl studie: Ověřit, zda náhrada sérového albuminu rekombinantním lidským albuminem a hyaluronanem v transferovém médiu EmbryoGlue (EG), ovlivňuje implantaci embryí v programu IVF+ET. Typ studie: Prospektivní studie. Název a sídlo pracoviště: Centrum asistované reprodukce, Porodnicko-gynekologická klinika LF UP a FN Olomouc. Metodika: Do prospektivní studie bylo zařazeno 297 IVF cyklů ukončených embryotransferem (ET). Pacientky byly rozděleny do 2 skupin podle typu použitého transferového média (kultivační médium G2.2, n = 112 a transferové médium EG, n = 185), a v závislosti na věku do tří podskupin (do 30 let, 30-38 let, starší než 38 let). U všech pacientek byly sledovány vstupní (průměrný věk, počet získaných oocytů, procento oplození (FR), počet zamražených embryí, počet transferovaných embryí) a výstupní parametry (počet klinických těhotenství (PR), implantační poměr (IR), těhotenské ztráty (AB) a výskyt vícečetných těhotenství). Výsledky: U pacientek do 30 let (EG = 72 vs. G2.2 = 51) a nad 38 let (EG = 18 vs. G2.2 = 18) nebyly zjištěny rozdíly ve vstupních ani výstupních parametrech. Zatímco u pacientek 30-38 let (EG = 94 vs. G2.2 = 44) byla významně vyšší schopnost embryí ze skupiny EG implantovat (IR 27,7 % vs. 15,3 %, p <0,01), v ostatních výstupních parametrech již rozdíly zjištěny nebyly (PR 43,6 % vs. 39,5 %, AB 7,3 % vs. 11,7 %). Závěr: Lidský sérový albumin může být úspěšně nahrazen hyaluronanem jako výhradní makromolekulou v transferovém médiu a rekombinantním lidským albuminem, aniž by došlo k poklesu počtu klinických gravidit a implantačního poměru. V naší práci bylo dosaženo nejen obdobných výsledků při použití EG média v porovnání s dosud používaným G2.2 médiem, ale u pacientek ve věku 30-38 let byl dokonce prokázán statisticky významně pozitivní vliv EG na implantaci embryí.
Objective: To assess, if the replacement of serum albumin by recombinant human albumin and hyaluronan in EmbryoGlue transfer medium effects embryo implantation within IVF+ET programme. Design: A prospective study. Setting: Department of Obstetric and Gynecology, University Hospital, Olomouc. Methods: 297 IVF cycles with the embryotransfer (ET) were evaluated. The patients were divided into 2 groups according to the type of transfer medium (culture medium; G2.2, n=112 and the transfer medium EmbyoGlue (EG) n=185) and to three subgroups according to the age of the patients (<30, 30-38, >38). In both groups the following entry parameters were compared: average age, number of oocytes obtained, fertilization rate (FR), number of frozen embryos, number of transferred embryos. The outcome parameters compared were: pregnancy rate (PR), implantation rate (IR), abortions (AB) and the number of multiple pregnancies. Results: In the group of patients up to 30 (EG = 72 vs. G2.2 = 51) and over 38 years of age EG = 18 vs. G2.2 = 18) no differences in input and output parameters have been discovered, while in the group of patients between 30 and 38 years of age (EG = 94 vs. G2.2 = 44) the results of EG group embryo implantation have been improved significantly (IR 27.7% vs. 15.3%, p < 0.01). No differences in any other output parameters have been encountered (PR 43.6% vs. 39.5%, AB 7.3% vs. 11.7%). Conclusion: Human serum albumin can be replaced by hyaluronan as a sole macromolecule in a human embryo transfer medium and by recombinant human albumin, without reduction of pregnancy rate (PR) and implantation rate (IR). Not only similar results were achieved in EG medium compared to currently used G2.2 medium, but in the group of 30-38 year old patients a statistically significant positive influence of EG on the implantation of embryos has been observed.
- MeSH
- asistovaná reprodukce trendy využití MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- infertilita terapie MeSH
- interpretace statistických dat MeSH
- kultivace embrya MeSH
- kultivační média klasifikace MeSH
- kyselina hyaluronová antagonisté a inhibitory terapeutické užití MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- přenos embrya statistika a číselné údaje využití MeSH
- prospektivní studie MeSH
- sérový albumin terapeutické užití MeSH
- techniky in vitro MeSH
- těhotenství MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- těhotenství MeSH
- ženské pohlaví MeSH