The selection of proper reference genes and materials is critical in the design of PCR experiments, especially for differential expression studies. In this study, we propose a method to identify robust endogenous control miRNAs in the visceral adipose tissue of C57BL/6J mice with non-alcoholic fatty liver disease induced by alternating Western and control diets. This study outlines a comprehensive methodology for the analysis of microRNA endogenous controls using microfluidic cards in conjunction with miRNA profiling through small RNA sequencing and subsequent validation by quantitative PCR and the RefFinder algorithm. Criteria included were fold change, p-value, reads per million, and gene stability assessment. A set of six putative endogenous microRNAs was identified (miR-331-3p, let-7a-5p, miR-1839-5p, miR-151a-5p, let-7d-5p, and let-7c-5p). Subsequent validation and analysis using the RefFinder algorithm assessed the stability of the selected genes, and a combination of the three most stable endogenous miRNA controls (miR-331-3p, let-7a- 5p, and miR-1839-5p) exhibiting consistent expression patterns with minimal variability was set. Given the absence of universal endogenous controls, individual evaluation of normalizers for each experiment is imperative for accurate miRNA expression measurements. This approach, which combines multiple techniques and assessments, provides a reliable strategy for identifying and validating endogenous controls in miRNA studies.
- MeSH
- algoritmy MeSH
- mikro RNA * genetika metabolismus MeSH
- modely nemocí na zvířatech * MeSH
- myši inbrední C57BL MeSH
- myši MeSH
- nealkoholová steatóza jater * genetika metabolismus patologie MeSH
- nitrobřišní tuk * metabolismus MeSH
- regulace genové exprese MeSH
- stanovení celkové genové exprese metody MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- mužské pohlaví MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Příspěvek se zabývá problematikou koexistence vývojové dysfázie a specifických poruch učení a jejich projevy u dítěte během jeho vývoje. Zahrnuje teoretické prameny i výzkumná šetření v této oblasti. Byla vybrána případová studie chlapce v mladším školním věku, který dlouhodobě navštěvuje pracoviště klinické logopedie s přetrvávajícími symptomy vývojové dysfázie. Mezi ně patří dysgramatismy, narušení artikulace, zrakoprostorové a jemněmotorické deficity včetně orofaciální dyspraxie. Tyto obtíže se propagují také do specifické poruchy učení - dysgrafie. Přidružují se narušení v sociální oblasti a schopnosti navazovat odpovídající komunikaci.
The article deals with issues of coexistence specific language impairment and specific learning disabilities and their manifestation at the school age. It includes theoretical resources and researches of this issue. Therefore, was selected a case study of young school-age boy who has been visiting clinical speech therapy for a long term with persistent specific language impairment symptoms. It contains disturbed grammar, articulation, visually-spacial and fine-motor skills including orofacial dyspractic. These impairments are associated in specific learning disability - dysgraphy. Social and establish communication skills are disturbed too.
- MeSH
- dítě MeSH
- jazykové testy MeSH
- lidé MeSH
- poruchy učení * diagnóza komplikace terapie MeSH
- řečová terapie metody MeSH
- výsledek terapie MeSH
- vývoj řeči MeSH
- vývojové poruchy u dětí * diagnóza komplikace terapie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH