Východiska: Nádorové antigeny testis (CTA) jsou považovány za nádorové biomarkery z důvodu jejich vysoce specifické exprese u lidských malignit a jelikož se téměř nevyskytují v normálních somatických tkáních. Díky své specifické expresi umožňují v posledních letech lépe stanovit včasnou diagnózu, prognózu pacientů a léčbu rakoviny. Lactobacily jsou skupina probiotik s protinádorovými, imunomodulačními a dalšími prospěšnými vlastnostmi. Bylo prokázáno, že tyto bakterie mění expresi několika genů souvisejících s nádory. Cíl: Po synchronizaci buněk HeLa pomocí MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid] jsme pomocí kvantitativní polymerázové řetězové reakci v reálném čase zkoumali vliv supernatantu Lactobacillus rhamnosus GG (LRS) a supernatantu Lactobacillus crispatus SJ-3C-US (LCS) na expresi čtyř CTA (TSGA10, AURKC, OIP5 a AKAP4). Výsledky: LRS a LCS inhibovaly růst buněk HeLa po 24 hod, což bylo prokázáno pomocí MTT testu. Exprese všech CTA byly po léčbě oběma supernatanty nižší. Závěr: Tato studie prokázala úlohu laktobacilů při snížení exprese genů CTA. Taková změna exprese může být zapojena do protinádorových účinků těchto laktobacilů. Základní mechanismy těchto pozorování nejsou jasné, ale v tomto procesu se mohou účastnit epigenetické modulační mechanismy. K posouzení funkčních rolí laktobacilů v modulaci jiných genů souvisejících s nádory je třeba dalších studií.
Background: Cancer testis antigens (CTAs) are considered cancer biomarkers due to their highly specific expression pattern in human malignancies and near absence from normal somatic tissues. Their specifi c expression has made them potential targets for early diagnosis, assessment of patients' prognosis and treatment of cancer in recent years. Lactobacilli are a group of probiotics with anti-cancer, immunomodulatory and other beneficial features. These bacteria have been shown to alter expression of several cancer-related genes. Aim: We investigated the eff ect of Lactobacillus rhamnosus GG supernatant (LRS) and Lactobacillus crispatus SJ-3C- -US supernatant (LCS) on expression of four CTAs (TSGA10, AURKC, OIP5 and AKAP4) in HeLa cell line after synchronization using MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay and quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: LRS and LCS inhibited HeLa cell growth after 24 h as demonstrated by MTT assay. Expressions of all CTAs were down-regulated after treatment with both supernatants. Conclusion: This study showed the role of Lactobacilli in down-regulation of CTAs genes. Such expression change might be involved in the anticancer effects of these Lactobacilli. The underlying mechanisms of these observations are not clear but epigenetic modulatory mechanisms may participate in this process. Future studies are needed to assess functional roles of Lactobacilli in modulation of other cancer-related genes.
Východiska: V předchozím článku jsme ukázali, že metformin (MET) může snížit apoptózu indukovanou ionizační radiací (ionizing radiation – IR) v mononukleárních buňkách lidské periferní krve. Anti-apoptotický mechanizmus MET vůči IR však zůstává nejasný. Tato studie se pokouší ověřit mechanizmus působení MET v omezování rentgenem indukovanou apoptózu v mononukleárních buňkách lidské periferní krve. Materiál a metody: Mononukleární buňky byly 2 hod ošetřovány MET a ozářovány 6 Gy rentgenovými paprsky. Úrovně genové exprese BAX, CASP3 a BCL2 byly stanoveny 24 hod po ozáření za použití kvantitativní polymerázové řetězové reakce (qualitative polymerase chain reaction – qPCR) v reálném čase. Kromě toho byly hladiny proteinů BAX, CASP3 a BCL2 analyzovány pomocí metody Western blott. Výsledky: Radiační expozice zvýšila expresi genů BAX a CASP3 a snížila expresi genu BCL2 u mononukleárních buněk. Naopak, zvýšení exprese genu BCL2 spolu se snížením exprese genu BAX a CASP3 bylo pozorováno u MET a ozářených mononukleárních buněk. Bylo zjištěno, že záření zvýšilo poměr BAX/BCL2, zatímco MET snížil tento poměr. Také léčba s MET bez ozáření nezměnila expresi genů BAX, CASP3 a BCL2. Na druhou stranu snížená hladina proteinu BCL2 a zvýšená hladina proteinů BAX a CASP3 v 2 Gy ozářených mononukleárních buňkách, zatímco ovlivnění pomocí MET výrazně zvrátila tuto tendenci. Závěr: Výsledek naznačuje, že MET může chránit mononukleární buňky před apoptózou indukovanou IR prostřednictvím indukce buněčné anti-apoptotické signalizace.
Background: In a previous article, we showed that metformin (MET) can reduce ionizing radiation (IR) induced apoptosis in human peripheral blood mononuclear cells. However, the anti-apoptotic mechanism of MET against IR remains unclear. The present study attempts to investigate the mechanism of action of MET in limiting X-ray induced apoptosis in human peripheral blood mononuclear cells. Material and Methods: Mononuclear cells were treated with MET for 2 hours and irradiated with 6 MV X-rays. The gene expression levels of BAX, CASP3 and BCL2 were determined 24 hours post irradiation using real time quantitative polymerase chain reaction (qPCR) technique. Furthermore, the protein levels of BAX, CASP3 and BCL2 were analyzed by Western blotting assay. Results: Radiation exposure increased the expressions of BAX and CASP3 genes, and decreased the expression of BCL2 gene in mononuclear cells. Conversely, an increase in BCL2 gene expression along with a decrease in BAX and CASP3 genes expression was observed in MET plus irradiated mononuclear cells. It was found that radiation increased BAX/BCL2 ratio, while MET pretreatment reduced these ratios. Also, treatment with MET without irradiation did not change the expressions of BAX, CASP3 and BCL2 genes. On the other hand, downregulated expression of BCL2 protein and upregulated expressions of BAX and CASP3 proteins were found in 2 Gy irradiated mononuclear cells, while pretreatment with MET significantly reversed this tendency. Conclusion: These results suggest that MET can protect mononuclear cells against apoptosis induced by IR through induction of cellular anti-apoptotic signaling.
- Klíčová slova
- ionizující záření – metformin – apoptóza – geny – proteiny – krevní buňky Autoři deklarují, že v souvislosti s předmětem studie nemají žádné komerční zájmy. Redakční rada potvrzuje, že rukopis práce splnil ICMJE kritéria pro publikace zasílané do biomedicínských časopisů. Obdrženo: 2. 8. 2017 Přijato: 7. 9. 2017,
- MeSH
- apoptóza * účinky léků MeSH
- geny MeSH
- ionizující záření MeSH
- klinická studie jako téma MeSH
- krevní buňky MeSH
- lidé MeSH
- metformin * MeSH
- proteiny MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
