The effect of different cultivation temperatures (30 and 37 degrees C) and pH of the media (5.5, 7.5, 8.5) on the biofilm production was compared in Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, and Vibrio cholerae non-O1 and O1 using the crystal-violet test for estimation of quantitative production of the biofilm. Decrease (46.4-98.4 %) in the biofilm production was observed at 37 degrees C in 8 of the tested strains (P. aeruginosa three strains, K pneumoniae two, V. cholerae non-O1 two, and V. cholerae O1 one strain) compared with the production at 30 degrees C. On the other hand, five strains (P. aeruginosa 1, K. pneumoniae 3, V. cholerae non-O1 1) exhibited under these conditions a higher biofilm production (103-143 %). However, this difference was not significant (p = 0.196). Increased pH lead to a higher biofilm production using all media tested. In P. aeruginosa the biofilm production at pH 8.5 was 139-244 %, at pH 7.5 136-164 % in comparison with pH 5.5. Similarly, in K. pneumoniae the biofilm production increased to 151-319 % at pH 8.5 while with the drop of pH to 7.5 the biofilm production was 113-177 % compared with pH 5.5. In V. cholerae non-O1 and O1 the biofilm production reached 204-329 % at pH 8.5, and 123-316 % at pH 7.5 (compared with the production at pH 5.5). An increase in biofilm production represented an average of 169 % (p = 0.001) at pH change from 5.5 to 7.5, with the rise of pH from 5.5 to 8.5 caused an average difference of 229 % (p = 0.001).

• MeSH
• barvení a značení MeSH
• barvicí látky farmakologie   MeSH
• biofilmy růst a vývoj   účinky léků   účinky záření   MeSH
• financování organizované MeSH
• genciánová violeť farmakologie   MeSH
• Klebsiella pneumoniae růst a vývoj   účinky léků   účinky záření   MeSH
• koncentrace vodíkových iontů MeSH
• lidé MeSH
• Pseudomonas aeruginosa růst a vývoj   účinky léků   účinky záření   MeSH
• teplota MeSH
• Vibrio cholerae non-O1 růst a vývoj   účinky léků   účinky záření   MeSH
• Vibrio cholerae O1 růst a vývoj   účinky léků   účinky záření   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Cieľ: Cieľom štúdie bolo vyhodnotenie vplyvu 6 kultivačných médií (komplexné – 5, minerálne – 1) na tvorbu biofilmu a na odpoveď na oxidačný stres u Pseudomonas aeruginosa (3 kmene) a Vibrio cholerae non-O1 (3 kmene). Metodika: Tvorbu biofilmu sme kvantitatívne vyhodnotili testom absorpcie kryštálovej violete. Odpoveď baktérií na oxidačný stres vyvolaný peroxidom vodíka sme hodnotili ako zónu vyčírenia obklopujúcu disky po 24 hodinovej inkubácii pri 37 °C. Výsledky: Najvyššiu tvorbu biofilmu u obidvoch bakteriálnych druhov sme zistili po kultivácii v tryptónovo-sójovom médiu (TSM), resp. v tryptónovo-sójovom médiu obohatenom o 8 % glukózy ( TSM +GL), najnižšiu v minerálnom médiu (MM). Kmene V. cholerae non-O1 boli v priemere 1,4- 3,4 krát citlivejšie v odpovedi na oxidačný stres v závislosti na médiu v porovnaní s kmeňmi P. aeruginosa. Zloženie kultivačného média výrazne neovplyvnilo reakciu vibrií na oxidačný stres vyvolaný H2O2 na rozdiel od P. aeruginosa. Najvyššiu rezistenciu na H2O2 u P. aeruginosa v priemere sme zistili po kultivácii v peptónovej vode, najcitlivejšie boli bunky po kultivácii v TSM + GL a v MM. Záver: Zloženie kultivačného média ovplyvnilo tvorbu biofilmu u obidvoch bakteriálnych druhov a výraznejšie ovplyvnilo aj odpoveď na oxidačný stres u P. aeruginosa.

Objective: To evaluate the effect of six culture media (five complex and one mineral) on biofilm formation and response to oxidative stress in Pseudomonas aeruginosa (3 strains) and Vibrio cholerae non-O1 (3 strains). Methods: Biofilm formation was quantitatively determined by a crystal violet absorption assay. The bacterial response to oxidative stress evoked by hydrogen peroxide was visualized as a zone of clearing around the disc after 24 h incubation at 37°C. Results: For both of the bacterial species studied, biofilm formation was the highest after cultivation in tryptone soya broth (TSM) or in TSM supplemented with 8% glucose (TSM+GL), being the lowest in mineral medium (MM). V. cholerae non O1 strains were 1.4 to 4.3 times more responsive on average to oxidative stress depending on culture medium as compared with P. aeruginosa strains. The culture medium had no significant effect on H2O2 evoked by response to oxidative stress in vibrios in contrast to P. aeruginosa. In P. aeruginosa, the highest mean resistance to H2O2 was observed after cultivation in peptone water while the most sensitive cells were found after incubation in TSM+GL and MM. Conclusion: The culture medium composition influnced biofilm formation in both of the bacterial species tested and had a considerable effect on response to oxidative stress in P. aeruginosa.

• MeSH
• biofilmy růst a vývoj   MeSH
• financování organizované MeSH
• kultivační média MeSH
• kultivační techniky metody   využití   MeSH
• oxidační stres účinky léků   MeSH
• peroxid vodíku škodlivé účinky   MeSH
• Pseudomonas aeruginosa izolace a purifikace   růst a vývoj   MeSH
• Vibrio cholerae O1 izolace a purifikace   růst a vývoj   MeSH

• MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiologie vody normy   MeSH
• monitorování životního prostředí metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí metody   využití   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Vibrio cholerae non-O1 izolace a purifikace   patogenita   růst a vývoj   MeSH
• Vibrio cholerae O1 izolace a purifikace   patogenita   růst a vývoj   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH