Reactive oxygen species play an important role in the process of apoptosis in many cell types. In this paper, we analyzed the role of ROS in DNA-damaging agents (actinomycin D or decitabine), which induced apoptosis of leukemia cell line CML-T1 and normal peripheral blood lymphocytes (PBL). The possibility of synergism with histone deacetylase inhibitors butyrate or SAHA is also reported. We found that in cancer cell line, ROS production significantly contributed to apoptosis triggering, while in normal lymphocytes treated by cytostatic or cytotoxic drugs, necrosis as well as apoptosis occurred and large heterogeneity of ROS production was measured. Combined treatment with histone deacetylase inhibitor did not potentiate actinomycin D action, whereas combination of decitabine and SAHA brought synergistic ROS generation and apoptotic features in CML cell line. Appropriate decrease of cell viability indicated promising therapeutic potential of this combination in CML, but side effects on normal PBL should be taken into attention.

• MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• azacytidin analogy a deriváty   farmakologie   MeSH
• butyráty farmakologie   MeSH
• cytostatické látky farmakologie   MeSH
• daktinomycin farmakologie   MeSH
• inhibitory histondeacetylas farmakologie   MeSH
• kaspasa 3 metabolismus   MeSH
• kyseliny hydroxamové farmakologie   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• poly(ADP-ribosa)polymerasy metabolismus   MeSH
• poškození DNA účinky léků   MeSH
• protinádorové látky farmakologie   MeSH
• reaktivní formy kyslíku metabolismus   MeSH
• synergismus léků MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Restoration of cellular apoptotic pathways plays a crucial role in cancer therapy strategies. In a broad spectrum of anticancer drugs, epigenetic effectors are in the center of interest mostly because of potential reversibility of their action. Methylation status of the cells is influenced by methyltransferase inhibitor 2-deoxy-5'-azacytidine (decitabine, DAC), but higher concentrations of this agent cause a DNA-damage. In our study, tumor supressor p53-apoptotic pathway was activated in decitabine-induced cell death. Expression of p53-inducible BH3-only apoptotic proteins Puma and Noxa was elevated and large activation of executive caspases was observed. The extent of acetylation in the cell is affected by histonedeacetylase inhibitor suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA). Combination of SAHA with decitabine brought synergistic effect on apoptosis triggering in CML-T1 cell line, but apoptosis as well as necrosis occurred also in normal peripheral blood lymphocytes. Therefore, promising potential of such combined therapy calls for more detailed investigation of unwanted effects in normal cells.

• MeSH
• apoptóza účinky léků   genetika   MeSH
• azacytidin analogy a deriváty   farmakologie   MeSH
• chronická myeloidní leukemie genetika   metabolismus   patologie   MeSH
• kultivované buňky MeSH
• kyseliny hydroxamové farmakologie   MeSH
• lidé MeSH
• lymfocyty účinky léků   metabolismus   MeSH
• preklinické hodnocení léčiv MeSH
• proteiny regulující apoptózu genetika   metabolismus   MeSH
• protinádorové antimetabolity farmakologie   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie farmakologie   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-bcl-2 genetika   metabolismus   MeSH
• protoonkogenní proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• regulace genové exprese u leukemie účinky léků   MeSH
• synergismus léků MeSH
• upregulace účinky léků   genetika   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Interakce mezi regulátory buněčné proliferace a apoptotickými efektory protinádorové obrany v normálních a leukemických buňkách. Změny tvorby a lokalizace interakčních komplexů při vzniku krevních malignit, význam v časné diagnostice a léčbě leukémií. Studium interakčních komplexů v normálních krevních buňkách a v buňkách leukemických linií metodami: imunoblot, afinitní chromatografie, kvasinkový 2-hybridní systém, hmotová spektrometrie, průtoková cytometrie, fluorescenční mikroskopie.; Study of interactions between nuclear and nucleolar factors controlling cell proliferation and effectors of programmed cell death. Modifications and translocations during leukemogenesis and drug induced apoptosis in normal leukocytes and leukemic cells.The study of interaction complexes in normal blood cells and leukemic cell lines using: qRT-PCR, immunoblotting, yeast two-hybrid system, affinity chromatography, mass spektrometry, flow cytometry, immunofluorescence microscopy.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytotoxiny MeSH
• genetická epistáze MeSH
• leukemie diagnóza   terapie   MeSH
• nádorové supresorové proteiny MeSH
• onkogeny MeSH
• organizátor jadérka MeSH
• proliferační antigen buněčného jádra MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR