Midostaurin is an FMS-like tyrosine kinase 3 receptor (FLT3) inhibitor that provides renewed hope for treating acute myeloid leukaemia (AML). The limited efficacy of this compound as a monotherapy contrasts with that of its synergistic combination with standard cytarabine and daunorubicin (Dau), suggesting a therapeutic benefit that is not driven only by FLT3 inhibition. In an AML context, the activity of the enzyme aldo-keto reductase 1C3 (AKR1C3) is a crucial factor in chemotherapy resistance, as it mediates the intracellular transformation of anthracyclines to less active hydroxy metabolites. Here, we report that midostaurin is a potent inhibitor of Dau inactivation mediated by AKR1C3 in both its recombinant form as well as during its overexpression in a transfected cell model. Likewise, in the FLT3- AML cell line KG1a, midostaurin was able to increase the cellular accumulation of Dau and significantly decrease its metabolism by AKR1C3 simultaneously. The combination of those mechanisms increased the nuclear localization of Dau, thus synergizing its cytotoxic effects on KG1a cells. Our results provide new in vitro evidence of how the therapeutic activity of midostaurin could operate beyond targeting the FLT3 receptor.

• MeSH
• akutní myeloidní leukemie farmakoterapie   enzymologie   genetika   patologie   MeSH
• biotransformace MeSH
• daunomycin metabolismus   farmakologie   MeSH
• HCT116 buňky MeSH
• inhibitory enzymů farmakologie   MeSH
• kolorektální nádory farmakoterapie   enzymologie   genetika   patologie   MeSH
• lidé MeSH
• protein AKR1C3 antagonisté a inhibitory   genetika   metabolismus   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie farmakologie   MeSH
• staurosporin analogy a deriváty   farmakologie   MeSH
• synergismus léků MeSH
• tyrosinkinasa 3 podobná fms antagonisté a inhibitory   genetika   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Although novel anticancer drugs are being developed intensively, anthracyclines remain the gold standard in the treatment of acute myeloid leukaemia (AML). The reductive conversion of daunorubicin (Dau) to less active daunorubicinol (Dau-ol) is an important mechanism that contributes to the development of pharmacokinetic anthracycline resistance. Dau is a key component in many AML regimes, in which it is combined with many drugs, including all-trans-retinoic acid (ATRA), cytarabine, cladribine and prednisolone. In the present study, we investigated the influence of these anticancer drugs on the reductive Dau metabolism mediated by the aldo-keto reductases AKR1A1, 1B10, 1C3, and 7A2 and carbonyl reductase 1 (CBR1). In incubation experiments with recombinant enzymes, cladribine and cytarabine did not significantly inhibit the activity of the tested enzymes. Prednisolone inhibited AKR1C3 with an IC50 of 41.73 µM, while ATRA decreased the activity of AKR1B10 (IC50 = 78.33 µM) and AKR1C3 (IC50 = 1.17 µM). Subsequent studies showed that AKR1C3 inhibition mediated by ATRA exhibited tight binding (Kiapp = 0.54 µM). Further, the combination of 1 µM ATRA with different concentrations of Dau demonstrated synergistic effects in HCT116 and KG1a human cells expressing AKR1C3. Our results suggest that ATRA-mediated inhibition of AKR1C3 can contribute to the mechanisms that are hidden beyond the beneficial clinical outcome of the ATRA-Dau combination.

• MeSH
• akutní myeloidní leukemie farmakoterapie   MeSH
• alkoholoxidoreduktasy MeSH
• antracykliny MeSH
• daunomycin MeSH
• karbonylreduktasa (NADPH) metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• protinádorová antibiotika farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• protinádorové látky MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Akútne mozgovocievne ochorenia väčšinou klasifikované ako mozgová príhoda sú najčastejšie poruchy centrálneho nervového systému. Prechodná ložisková mozgová ischemia (stroke) vedie k rozsiahlemu excitotoxickému poškodeniu neurónov a glie. Počas ischémie je spos uvoľnením glutamátu zvýšená aj hladina mimobunkového ATP, ktoré aktivuje purínergné receptory, špeciálne ionotropné receptory P2X. Nadmerná aktivácia receptora podtypu P2X7 môže viesť k excitotoxickej bunkovej smrti. V práci sme za účelom štúdia neuroprotektívneho efektu Brilliant Blue B (BBG), špecifického inhibítora receptora P2X7, použili model prechodnej ložiskovej ischémie u potkanov navodením oklúzie strednej mozgovej tepny (MCAO). Aplikácia BBG v tomto modeli spôsobuje redukciu objemu infarktovej zóny až o 50 % v porovnaní so skupinou zvierat, ktorým bol podaný fyziologický roztok. Tieto výsledky ukazujú, že receptor P2X7 je než sprostredkovateľom poškodelia tkaniva po mozgovej príhode. To poukazuje na skupina purínergných receptorov môžu byť vhodným molekulárnym cieľom ri vývoji terapeutických postupov zmierňujúcich poškodenenie tkaniva po mozgovej príhode.

Acute cerebrovascular diseases mostly classified as ischem- ic strokes are the most frequent disorders of the central nervous system. Transient focal cerebral ischemia leads to extensive release excitotoxic neuronal and glial damage. During ischemia together with glutamate releas is increased level of extracellular ATP which activate purinergic receptors, especially ionotropic P2X receptors. Overactivation of subtype P2X7 receptors can induce excitotoxic cell death. We used middle cerebral artery occlusion (MCAO) in rats as a model of transient focal cerebral ischemia to study the neuroprotective effect of Brilliant Blue G (BBG), selective inhibitor of P2X7 receptor. Treatment with BBG produced about 50% reduction in the extent of brain damage compared to treatment with vehicle alone. These results show that P2X7 purinergic receptors mediate tissue damage in neurons following transient brain ischemia. Therefore, these receptors are a relevant molecular target for the development of new treatments to attenuate brain damage following stroke.

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

Cieľom našej práce bolo sledovať možnú súvislosť medzi koncentráciou BDNF proteínu a priebehom mozgovej ischémie-reperfúzie. Použili sme modely prechodnej ložiskovej (FI) a celkovej ischémie (GI) u potkana v trvaní 90, resp. 10 min. Vzorky krvi sme odoberali pred a poèas ischémie a v 40. a 90. min. reperfúzie. Výsledky experimentu ukázali zmeny v koncentrácii BDNF v celkovej krvi, plazme a bunkovej zložke krvi. V modely FI koncentrácia BDNF v celkovej krvi, plazme a krvných bunkách prudko poklesla v priebehu prvých 40 min zastavenia krvného zásobenia. Vo vzorkách celkovej krvi a krvnej zložky hladina BDNF zaèala stúpať a dosiahla kontrolnú úroveò. Naopak, plazmatická hladina tohto proteínu signifikantne poklesla asi o 55 %. Pri celkovej ischémii sme nepozorovali žiadne významné zmeny po ischemickom zásahu. V priebehu prvých 90 min. reperfúzie u oboch modelov kontinuálne poklesla hladina proteínu BDNF vo vzorkách celkovej krvi a bunkovej frakcie. Plazmatická hladina BDNF zaèala stúpať v 40. min. reperfúzie. V 90. min recirkulácie hladina BDNF po FI sa zvýšila o 92 %, pri GI bol nárast o 155 %. Na záver môžeme konštatovať že mozgová ischemia–reperfúzia vedie ku zmenám BDNF koncentrácie v celkovej krvi, plazme a krvných bunkách. Ischémia mozgu spôsobuje celkové zníženie hladiny BDNF. Plazmatická hladina tohto proteínu redu- kovaného v priebehu ischémie sa v období recirkulácie markantne zvyšuje.

In the present paper we studied possible connection of BDNF blood level in process of brain ischemia-reperfusion. We used models of transient focal (FI) and global (GI) ischemia in rat in duration 90 min and 10 min, respectively. Blood samples were collected before and during ischemia and at 40 and 90 min of reperfusion. Results of experiment show- ed changes of BDNF level in total blood, plasma and blood cells. In model of FI, BDNF concentration in total blood, as well as in plasma and blood cells, rapidly decreased during the first 40 min of blood supply restriction. In samples of whole blood and blood cells BDNF started to rise at the end of ischemic insult at least on the control level. On the contrary, plasma level of this protein was significantly decreased about 55 %. In model of GI we didn’t observe some important changes after ischemic insult. During the first 90 min of reperfusion in both models BDNF level in total blood and in blood cells continuously decreased. Plasma level of BDNF started to rise at 40 min of reperfusion. At 90 min of recirculation BDNF level in model of FI reached 92 %, in GI about 155 %. In conclusion we can state that brain ischemia-reperfusion leads to changes of BDNF level in total blood, as well as in plasma and blood cells. Brain ischemia causes reduction of total BDNF level during ischemia. On the other side plasma level of this protein reduced during ischemia markedly rises during recirculation.

• Klíčová slova
• BDNF, ischémia, krv, plazma,
• Publikační typ
• abstrakty MeSH

Schopnosť neskorého postkondicionovania spočíva v záchrane najcitlivejších populácii mozgových buniek a schopnosť zachovať si rozhodujúce funkcie v oblasti učenia a pamäte. Mechanizmy týchto procesov nie sú objasnené. Každý relevantný výsledok v tejto oblasti môže priniesť zaujímavý pokrok. Navyše zjavný prienik medzi fenoménom ischemickej tolerancie a multirezistencie voči liekom dáva šancu obohatenia poznatkovej bázy v oboch týchto oblastiach. Táto štúdia sa zaoberá Z medicínskeho hľadiska mimoriadne závažnou, aktuálnou problematikou ochrany najcitlivejších bunkových populácií mozgu proti ischemicko-reperfúznemu poškodeniu, to oblasti pri odstraňovaní nežiaducich buniek z organizmu. Koncepcia oneskoreného postkondicionovania otvára využitie dvojdňového terapeutického okna medzi ischemickým (aj toxickým) atakom a nástupom oneskorenej smrti neurónov v najcitlivejších regiónoch mozgu (CAl hipokampu) Rovnako aj možnosť zabránenia vzniku tolerancie/rezistencie môže priniesť nové originálne výsledky s významným potenciálom využitia v klinickej medicíne.

Base of delayed postconditioning consist in the ability of this procedure to protect most sensitive brain regions against transient ischemia up to the 10 minutes of duration. Moreover, surviving neurons are able to keep their crucial functions – learning and memory. Mechanisms of these processes are unclear. Each relevant result in this field has potential to bring interesting advance. Moreover, similarity between ischemic tolerance and multidrug resistance will offer us enrichment of knowledge in both of these fields. Application of anticonditioning bring us, besides better understanding of regulation of apoptosis, perspective of application of these knowledge in medicine. This study is pointed to clinically actual and extremely serious problematic of defence of most s ensitive brain neurons against ischemic-reperfusion injury as well as ut ilization of knowledge obtained in this field for elimination of unwanted cell populations from the organism. Conception of delayed postconditioning opens utilization of two days lasting therapeutic window between ischemic (or toxic) attack and onset of so called delayed neuronal death in selectively vulnerable regions of brain (CA1 of hippocampus Equally possibility to avoid induction of tolerance can help us to obtain new original results with significant potential of application in clinical medicine.

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Publikační typ
• abstrakty MeSH

Kniha představuje osobitý souhrn rozhovorů s představiteli české vědecké obce, který nabízí široké čtenářské veřejnosti pohled na vědecké bádání (jak v oblasti humanitních, tak i přírodovědných či sociálních vědních disciplín). Rozhovory vznikaly v průběhu let 2000–2009 a vycházely v Akademickém bulletinu.

• MeSH
• dějiny 20. století MeSH
• dějiny 21. století MeSH
• inteligence MeSH
• postoj MeSH
• věda MeSH
• Check Tag
• dějiny 20. století MeSH
• dějiny 21. století MeSH
• Publikační typ
• rozhovory MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH

• Konspekt
• Věda. Všeobecnosti. Základy vědy a kultury. Vědecká práce
• NLK Obory
• věda a výzkum

Kniha představuje osobitý souhrn rozhovorů s představiteli české vědecké obce, který nabízí široké čtenářské veřejnosti pohled na vědecké bádání (jak v oblasti humanitních, tak i přírodovědných či sociálních vědních disciplín). Rozhovory vznikaly v průběhu let 2000–2009 a vycházely v Akademickém bulletinu.

• MeSH
• rozhovory jako téma MeSH
• věda MeSH
• Publikační typ
• rozhovory MeSH
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Věda. Všeobecnosti. Základy vědy a kultury. Vědecká práce
• NLK Obory
• věda a výzkum