Závěrečná zpráva o řešení grantu Agentury pro zdravotnický výzkum MZ ČR
nestr.
The aim of the project is to evaluate the applicability of high throughput sequencing (HTS) as a tool for complex characterization of oral microbiome dynamics and thus for early diagnosis of risk and onset of periodontitis and for monitoring of treatment. The 7-year long-term study exploring the dynamics of changes in the oral microbiome composition in already established group of 20 initially healthy subjects and a control group of patients with chronic periodontitis will document in detail the transformation of "healthy" bacterial biofilm into the periodontal one. The HTS will be employed also for monitoring of oral microbiome during and after the therapy of a group of 60 patients with aggressive periodontitis treated by either of two standard procedures. Comparison of outputs of both experiments will reveal, whether the composition of subgingival biofilm differs in chronic and aggressive periodontitis. The complex methodological procedure for HTS integration into system of early diagnosis and treatment of patients with periodontitis will be developed.
Cílem projektu je posoudit využitelnost vysokoúčinných metod paralelního sekvenování (HTS – high-throughput sequencing) jako nástroje pro komplexní charakterizaci dynamiky mikrobiomu dutiny ústní a tím pro včasnou diagnózu rizika i nástupu parodontitidy a pro sledování postupu léčby. V dlouhodobé studii, sledující dynamiku změn složení orálního mikrobiomu v již ustaveném souboru 20 původně zdravých osob i kontrolní skupiny pacientů s chronickou parodontitidou, bude podrobně zdokumentována transformace „zdravého“ bakteriálního biofilmu na parodontální v průběhu celkem sedmiletého monitorovacího období. Na souboru 60 pacientů s agresivní parodontitidou léčených dvěma různými standartními postupy bude HTS využita pro monitorování orálního mikrobiomu v průběhu vlastní terapie i v následném období. Porovnání výstupů obou experimentů poskytne informaci, zda a jak se liší kompozice subgingiválního biofilmu u chronické a agresivní parodontitidy. Pro uživatelská medicínská pracoviště bude vypracován komplexní metodický postup pro včasnou diagnózu i monitorování průběhu léčby.
- MeSH
- agresivní parodontitida mikrobiologie MeSH
- biofilmy MeSH
- chronická parodontitida mikrobiologie MeSH
- mikrobiota MeSH
- stomatologie MeSH
- ústa mikrobiologie MeSH
- vysoce účinné nukleotidové sekvenování metody MeSH
- Konspekt
- Stomatologie
- NLK Obory
- zubní lékařství
- genetika, lékařská genetika
- bakteriologie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR
Periodontitis, an inflammatory disease caused by subgingival Gram-negative (G-) bacteria, is linked with loss of the connective tissue and destruction of the alveolar bone. In the regulation of inflammatory response, chemokine receptor 2 (CXCR2), a specific receptor for interleukin-8 and neutrophil chemoattractant, plays an important role. The first aim of this study was to investigate the CXCR2 gene variability in chronic periodontitis (CP) patients and healthy nonperiodontitis controls in the Czech population. The second aim was to find a relation between CXCR2 gene variants and the presence of periodontal bacteria. A total of 500 unrelated subjects participated in this case-control study. 329 CP patients and 171 healthy nonperiodontitis controls were analyzed using polymerase chain reaction techniques for three single-nucleotide polymorphisms (SNPs): +785C/T (rs2230054), +1208T/C (rs1126579), and +1440A/G (rs1126580). A DNA microarray detection kit was used for the investigation of the subgingival bacterial colonization, in a subgroup of CP subjects (N = 162). No significant differences in allele, genotype, haplotype, or haplogenotype frequencies of CXCR2 gene variants between patients with CP and healthy controls (P > 0.05) were determined. Nevertheless, Aggregatibacter actinomycetemcomitans was detected more frequently in men positive for the C allele of the CXCR2 +785C/T polymorphism (61.8% vs. 41.1%, P < 0.05; OR = 2.31, 95% CI = 1.03-5.20) and for the T allele of the CXCR2 +1208C/T variant (61.8% vs. 38.9%, P < 0.05; OR = 2.54, 95% CI = 1.13-5.71). In contrast, no statistically significant associations of CXCR2 variants with seven selected periodontal bacteria were found in women. Although none of the investigated SNPs in the CXCR2 gene was associated with CP, the CXCR2 gene variants can be associated with subgingival colonization of G- bacteria in men with CP in the Czech population.
- MeSH
- Aggregatibacter actinomycetemcomitans patogenita MeSH
- alely MeSH
- chronická parodontitida genetika mikrobiologie MeSH
- dospělí MeSH
- genotyp MeSH
- haplotypy genetika MeSH
- jednonukleotidový polymorfismus genetika MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- receptory interleukinu-8B genetika MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
Chronic periodontitis (CP) and diabetes mellitus (DM) involve several aspects of immune functions, including neutrophil activity and cytokine biology. Considering the critical function of chemokine interleukin-8 (IL-8) in the inflammatory process, the aims of this study were to determine: (i) IL-8 plasma levels; (ii) IL-8 (-251A/T, rs4073) and its receptor 2 (CXCR2, +1208C/T, rs1126579) polymorphisms, and (iii) the presence of the selected periodontal bacteria in types 1 and 2 DM patients (T1DM and T2DM) and systemically healthy controls (HC) with known periodontal status. This case⁻control study comprises of 153 unrelated individuals: 36/44 patients suffering from T1DM+CP/T2DM+CP and 32/41 from HC+CP/non-periodontitis HC. Both the clinical and biochemical parameters were monitored. The genotypes were determined using qPCR, IL-8 plasma levels were measured using an ELISA kit. Subgingival bacterial colonization was analyzed with a DNA microarray detection kit. The IL-8 plasma levels differed significantly between non-periodontitis HC and T1DM+CP/T2DM+CP patients (P < 0.01). Even in HC+CP, IL-8 concentrations were significantly lower than in T1DM+CP/T2DM+CP patients (P ≤ 0.05). No significant associations between the IL-8 plasma levels and the studied IL-8 and CXCR2 polymorphisms or the occurrence of selected periodontal bacteria (P > 0.05) were found. CP does not influence the circulating IL-8 levels. Patients with T1DM+CP/T2DM+CP had higher circulating IL-8 levels than HC+CP/non-periodontitis HC.
- MeSH
- biologické markery MeSH
- chronická parodontitida krev genetika mikrobiologie MeSH
- diabetes mellitus 1. typu krev genetika MeSH
- diabetes mellitus 2. typu krev genetika MeSH
- dospělí MeSH
- genetická variace MeSH
- interleukin-8 krev MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Úvod a cíl: Diabetes mellitus (DM) a parodontitida jsou chronická zánětlivá onemocnění s vysokou prevalencí, která mají některé společné znaky a mohou se vzájemně ovlivňovat. Cílem studie bylo posoudit stav chrupu a parodontu u českých pacientů s DM a přispět k poznání rizikových faktorů obou chorob. Metody: Vyšetřili jsme a vzájemně porovnali tři skupiny osob: diabetiky 1. typu (T1DM), diabetiky 2. typu (T2DM) a osoby bez diabetu (kontroly). Účastníky studie jsme vyšetřili klinicky, rentgenologicky a dále jsme se zaměřili na analýzu mikrobiálního složení subgingiválního plaku. Hodnocení výsledků jsme provedli s využitím statistického softwaru IBM SPSS Statistics 23. Výsledky: Do studie jsme zahrnuli celkem 141 osob (32 s T1DM, 51 s T2DM, 58 kontrol) ve věku 35–65 let vyšetřených během let 2010–2015. Zjistili jsme, že stav chrupu a parodontu u diabetiků, a to především u T2DM, byl horší než u kontrol. Tento nález se týkal plak indexu a gingiválního indexu, počtu extrahovaných zubů, přítomnosti zubních náhrad a dalších parametrů hodnotících přítomnost a závažnost parodontitidy. Rozdíly v zastoupení parodontálních patogenů a jejich množství mezi skupinami byly minimální. Pacienti s T2DM a diabetickou nefropatií měli horší stav parodontu; toto se nám nepodařilo prokázat u pacientů s nedostatečně kompenzovaným diabetem, resp. delší dobou trvání choroby. Závěr: U diabetiků lze předpokládat častější výskyt zánětlivých parodontopatií i dalších onemocnění dutiny ústní. Z klinického vyšetření a anamnestických údajů může zubní lékař vyslovit podezření na DM a včasnou léčbou parodontitidy pak přispět ke zlepšení celkového zdravotního stavu pacienta.
Introduction, aim: Diabetes mellitus (DM) and periodontitis are chronic inflammatory diseases with high prevalence. Both conditions possess some common traits and can mutually affect each other. The aim of the study was to investigate the state of teeth and periodontium in Czech diabetic patients and contribute to the identification of genetic risk factors of both diseases. Methods: We examined and mutually compared three groups of subjects: type 1 diabetic patients (T1DM), type 2 diabetic patients (T2DM) and subjects without diabetes mellitus (controls). The subjects included in the study underwent clinical, radiological and further we focused on the analysis of microbiological composition of subgingival plaque. Evaluation of results was performed by statistical software IBM SPSS Statistics 23. Results: The study comprised a total of 141 subjects (32 with T1DM, 51 with T2DM, 58 controls), aged 35–65 years, examined during 2010–2015. We found that the state of teeth and periodontium in diabetic (mainly T2DM) patients was worse than in subjects without diabetes. This finding was confirmed for plaque index and gingival index, number of extracted teeth, the presence of teeth replacement and other parameters evaluating the presence and severity of periodontitis. The differences in the representation of periodontal pathogens and their quantity among the groups were minimal. Patients with T2DM and diabetic nephropathy had worse state of the periodontium; this finding was not proven in patients with insufficiently controlled diabetes or the disease duration. Conclusion: In diabetic patients, a more frequent occurrence of inflammatory periodontal diseases and other diseases of the oral cavity is expected. Based on clinical examination and anamnestic data, the dentist can presume DM, early treatment of periodontal disease contributes to improved general health of the patient.
- MeSH
- chronická parodontitida * diagnostické zobrazování diagnóza mikrobiologie MeSH
- diabetes mellitus 1. typu * komplikace MeSH
- diabetes mellitus 2. typu * komplikace MeSH
- dospělí MeSH
- index orální hygieny MeSH
- indexy plaku MeSH
- kouření škodlivé účinky MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- neparametrická statistika MeSH
- obezita komplikace MeSH
- parodontální index MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- zubní plak mikrobiologie MeSH
- zuby - přehledy zdravotního stavu statistika a číselné údaje MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- klinické zkoušky MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- antiinfekční látky terapeutické užití MeSH
- chronická parodontitida * farmakoterapie mikrobiologie terapie MeSH
- lidé MeSH
- orální hygiena metody MeSH
- parodontální chobot farmakoterapie mikrobiologie terapie MeSH
- parodontální index MeSH
- parodontitida * farmakoterapie mikrobiologie terapie MeSH
- parodontologické ošetření využití MeSH
- probiotika * terapeutické užití MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
Interleukin-17 contributes to the pathogenesis of type 1 diabetes mellitus (T1DM) and chronic periodontitis (CP). We analyzed IL-17A -197A/G and IL-17F +7488C/T polymorphisms in T1DM and CP and determined their associations with IL-17 production and occurrence of periopathogens. Totally 154 controls, 125 T1DM, and 244 CP patients were genotyped using 5' nuclease TaqMan(®) assays. Bacterial colonization was investigated by a DNA-microarray kit. Production of IL-17 after in vitro stimulation of mononuclear cells by mitogens and bacteria was examined by the Luminex system. Although no differences in the allele/genotype frequencies between patients with CP and T1DM + CP were found, the IL-17A -197 A allele increased the risk of T1DM (P < 0.05). Levels of HbA1c were significantly elevated in carriers of the A allele in T1DM patients (P < 0.05). Production of IL-17 by mononuclear cells of CP patients (unstimulated/stimulated by Porphyromonas gingivalis) was associated with IL-17A A allele (P < 0.05). IL-17A polymorphism increased the number of Tannerella forsythia and Treponema denticola in patients with CP and T1DM + CP, respectively (P < 0.05). IL-17A gene variability may influence control of T1DM and the "red complex" bacteria occurrence in patients with CP and T1DM + CP. Our findings demonstrated the functional relevance of the IL-17A polymorphism with higher IL-17 secretion in individuals with A allele.
- MeSH
- alely MeSH
- chronická parodontitida krev genetika mikrobiologie MeSH
- diabetes mellitus 1. typu krev genetika MeSH
- dospělí MeSH
- frekvence genu genetika MeSH
- genotyp MeSH
- interleukin-17 krev genetika MeSH
- jednonukleotidový polymorfismus genetika MeSH
- leukocyty mononukleární metabolismus MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
OBJECTIVE: Inflammatory periodontal diseases may be associated with common systemic conditions and, as recently described, alterations in lipid levels in the blood. The aim of this study was to determine the possible effects of apolipoprotein E (ApoE) genotypes on the lipid levels in healthy people and patients with chronic periodontitis (CP) in relation to periodontopathic bacteria. DESIGN: This case-control study comprised 469 unrelated subjects. The genomic DNA of 294 patients with CP and 175 healthy/non-periodontitis controls were genotyped, using the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) method, for ApoE (rs429358 and rs7412) gene polymorphisms. Subgingival bacterial colonization was investigated by the DNA microarray using a periodontal pathogen detection kit and lipid levels were measured in a subgroup of subjects (N = 275). RESULTS: There was no evidence for a significant association between ApoE gene polymorphisms and CP (P > 0.05). Patients with CP had increased levels of total cholesterol and low-density lipoprotein (LDL) compared to controls (P< 0.05); however, no significant difference was found for triglyceride and high-density lipoprotein (HDL) levels. ApoE gene variability influenced LDL levels marginally (P = 0.08) but it did not modify total cholesterol, triglyceride, and HDL levels or the occurrence of periodontal pathogens in subgingival pockets.(23) CONCLUSIONS: In the Czech population studied, ApoE genetic variations were not associated with susceptibility to CP or the presence of periodontopathic bacteria.
- MeSH
- alely MeSH
- apolipoproteiny E genetika MeSH
- chronická parodontitida genetika mikrobiologie MeSH
- dospělí MeSH
- genotyp MeSH
- jednonukleotidový polymorfismus genetika MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- lipidy krev MeSH
- mikročipová analýza MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Over the last two decades, the amount of evidence corroborating an association between dental plaque bacteria and coronary diseases that develop as a result of atherosclerosis has increased. These findings have brought a new aspect to the etiology of the disease. There are several mechanisms by which dental plaque bacteria may initiate or worsen atherosclerotic processes: activation of innate immunity, bacteremia related to dental treatment, and direct involvement of mediators activated by dental plaque and involvement of cytokines and heat shock proteins from dental plaque bacteria. There are common predisposing factors which influence both periodontitis and atherosclerosis. Both diseases can be initiated in early childhood, although the first symptoms may not appear until adulthood. The formation of lipid stripes has been reported in 10-year-old children and the increased prevalence of obesity in children and adolescents is a risk factor contributing to lipid stripes development. Endothelium damage caused by the formation of lipid stripes in early childhood may lead to bacteria penetrating into blood circulation after oral cavity procedures for children as well as for patients with aggressive and chronic periodontitis.
- MeSH
- ateroskleróza komplikace imunologie mikrobiologie patologie MeSH
- chronická parodontitida komplikace imunologie mikrobiologie patologie MeSH
- cytokiny genetika imunologie MeSH
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- exprese genu MeSH
- koronární nemoc komplikace imunologie mikrobiologie patologie MeSH
- lidé MeSH
- přirozená imunita MeSH
- proteiny teplotního šoku genetika imunologie MeSH
- rizikové faktory MeSH
- zubní plak komplikace imunologie mikrobiologie patologie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
- MeSH
- amoxicilin aplikace a dávkování MeSH
- chlorhexidin terapeutické užití MeSH
- chronická parodontitida * klasifikace mikrobiologie terapie MeSH
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- parodont - debridement metody MeSH
- parodontální chobot klasifikace terapie MeSH
- parodontální index MeSH
- subgingivální kyretáž metody MeSH
- zubní dezinficiencia terapeutické užití MeSH
- zuby - přehledy zdravotního stavu MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
Hlavným cieľom endodontickej terapie je redukcia počtu, resp. úplná eliminácia mikroorganizmov a ich vedľajších produktov z koreňového systému zuba. Napriek tomu, že existuje viacero techník pre mechanickú prípravu a výplach koreňového kanálika, na jeho povrchu často zostáva vrstvička drviva, ktorú je nevyhnutné dôkladne odstrániť vhodnou mechanickou prípravou a výplachom, aby redukcia počtu, prípadne úplná eliminácia mikroorganizmov skutočne nastala. Reziduálne mikroorganizmy koreňového systému zuba sú hlavnou príčinou apikálnych periodontitíd pretrvávajúcich po terapii v nedostatočne, ako aj správne liečených prípadoch. Apikálna periodontitída vzniká ako dôsledok endodontickej infekcie a prejavuje sa ako obranná reakcia hostiteľa na mikroorganizmy prenikajúce zo systému koreňového kanálika zuba do oblasti apikálneho parodontu. Má za následok miestny zápal, resorpciu tvrdých zubných tkanív, deštrukciu ďalších periapikálnych tkanív a možný vznik rôznych histopatologických foriem, zvyčajne označovaných ako periapikálne lézie. Ak je ošetrenie koreňového kanálika realizované správne, zvyčajne nasleduje hojenie periapikálnej lézie spojené s kostnou regeneráciou. V určitých prípadoch však apikálna periodontitída po liečbe stále pretrváva, čo je stav zvyčajne označovaný ako neúspech endodontickej terapie. Vo všeobecnosti je potvrdené, že táto tzv. postterapeutická apikálna periodontitída nastáva vtedy, ak endodontická terapia nedostatočne eliminovala infekciu. V klinickej praxi však vždy nie je jednoduché kompletné odstránenie mikroorganizmov, a to kvôli anatomickým komplikáciám koreňových kanálikov s vyplývajúcimi obmedzeniami pre prístup koreňových nástrojov a výplachových roztokov. Na dezinfekciu systému koreňového kanálika sa odporúča použiť vhodný antimikrobiálny liečivý postup. Pri endodontickej terapii, ktorá sa skončila neúspechom, sa z koreňových kanálikov bežne izoluje Candida albicans a Enterococcus faecalis. Preto sa pri skúmaní účinnosti rôznych antimikrobiálnych prostriedkov používaných pri endodontickom ošetrení sleduje 100 % inhibícia práve ich rastu. Cieľom tohto článku je zhodnotiť antimikrobiálny účinok vnútrokanálových liečiv a význam vyplachovania koreňových kanálikov pri endodontickej terapii devitálnych zubov.
The primary goal of endodontic therapy is the reduction or elimination of microorganisms and their by-products from the root canal system. Although a number of instrumentation and irrigation techniques exist, debris is often left behind in the root canal system and proper canal cleaning, shaping, and irrigation are needed to reduce significantly or sometimes even eliminate microorganisms from the canals. Residual microbes in the root canal system are the primary cause of post-treatment apical periodontitis that may persist in both poorly and properly treated cases. Apical periodontitis is a sequel to endodontic infection and manifests itself as the host defense response to microbial challenge emanating from the root canal system to the periapical tissue. It results in local inflammation, resorption of hard tissues, destruction of other periapical tissues, and eventual formation of various histopathological categories of apical periodontitis, commonly referred to as periapical lesions. When the root canal treatment is carried out properly, healing of the periapical lesion usually follows, with bone regeneration. In certain cases, post-treatment apical periodontitis still persists, the condition being commonly referred to as endodontic failure. It is widely acknowledged that such post-treatment apical periodontitis occurs when root canal treatment has not adequately controlled and eliminated the infection. However, complete elimination of microorganisms is not always achieved in clinical practice due to the anatomical complexities of root canals and consequent limitations in access by instruments and irrigants. The use of antimicrobial medication has been advocated to disinfect the root canal system. The recovery of Candida albicans and Enterococcus faecalis is common after failed root canal treatment. Therefore, when testing different antimicrobial agents for efficacy in endodontic treatment, 100% inhibition of the growth of the two microorganisms is required. The purpose of this article is to assess the antimicrobial action of intracanal medicaments and relevance of the root canal irrigation in endodontic therapy of devitalized teeth.
- Klíčová slova
- endodontická terapie, výplach kořenového kanálku, octenidin,
- MeSH
- antiinfekční látky lokální terapeutické užití MeSH
- chlorhexidin terapeutické užití MeSH
- chlornan sodný aplikace a dávkování škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- chronická parodontitida komplikace mikrobiologie patofyziologie MeSH
- EDTA terapeutické užití MeSH
- Enterococcus faecalis patogenita MeSH
- lidé MeSH
- obturace kořenového kanálku metody MeSH
- prostředky na výplach kořenových kanálků * aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- pyridiny terapeutické užití MeSH
- terapie kořenového kanálku * metody MeSH
- zubní kořen mikrobiologie patologie MeSH
- zuby neživé * komplikace mikrobiologie terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH