Using mainly electrophoretic and immunochemical methods, interactions of protein p53 (and its homologues) with damaged DNA will be studied. Our efforts will be focused mainly on the effects of anticancer drugs. We will study the roles of individual protein domains in DNA damage recognition, the effects of the protein oligomerization state, mutations, and the abilities of latent and active p53 to bind selectively to damaged DNA will be compared. The ability of the protein to recognize certain (specific)kinds of DNA lesions will be also investigated. We expect that the results will be utilized in future drug designing and development of novel therapeutic procedures. New experimental approaches will be introduced, including quartz crystal microbalance and chemical probing of DNA, proteins and their complexes combined with electrochemical analysis.

Pomocí především elektroforetických a imunochemických metod budou studovány interakce proteinu p53 a jeho homologů s poškozenou DNA, s důrazem na vliv látek, které jsou využívány jako protinádorová léčiva. Bude zkoumána úloha jednotlivých domén proteinupři rozpoznání poškození DNA, vliv jeho oligomerizačního stavu a mutací a srovnána schopnost selektivně vázat poškozenou DNA u aktivní a latentní p53. Dále bude zkoumána schopnost p53 rozeznat určité typy poškození DNA. Očekáváme, že výsledky budou v budoucnosti využity při navrhování nových léčiv a léčebných postupů. Nové experimentální přístupy budou zavedeny a testovány, včetně krystalových křemenných mikrovah a chemických sond pro DNA, proteiny a jejich komplexy, kombinované s elektrochemickou analýzou.

• MeSH
• adukty DNA MeSH
• DNA analýza   chemie   MeSH
• elektrochemie metody   MeSH
• elektroforéza metody   MeSH
• imunochemie metody   MeSH
• imunohistochemie MeSH
• karcinogeny MeSH
• nádorový supresorový protein p53 MeSH
• poškození DNA MeSH
• protinádorové látky farmakologie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• biochemie
• farmacie a farmakologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Alzheimer disease (AD) is one of the most common disorders of elderly. Treatment options for AD especially in later stages are rather limited. Therefore, there is an increasing effort to find new highly specific biomarkers of AD sensitive especially in early stages of the disease. Previously, we evaluated new biomarkers of AD (complexes of amyloid beta peptides and some intracellular proteins) in cerebrospinal fluid. Here, we plan to develop more sensitive methods (ELISA, SPR biosensor) and to detect complexes of oligomeric amyloid or of amyloid beta 1-42 with intracellular binding targets (protein tau, mitochondrial enzymes 17beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 10 and cyclophilin D). Values of the new biomarkers will be compared with the current biomarkers (amyloid beta 1-42, tau and phospho-tau) and with the degree of cognitive impairment. New biomarkers are expected to improve an ability to discriminate either AD from other types of dementia either mild cognitive impairment due to AD from that caused by other ethiology.

Alzheimerova demence (AD) je jedním z nejběžnějších typů onemocnění ve vysokém věku. Léčení AD je omezené zejména v pozdějších stádiích onemocnění. Sílí proto úsilí nalézt nové specifické biomarkery AD, které budou senzitivní zejména k časným stádiím nemoci. Během předchozího výzkumu jsme testovali nové biomarkery AD (komplexy amyloidu beta a některých intracelulárních proteinů) v likvoru. V tomto projektu plánujeme vyvinout nové více senzitivní metody (ELISA, SPR senzor) k detekci komplexů oligomerniho amyloidu beta nebo amyloidu beta 1-42 s intracelulárními vazebnými partnery (protein tau, mitochondriální enzymy 17beta-hydroxysteroidová dehydrogenáza typu 10 a cyklofilin D). Hladiny nových biomarkerů budou srovnány s běžnými biomarkery (amyloid beta 1-42, tau a fosfo-tau) i se stupněm kognitivního poškození. Očekáváme, že nové biomarkery pomohou zlepšit jednak rozlišení AD od jiných typů demencí jednak mírné kognitivní poškození způsobené AD od poškození způsobeného jinými příčinami.

• MeSH
• Alzheimerova nemoc diagnóza   MeSH
• amyloidní beta-protein analýza   MeSH
• biologické markery analýza   MeSH
• lidé MeSH
• mozkomíšní mok MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR