V tomto úvodním článku pro ostatní metodiky využívané na našem pracovišti při studiu mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií jsme se zaměřili na postupy vlastního zpracování biologického materiálu, principy separace buněk a nastavené algoritmy dalších postupů. Běžně používaná metodika magnetické separace buněk MACS je vhodná pouze pro vzorky se vstupní infiltrací plazmatickými buňkami > 5 %. Pro nízce zastoupené populace buněk pak využíváme výhradně metodu fluorescencí aktivované separace FACS. Izolované plazmatické buňky jsou dále využívány pro molekulárně biologické studie, pro cytogenetická vyšetření a k proteinovým analýzám. Dále se v této práci zmiňujeme o úskalích, která souvisejí s výzkumem mnohočetného myelomu, některá z nich již umíme překonat, s jinými se zatím neúspěšně potýkáme.
In this paper, initial processing of biological material, cell separation algorithms and other procedures are discussed. For samples with initial infiltration of plasma cells > 5%, CD138 MicroBeads and Auto-Magnetic-Activated Cell Sorting program are used. Fluorescence-Activated Cell Sorting is used exclusively for cell populations with low-abundance; these samples are detected using fluorescently labeled antibodies only. Isolated plasma cells are further processed for molecular biological studies, for cytogenetics and protein analyses. Furthermore, this work examines the pitfalls of research related to multiple myeloma; some of them we have overcome, while the others are still problematic.
- Klíčová slova
- CD138, monoklonální gamapatie,
- MeSH
- banky biologického materiálu MeSH
- biomedicínský výzkum MeSH
- financování organizované MeSH
- kostní dřeň patologie MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza MeSH
- odběr biologického vzorku MeSH
- plazmatické buňky imunologie klasifikace MeSH
- průtoková cytometrie metody MeSH
- separace buněk MeSH
- syndekan-1 analýza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Základní metodou pro studium exprese proteinů je kombinace dvourozměrné elektroforézy s hmotnostní spektrometrií. Pro analýzu proteomu u pacientů s mnohočetným myelomem je možno využít plazmatické buňky či plazmu pacientů před léčbou, po léčbě a v průběhu onemocnění, což umožní monitorování léčebných odpovědí a možnost objevení nových biomarkerů zodpovědných za rezistenci či senzitivitu k podávanému léčivu.
Two-dimensional gel electrophoresis combined with mass spectrometry has become a fundamental technique for the study of protein expression. Proteomic analysis of plasma cells or plasmatic proteins can be done before and after treatment. Proteomics offers the possibility of identifi cation of disease-associated protein markers for prognostic evaluation and for the selection of targets for specific drug therapy.
- MeSH
- 2D gelová elektroforéza metody MeSH
- exprese genu MeSH
- hmotnostní spektrometrie MeSH
- krevní plazma cytologie MeSH
- laboratoře MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom * genetika MeSH
- postup MeSH
- proteiny analýza MeSH
- proteomika * metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Dokonalé poznání klíčových molekul signálních drah je atraktivní strategií pro vývoj a volbu nových mnohem efektivnějších léků. Tato práce se zaměřuje na využití proteomických metod při studiu mnohočetného myelomu a předkládá stručný přehled doposud publikovaných zahraničních prací zaměřených na toto téma.
Comprehensive knowledge of signaling pathways in cancer should lead to the development of novel and more effective treatment strategies. This review focuses on applications of proteomics in multiple myeloma and includes a brief literature survey of this topic.
- MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom * genetika patofyziologie MeSH
- molekulární biologie MeSH
- proteiny analýza MeSH
- proteomika * metody MeSH
- signální transdukce MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- antracykliny škodlivé účinky toxicita MeSH
- daunomycin škodlivé účinky toxicita MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- financování organizované MeSH
- kardiomyopatie enzymologie chemicky indukované MeSH
- králíci MeSH
- matrixové metaloproteinasy MeSH
- modely u zvířat MeSH
- remodelace komor MeSH
- tkáňové inhibitory metaloproteinas MeSH
- Check Tag
- králíci MeSH
The aim of this study was to analyze the ECG time intervals in the course of the development of chronic anthracycline cardiomyopathy in rabbits. Furthermore, this approach was employed to study the effects of a model cardioprotective drug (dexrazoxane) and two novel iron chelating compounds - salicylaldehyde isonicotinoyl hydrazone (SIH) and pyridoxal 2-chlorobenzoyl hydrazone (o-108). Repeated daunorubicin administration induced a significant and progressive prolongation of the QRS complex commencing with the 8th week of administration. At the end of the study, we identified a significant correlation between QRS duration and the contractility index dP/dtmax (r = -0.81; P<0.001) as well as with the plasma concentrations of cardiac troponin T (r = 0.78; P<0.001). In contrast, no alterations in ECG time intervals were revealed in the groups co-treated with either dexrazoxane or both novel cardioprotective drugs (SIH, o- 108). Hence, in this study, the QRS duration is for the first time shown as a parameter suitable for the non-invasive evaluation of the anthracycline cardiotoxicity and cardioprotective effects of both well established and investigated drugs. Moreover, our results strongly suggest that novel iron chelators (SIH and o-108) merit further study as promising cardioprotective drugs against anthracycline cardiotoxicity.
- MeSH
- antracykliny škodlivé účinky terapeutické užití toxicita MeSH
- chelátory železa terapeutické užití MeSH
- daunomycin škodlivé účinky terapeutické užití toxicita MeSH
- elektrokardiografie využití MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- kardiomyopatie farmakoterapie komplikace prevence a kontrola MeSH
- králíci MeSH
- razoxan škodlivé účinky terapeutické užití toxicita MeSH
- troponin MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- králíci MeSH
- zvířata MeSH
