Anti DFS70 protilátky byly v minulosti dle International Consensus on ANA Patterns (ICAP) zařazeny do testovacího algoritmu pro pacienty s podezřením na systémové autoimunitní revmatické onemocnění pojivové tkáně (SARD). Při použití metody nepřímé imunofluorescence vykazují anti DFS70 protilátky obraz jemně zrnitého jádra s pozitivní chromatinovou destičkou (dle ICAP AC-02). Jejich význam je i nadále studován. Z dosavadních poznatků vyplývá jejich zvýšený výskyt u zdánlivě zdravých jedinců a jedinců s různými zánětlivými onemocněními, a mohlo by se tedy jednat o významný faktor pro vyloučení SARD.Vyšetření metodou nepřímé imunofluorescence má nesporně mnoho výhod v rutinní diagnostice. Jedná se o citlivou metodu pro detekci většiny klinicky relevantních orgánově nespecifických autoprotilátek. Některé diagnosticky významné autoprotilátky mohou být určeny pomocí této metody bez potřeby další specifické analýzy. Jiné je vhodné konfirmovat specifickými metodami. Mezi tyto autoprotilátky patří také anti DFS70, které jsou převážně IgG izotypu. Cílem naší práce bylo porovnání některých konfirmačních metod pro vyšetření anti DFS70 protilátek. Sledovali jsme také výskyt těchto protilátek v našem souboru pacientů s indikací k vyšetření ANA protilátek metodou imunoblot a jejich závislost na věku a pohlaví.

Anti-DFS70 antibodies have been included, by the International Consensus on ANA Patterns (ICAP), in a testing algorithm for patients suspected of systemic autoimmune rheumatic disease (SARD). When using an indirect immunofluorescence test, the anti-DFS70 antibodies show dense fine speckled type of fluorescence in the nucleoplasm with the strong chromosome staining of metaphase cells (AC-02 by ICAP). The studies of their role are still being carried out. Present knowledge shows increased appearance of the antibodies in ostensibly healthy individuals and individuals with various inflammatory diseases so it could be a significant factor for excluding SARD. There are undoubtedly many advantages of the ANA IIF examination in routine diagnosis. It is a sensitive method for detection of most organ non-specified autoantibodies which are clinically relevant. Some of the diagnostically relevant autoantibodies may be determined by the ANA IIF with no additional requirement of a specific analysis. Confirmation by additional specific methods is appropriate for other autoantibodies like anti-DFS70 which consist mostly of IgG izotype. The goal of this study was to compare some of the confirmation methods for examination of anti-DFS70 antibodies. We have also monitored the appearance of these antibodies in patients indicated for the ANA testing by immunobloting and their dependence on age and sex.

• MeSH
• adaptorové proteiny signální transdukční imunologie   MeSH
• antinukleární protilátky * analýza   krev   MeSH
• fluorescenční protilátková technika nepřímá normy   statistika a číselné údaje   MeSH
• imunoblotting * normy   statistika a číselné údaje   MeSH
• lidé MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• revmatické nemoci diagnóza   krev   MeSH
• transkripční faktory imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• klinické zkoušky MeSH

Cíl práce: Zjistit prevalenci protilátek proti viru hepatitidy E (HEV) v populaci České republiky ve věku od 15 do 64 let a provést analýzu podle věku a pohlaví a zhodnotit přínos imunoblotového testu pro ověření specificity základního screeningového EIA testu. Materiál a metody: Pro studii byla využita séra z mnohoúčelového sérologického přehledu z roku 2001. K vyšetření anti-HEV IgG byl použit test enzymové imunoanalýzy (EIA) RecomWell HEV IgG (Mikrogen Diagnostik, SRN). Následné konfirmační vyšetření bylo provedeno imunoblotovým testem RecomLine HEV IgG/IgM (Mikrogen Diagnostik, SRN). Výsledky: EIA testem RecomWell IgG bylo vyšetřeno celkem 1715 sér a reaktivita anti-HEV IgG byla zjištěna u celkem 115 vzorků (6,7 %). U mužů bylo zjištěno 58 reaktivních sér (6,7 %) a u žen 57 (6,6 %). Prevalence anti-HEV IgG s věkem stoupá z hodnoty 3,5 % ve věkové skupině 15–24letých na 16,8 % ve skupině 55–64letých. Závěry: Na základě sérologického přehledu byla zjištěna séroprevalence protilátek proti viru hepatitidy E v České republice ve věkové skupině 15–64 let. Celková séroprevalence v přehledu činila 6,7 %, přepočtená na počet osob v ČR pak 8,6 %. Prevalence anti-HEV stoupá s věkem s maximem 16,8 % ve věkové skupině 55–64 let. Nebyl zjištěn rozdíl v prevalenci podle pohlaví. Použití imunoblotového testu RecomLine IgG pro ověření výsledků vyšetření protilátek anti-HEV třídy IgG v séroprevalenční studii nelze jednoznačně hodnotit jako přínosné.

Aim: To determine the prevalence of antibodies against hepatitis E virus in the general population of the Czech Republic of age 15 to 64, to analyse the age and sex distribution of these antibodies, and to evaluate the benefit of the immunoblot test for the confirmation of the specificity of the enzyme immunoassay (EIA) screening test. Material and methods: Sera from the last available multipurpose serological survey conducted in 2001 were tested. Anti-HEV IgG was detected by the RecomWell HEV IgG EIA test (Mikrogen Diagnostik, Germany). The immunoblot assay RecomLine HEV IgG/IgM (Mikrogen Diagnostik, Germany) was used for confirmation. Results: Using the RecomWell IgG EIA test, anti-HEV IgG reactivity was found in 115 (6.7%) of 1715 sera. No significant difference in the anti-HEV IgG reactivity was found between men 58 (6.9%) and women 57 (6.6%). The prevalence of anti-HEV IgG increased with age from 3.5% in the age group 15–24 years to 16.8% in 55-64-year-olds. Conclusions: The prevalence of hepatitis E IgG antibodies determined in the serological survey in the age group 15–64 years was 6.7%. Recalculated for the general population of the Czech Republic, the prevalence was 8.6%. The prevalence of anti-HEV antibodies increased with age, reaching a peak of 16.8% in the age group 55–64 years. The prevalence was not significantly different between men and women. Using the immunoblot RecomLine IgG test for the confirmation of the specificity of the screening test in the seroprevalence study was not of clear benefit.

• MeSH
• dospělí MeSH
• epidemiologické studie MeSH
• hepatitida - protilátky MeSH
• hepatitida E epidemiologie   MeSH
• imunoanalýza metody   statistika a číselné údaje   využití   MeSH
• imunoblotting * metody   statistika a číselné údaje   využití   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• prevalence * MeSH
• protilátky virové * krev   MeSH
• virus hepatitidy E * MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH

• MeSH
• biologické markery analýza   krev   MeSH
• imunoblotting statistika a číselné údaje   MeSH
• lidé MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• sérologické testy metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• testování odbornosti laboratoří * MeSH
• virus Epsteinův-Barrové * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• tabulky MeSH

Dot-blot is one of biological methods that are normally used in research laboratories and especially in the diagnostics. It is the most commonly used method for identification and immunodetection of particular proteins which may be markers of various diseases. The main aim of the experiment was to develop a simple, inexpensive and rapid method for specific detection of nucleic acids, especially DNA, and then this procedure apply to the detection of DNA modified by platinum cytostatic drugs. Despite platinum cytostatic drugs‘ common use in chemotherapy of various cancer types, their biochemical effect is still not completely clear. The generally accepted opinion is that the drug binds to cellular DNA. It was observed that cisplatin is bound to the DNA the most compared to oxaliplatin and carboplatin.

• Klíčová slova
• oxaliplatina,
• MeSH
• cisplatina MeSH
• DNA * imunologie   účinky léků   MeSH
• imunoblotting * metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• karboplatina MeSH
• organoplatinové sloučeniny MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• protilátky MeSH
• protinádorové látky * MeSH
• Publikační typ
• hodnotící studie MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Heat shock proteins (HSPs) can be induced by various stresses and play an important role in cell cycle progression. HSP70 has been shown to act as an inhibitor of apoptosis. We studied HSP70 expression in bronchial epithelial cells of C57BL/6 mice and homozygous HPS70 knockout mice (hsp70.1–/–) exposed to chronic hypoxic stress. We also investigated changes in cellular proliferation and apoptosis in relation to HSP70. Lungs were removed from mice after a three-week period of exposure to 10 % O2. Immunoblots for HSP70 and immunohistochemical staining for HSP70 and Ki-67 were performed. Apoptosis was assessed using the TUNEL assay. The three-week period of hypoxic stress did not change HSP70 levels in total lung tissue, but a significant reduction in HSP70 expression was observed in bronchiolar epithelial cells. In wild type mice, both HSP70 and Ki-67 expression were significantly reduced in bronchiolar epithelial cells. In homozygous HPS70 knockout mice (hsp70.1–/–), apoptosis of bronchiolar epithelial cells was significantly increased. Our results suggest that HSP70 may exert anti-apoptotic effects in mouse bronchiolar epithelial cells.

• MeSH
• apoptóza genetika   účinky léků   MeSH
• epitelové buňky cytologie   chemie   MeSH
• hypoxie buňky fyziologie   imunologie   MeSH
• imunoblotting metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• proliferace buněk MeSH
• proteiny tepelného šoku HSC70 chemie   MeSH
• proteiny tepelného šoku HSP70 fyziologie   chemie   MeSH
• respirační sliznice cytologie   patofyziologie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH

V naší práci jsme sledovali změny specifických protilátek u pacientů léčených specifickou imunoterapií (SAIT), kteří měli prokázanou přecitlivělost na včelí jed. K vyšetření specifických protilátek jsme požívali metodu CAP a imunoblot. Po třech letech léčby jsme provedli vyšetření uvolnění leukotrienů in vitro CAST a srovnávali jeho výsledky se změnami hladin specifických protilátek IgM,IgG,IgG4. V průběhu léčby. U většiny pacientů od počátku léčby stoupaly hladiny specifických IgG4. Většina pacientů s negativním CAST vykazovala změnu poměru spec. IgE : spec. IgG4 ve prospěch IgG4. Dále jsme sledovali změny spektra specifických protilátek proti jednotlivým složkám včelího jedu. U pacientů docházelo většinou k rozšírení spektra v IgG4, ale u části došlo k rozšírení i v IgE. Domníváme se, že vyšetřování specifických protilátek během SAIT je důležité k posouzení efektu léčby.

The changes in levels of specific antibodies were described in the patients with specific immunotherapy (SAIT) by honeybee venom. We investigated the specific IgE, IgG, IgG4 by means CAP system and immunoblot. The test of leukotriene-release CAST was performend after the third year of SAIT. We compared the results of CAST and the changes in levels of specific antibodies. In the most of the patients the levels of specific IgG4 were increased continuously during the immunotherapy. In the group with negative CAST the ratio spec. IgE : spec. IgG4 was changed pro IgG4 in the most of this patients. We described also changes of the spectrum of specific antibodies in the course of SAIT. In the most patients we found new antibodies in IgG4, but in some of them also in specifis IgE. We supposed to be important to observed the changes of the levels of specific antihbodies during SAIT in relation to the clinical efficacy.

• Klíčová slova
• Alutard, Sevapharma,
• MeSH
• alergie diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunoblotting metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• imunoglobulin E krev   MeSH
• imunoglobulin G krev   MeSH
• imunoterapie metody   MeSH
• lidé MeSH
• přehledová literatura jako téma MeSH
• příznaky a symptomy MeSH
• specificita protilátek účinky léků   MeSH
• včelí jedy aplikace a dávkování   imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH