In this study, we tested a method for long-term storage of oral mucosal epithelial cells (OMECs) so that the cells could be expanded in vitro after cryopreservation and used for the treatment of bilateral limbal stem cell deficiency. The ability of suspended primary OMECs to proliferate in vitro after cryopreservation was compared to that of OMEC cultures that had undergone the same process. Both were preserved in standard complex medium (COM) with or without cryoprotective agents (CPAs) (gly-cerol at 5 % or 10 % or dimethyl sulphoxide at 10 %). We found that after cryopreservation, primary OMECs could form a confluent cell sheet only in a few samples after 22 ± 2.9 (mean ± SD) days of cultivation with 72.4 % ± 12.9 % overall viability. Instead, all ex vivo OMEC cultures could re-expand after cryopreservation with a comparable viability of 78.6 ± 13.8 %, like primary OMECs, but with significantly faster growth rate (adj. P < 001), forming a confluent cell sheet at 13.7 ± 3.9 days. Gene expression analyses of the ex vivo expansion of OMEC cultures showed that the stemness, proliferation and differentiation-related gene expression was similar before and after cryopreservation, except for KRT13 expres-sion, which significantly decreased after the second passage (adj. P < 0.05). The addition of CPAs had no effect on these outcomes. In conclusion, the optimal strategy for OMEC preservation is to freeze the cells that have been previously cultured, in order to maintain cell viability and the capacity to create a sizable graft even without CPAs.

• MeSH
• buněčná diferenciace účinky léků   MeSH
• časové faktory MeSH
• epitelové buňky * účinky léků   cytologie   metabolismus   MeSH
• kmenové buňky * účinky léků   cytologie   metabolismus   MeSH
• kryoprezervace * metody   MeSH
• kryoprotektivní látky * farmakologie   MeSH
• kultivované buňky MeSH
• lidé MeSH
• proliferace buněk * účinky léků   MeSH
• regulace genové exprese účinky léků   MeSH
• ústní sliznice * cytologie   účinky léků   MeSH
• viabilita buněk účinky léků   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Cíl: Seznámit s problematikou karcinomu z Merkelových buněk (MCC) při postižení víčka a s jeho chirurgickým řešením. Vlastní sestava: MCC horního víčka vpravo byl na Oční Klinice FN Královské Vinohrady poprvé zastižen v roce 1998 u 78leté ženy. Následující dvojí pozorování MCC na horním víčku vlevo u dvou žen ve věku 48 a 67 let bylo zaznamenáno v rámci retrospektivní studie. Histologicky bylo vyšetřeno 1033 operovaných nádorů víček v letech 2007 až 2015, z toho 47,5% bylo benigních a 52,5 % maligních. Nejčastější z maligních procesů byl bazaliom v 77,3 % a dlaždicobuněčný karcinom v 15,7 %. Výsledky: Nejstarší pacientka s MCC zemřela po třech letech na kardiopulmonální selhání. 48-letá pacientka (věk diagnózy MCC) byla po dobu sledování pěti let bez recidivy či prokázaných metastáz. Onkologický počáteční staging byl negativní. Následovalo ultrazvukové vyšetření lymfatických uzlin krku každého půl roku. Další 67-letá pacientka (věk diagnózy MCC) byla sledována 2,5 roku. Bylo vysloveno podezření na metastatický proces ve stejnostranné slinné žláze a v plicích, proto následovala chemoterapie. Definitivně tento proces nebyl potvrzen, dále pokračoval jen onkologický follow up bez lokální recidivy či rozsevu. Závěr: Autoři potvrdili vzácný výskyt MCC, a to jen v 0,37 % mezi maligními nádory víček. Zásadní význam pro úspěšnou léčbu představuje dostatečně radikální výkon potvrzený histologickou verifikací a současně je nezbytná následná plastika víčka.

Aim: To get acquainted with the issues of Merkel cell carcinoma (MCC) when the eyelid is affected and with its surgical solution. Materials: MCC of the right upper eyelid was at the Department of Ophthalmology in the Faculty Hospital Královské Vinohrady in Prague (Czech Republic, EU) in 1998 woman 78 year. Another cases of the MCC on the left upper eyelid were observed in two women aged 48 and 67 years and they were pick up in a retrospective study covered 1033 operated tumors eyelids years 2007 – 2015. 47,5% of operated tumors were benign and 52,5% malignant. Most common malignant processes were basal cell carcinoma in 77,3% and squamous cell carcinoma at 15,7%. Results: The oldest patient died after three years of cardiopulmonary failure. 48 year old patient (age of diagnosis MCC) has been monitoring for five years without proven recurrence or metastasis dissemination. Oncological initial staging was negative regarding. An ultrasound examination of the lymphatic system of the neck was followed every six months. Another 67 year old patient (age of diagnosis MCC) was followed for 2,5 years. There was a suspicion of a metastatic process in the same side salivary gland and lungs, therefore chemotherapy was performed. Definitely, this process has not been proven. Now there is continuing follow up without sings of local recurrence or metastatic dissemination. Conclusion: The authors confirmed a rare occurrence of MCC, and only 0,37% among malignant eyelids tumors. Essential importance for successful treatment is a sufficiently radical excision supported by histological verification and a subsequent plastic surgery of the eyelid is also necessary.

• MeSH
• histologické techniky metody   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• lymfatické uzliny diagnostické zobrazování   MeSH
• Merkelův nádor * diagnóza   terapie   MeSH
• nádory očního víčka * diagnóza   chirurgie   MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• senioři MeSH
• ultrasonografie metody   MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• MeSH
• arteria pulmonalis MeSH
• bronchiektazie MeSH
• geriatrie MeSH
• nemoci cév MeSH
• patologie MeSH
• plicní hypertenze MeSH
• srdeční selhání MeSH