^^^svazků ; 21-22 cm
- MeSH
- DNA MeSH
- genetické nemoci vrozené MeSH
- molekulární patologie MeSH
- onkogeny MeSH
- Publikační typ
- abstrakty MeSH
- kongresy MeSH
- sborníky MeSH
- Konspekt
- Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
- NLK Obory
- genetika, lékařská genetika
Metylace DNA je vedle acetylace histonových proteinů jedním ze dvou globálních mechanizmů, kterým je řízena genová exprese. Profily metylace DNA se během vývoje organizmu i v průběhu nádorového onemocnění mění. V nádorových buňkách jsou pozorovány tři změny profilů metylace DNA: hypometylace, hypermetylace a ztráta imprintingu. Metylaci DNA lze považovat vedle intragenové mutace a ztráty heterozygozity za třetí cestu inaktivace tumor-supresorových genů v genezi nádorového onemocnění. V předkládaném přehledném článku popisujeme nedávné poznatky a hypotézy o úloze metylace DNA při vzniku nádorového onemocnění a uvádíme možné aplikace v diagnostice a terapii nádorových onemocnění.
DNA methylation and acetylation of histone proteins represent two global mechanisms controlling the gene expression. DNA methylation profiles alter during the development of the organism and during progression of neoplasia. Three types of alterations of the DNA methylation profiles were observed in the tumor cells: hypo- methylation, hypermethylation and the loss of imprinting. Beside the intra-gene mutation and the heterozygosity absence, DNA methylation can be understood as the third mechanism of tumor-suppressor gene inactivation in the genesis of neoplasia. Our review article brings recent findings and hypotheses on the role of DNA methylation in the carcinogenesis and its possible application in the diagnostics and therapy of the malignant proliferation.
Friedreichova ataxie (FA) je autosomálně recesivní neurodegenerativní onemocnění. Je nejčastější hereditární ataxií. Frekvence jejího výskytu se odhadiye na 1:50 000 - 100 000. V 98 % je příčinou FA dynamická mutace v genu X25. Spočívá v amplifikaci GAA tripletu uvnitř prvního intronu tohoto genu na 9. chromozomu. Gen kóduje protein frataxin s neznámou funkcí. V této práci je použita metoda PCR k detekci amplifikovaného úseku GAA tripletu pomocí primerů GAAF/GAAR a Bam/2500F se separací V agarozovém gelu. Radioaktivní modifikace PCR pomocí primerů GAAF/GAAR a následná separace v denaturačním polyakrylamidovém gelu se osvědčila při ehminaci heteroduplexů a při zintenzívnení signálu amplifikovaných alel u heterozygotů. Ze 16 vyšetřených probandů s klinickou diagnózou FA se n 7 tato diagnóza potvrdila. Analýza rodin pacientů našla 22 přenašečů. Tato práce předkládá laboratorní metodu potvrzující Friedreichovou ataxii na úrovni DNA. Objevení genu X25 a molekulárně řenetická diagnostika je velkým přínosem pro neurologii a khnickou genetiku, neboť umožňuje sestavit spoiehhvě podloženou klasifikaci tohoto typu ataxie, následnou genetickou prevenci v rodinách probandu a případné přehodnocení klinických výsledků.
Friedreich's ataxia (FA) is an autosomal recessive neurodegenerative disease with an estimated prevalence of 1:50 000 -100 000. The corresponding gene (X25) is mapped on chromosome 9ql3 encoding ä 210-amino acid protein, named frataxin, with unknown fimction. In 98 % of FA patients a dynamic mutation is foimd. The mutation is characterized by amplification of GAA triplet repeats within intron 1 of X25 gene. We used the PCR method for detection of the amplified GAA region in 16 patients with the chnical diagnosis of FA. For visuahsation of amphfied repeats we used agarose gel and for radioactive labeled products denatiu-ating PAGE. From 16 patients we detected amplifications of GAA trinucleotides in 7 probands. Twenty-two healthy carriers were found in their famihes. There were from 400 to 900 GAA trinucleotides. In one case an equal number of 447 amplified sequences was detected on both alleles. In all families the number of amplified GAA repeats, through the pedigree, was stable in length. Identification of X25 gene and molecular genetic diagnosis of this disorder is a marked contribution to the neurology and cUnical genetics. It offers the real possibility of classification of this type of ataxia and the subsequent genetic counselhng, possibly reevaluation of chnical results.
Krátká úvaha o povaze DNA jako biologickém materiálu zvláštního postavení vychází z autorovy zkušenosti s izolacemi, uchováváním, analýzou a interpretací laboratorních výsledků základní informační molekuly. Text se dotýká charakteru informace obsažené v DNA a také, kdo a jak s touto informací zachází. Jednotlivá stanoviska jsou konfrontována s etickým kodexem práva pacientů.
The reasoning on DNA as a biological sample of the particular status is based on the author's experience with DNA isolation, analysis and interpretation of genotyping results. The author discusses the nature of the information contained in DNA molecule, he specifies who uses this information and in what way the information is or should be used. The different standpoints concerning the ethical codex of patient's rights versus DNA handling are stressed.
293 s. : il.
- Klíčová slova
- DNA,
- MeSH
- rekombinantní DNA MeSH
- NLK Obory
- genetika, lékařská genetika
- přírodní vědy
- MeSH
- DNA vakcíny aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- imunizace metody MeSH
- imunologická odpověď na dávku MeSH
- injekce intramuskulární metody MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- nádory imunologie MeSH
- plazmidy fyziologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- srovnávací studie MeSH
Východisko. Friedreichova ataxie je autozomálně recesivní neurodegenerativní onemocnění s incidencí 1 - 2 : 100 000. V 95 % případů je příčinou Friedreichovy ataxie expanze GAA tripletu uvnitř prvního intronu genu X25 lokalizovaného na 9q. Cílem práce bylo zavést jednoduchou a spolehlivou DNA diagnostickou metodu, která by pomohla při specifikaci spinocerebelárních ataxií. Metody a výsledky. Naše diagnostika je založena na rozlišení normální a mutované alely genu X25 pomocí PCR a následné elektroforézy v agarózovém gelu. U normální alely dosahuje velikost PCR produktu v našem případě 521 - 614 bp, což odpovídá 7 - 38 GAA tripletům v alele. Naproti tomu v případě mutantních alel s 200 až 1200 GAA triplety je délka produktu až 4100 bp. Po zavedení metody bylo analyzováno 12 vyšetřovaných, z nichž 4 byli diagnostikováni jako pozitivní pro Friedreichovu ataxii. Závěry. Podařilo se zavést rychlou, neradioaktivní, spolehlivou DNA diagnostickou metodu. Jejím přínosem je možnost rozpoznání přenašečů, což dovoluje provádět skríningová vyšetření rizikových rodin.
Background. Friedreich's ataxia is an autosomal recessive, neurodegenerative disease with a prevalence of 1 - 2 : 100 000. Ninety five % of cases are caused by Friedreich's ataxia expansion of GAA triplet repeat in the first intron of the X25 gene. The gene is mapped on chromosome 9q. The objective of the investigation was to introduce simple and reliable DNA diagnosis helping to specify of spinocerebellare ataxias. Methods and Results. Our diagnosis is based on the differentiation of normal and mutant alleles of gene X25 with PCR and electrophoresis on agarose gel. Size of PCR product of normal allele is in our case 521 - 614 bp. It is responding to 7 - 38 GAA triplets. Size of mutant alleles with 200 - 1200 GAA triplets is as 4100 bp. After the method was introduced, we analysed 12 probands. Four of them suffered from Friedreich's ataxia. Conclusions. We introduced a fast, non-radioactive, reliable DNA diagnostic method. The contribution of this method is defection of carriers and we can screen of families with the risk of Friedreich's ataxia.
