Meniscus is a semilunar fibrocartilaginous tissue, serving important roles in load buffering, stability, lubrication, proprioception, and nutrition of the knee joint. The degeneration and damage of meniscus has been proved to be a risk factor of knee osteoarthritis. Mechanical stimulus is a critical factor of the development, maintenance and repair of the meniscus fibrochondrocytes. However, the mechanism of the mechano-transduction process remains elusive. Here we reported that cyclic hydrostatic compress force (CHCF) treatment promotes proliferation and inhibits apoptosis of the isolated primary meniscus fibrochondrocytes (PMFs), via upregulating the expression level of integrin ?5ß1. Consequently, increased phosphorylated-ERK1/2 and phosphorylated-PI3K, and decreased caspase-3 were detected. These effects of CHCF treatment can be abolished by integrin ?5ß1 inhibitor or specific siRNA transfection. These data indicate that CHCF regulates apoptosis of PMFs via integrin ?5ß1-FAK-PI3K/ERK pathway, which may be an important candidate approach during meniscus degeneration.
- MeSH
- apoptóza fyziologie účinky léků MeSH
- buněčný převod mechanických signálů fyziologie MeSH
- chondrocyty metabolismus účinky léků MeSH
- fibroblasty metabolismus účinky léků MeSH
- hydrostatický tlak MeSH
- integrin alfa5beta1 antagonisté a inhibitory metabolismus MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- malá interferující RNA aplikace a dávkování MeSH
- meniskus cytologie metabolismus MeSH
- pevnost v tlaku fyziologie MeSH
- potkani Sprague-Dawley MeSH
- proliferace buněk fyziologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Úvod: Autoři v práci předkládají výsledky klinických, morfologických a biochemických vyšetření po léčbě defektů kloubní chrupavky kolenního kloubu léčených metodou implantace solidního chondrograftu v porovnání s léčbou prostými návrty spodiny defektu. V experimentální části se zaměřují na stanovení typu novotvořené tkáně vzniklé v místě defektu pomocí imunohistochemického a molekulárněbiologického průkazu přítomnosti kolagenu I. a II. typu a stanovení přítomnosti proteolytických enzymů (matrix metaloproteináz), které se podílí na reparativních procesech v novotvořené chrupavce. Na základě těchto vyšetření poté formulují doporučení pro klinickou praxi. Metoda a materiál: Sledovaný soubor tvoří celkem 87 pacientů s chondrálním nebo osteochondrálním defektem v oblasti kolenního kloubu, kteří podstoupili metodu implantace solidního chondrograftu. Mezi pacienty je 52 mužů a 35 žen ve věkovém rozmezí 16-50 let, průměrný věk 29 let. Interval pooperačního sledování činí 12-173 měsíců, průměrná doba sledování je 48 měsíců. U 27 pacientů byl při reartroskopické operaci odebrán vzorek chrupavky z místa implantace solidního chondrograftu a tyto vzorky byly dále histologicky a imunohistochemicky vyšetřeny. Ke klinickému zhodnocení výsledků operace bylo použito klasifikačního skóre podle Lysholma před operací a v odstupu jednoho roku, dvou let a pěti let po operaci. U tří pacientů nebyl odebraný vzorek hodnotitelný. Jako kontrolní soubor byla stejným způsobem hodnocena skupina osmi pacientů (pět mužů, tři ženy ve věku 17-42 let, průměrný věk 30 let) ošetřených klasickými návrty osteochondrálních defektů podle Pridieho. V jednom případě byl odebraný vzorek nehodnotitelný. Výsledky: Průměrné předoperační skóre podle Lysholma v našem souboru 67 pacientů s chondrálním defektem v oblasti kondylů femuru či tibie činí 39,5. V jednom roce po operaci dochází ke zlepšení na 81,6. S odstupem dvou let po operaci činí u 52 dále sledovaných pacientů skóre 84,3. U 31 pacientů po pěti letech od operace činí průměrné skóre 84,8. U sledovaných pacientů s defektem na patele (20 operovaných) bylo předoperační skóre podle Lysholma průměrně 38,5, v jednom roce 80,4, po dvou letech 82,5 a u 13 pacientů sledovaných pět let po operaci vyšlo skóre 80,1. V souboru 24 vzorků tkáně odebrané z místa implantace solidního chondrograftu byl imunohistochemickým vyšetřením prokázán kolagen typu II ve všech 24 případech, kolagen typu I byl u tří vzorků z této skupiny. Histologickým vyšetřením byla hyalinní chrupavka potvrzena ve všech 24 vzorcích. Skupina sedmi kontrolních vzorků po návrtech vykazovala rozmanitý patomorfologický obraz a expresi kolagenu I. a II. typu. Ve dvou případech byla nalezena vazivová chrupavka, v níž Western blotting odhalil přítomnost kolagenu I. i II. typu, ve třech případech chrupavku hyalinní bez obsahu kolagenu I. typu, a ve dvou případech byla zastižena pouze vazivová tkáň, která nevykazovala imunohistochemickou pozitivitu s protilátkou proti kolagenu II. typu. U žádného vzorku z obou skupin nebyla imunohistochemicky prokázána exprese matrix metaloproteináz (MMP-1, MMP-3, MMP-13). Závěr: Na základě těchto klinických, morfologických, imunohistochemických a molekulárněgenetických vyšetření jednoznačně vyplývá vhodnost aplikace chondrograftu při defektech kloubních chrupavek u pacientů všech věkových skupin. Pouze u mladých pacientů (1. a 2. decennium) s malým defektem kloubní chrupavky nezasahující subchondrální kost je možné zvolit ošetření metodou prostých návrtů spodiny defektu.
Introduction: The authors present the results of clinical, morphological and biochemical examinations after treating joint knee joint cartilage defects treated with the solid chondrograph implantation method as compared to simple prosthesis recovery. In the experimental part, they focus on the determination of the type of newly formed tissue produced at the defect site by immunohistochemical and molecular-biological evidence of the presence of collagen types I and II and the presence of proteolytic enzymes (matrix-metalloproteinases) involved in reparative processes in newly formed cartilage. Based on these examinations, they then formulate recommendations for clinical practice. Method and Material: A total of 87 patients with a chondral or osteochondral defect in the knee joint area who underwent a solid chondrograph implantation method were studied. There were 52 men and 35 women in the age range of 16-50 years, with an average age of 29 years. The postoperative follow-up interval was 12-173 months, with an average follow-up time of 48 months. In 27 patients, a cartilage sample from the solid chondrograph implantation was taken during a rearthroscopic operation and these samples were further examined histologically and immunohistochemically. Clinical evaluation of the results of the operation was based on the Lysholma classification score before and at 1 year, 2 years and 5 years after surgery. In 3 patients, the sample was not evaluated. A group of 8 patients (5 males, 3 females aged 17-42 years, mean age 30 years) treated with classical osteochondral defects recovered by Pridie were evaluated as the control group. In 1 case, the sample was unobservable. Results: The average preoperative score according to Lysholm in our group of 67 patients with chondral defect in the area of the femur or tibia is 39.5. One year after surgery, the improvement reached 81.6. Two after the surgery, the score for the 52 followed-up patients was 84.3. In 31 patients at 5 years after surgery, the average score was 84.8. In the patients with a defect of the patella (20 patients) the preoperative Lysholm scores went from 38.5 on average, to 80.4 one year after the surgery, 82.5, after two years, and 13 patients studied at 5 years after surgery had the published score of 80.1. In a set of 24 tissue samples collected from the implant site of solid chondrografts, collagen type II was demonstrated by immunohistochemistry, in all 24 cases, type I collagen in 3 samples from this group. By histological examination, hyaline cartilage was confirmed in all 24 samples. The group of 7 control samples showed a diverse patomorphological image and expression of collagen type I and II. In 2 cases, connective tissue cartilage was found and Western blotting revealed the presence of collagen type I and II in the hyaline cartilage 3 cases without collagen type I, and in 2 cases were encountered only fibrous tissue, which did not show immunohistochemical positivity with anti-collagen type II. Mammalian metalloproteinases (MMP-1, MMP-3, MMP-13) were not immunohistochemically demonstrated in any of the two groups. Conclusion: Based on these clinical, morphological, immunohistochemical and molecular-genetic examinations, the suitability of chondrography for articular cartilage defects in patients of all age groups is clearly demonstrated. Only young patients (1st and 2nd decennium) with a small defect of articular cartilage, non-subchondral bone may be treated with the simple back deflection method.
- MeSH
- artroskopie metody MeSH
- autologní štěp * transplantace účinky léků MeSH
- chondrocyty fyziologie transplantace účinky léků MeSH
- hyalinní chrupavka * patofyziologie patologie transplantace MeSH
- kloubní chrupavka patofyziologie patologie MeSH
- kolenní kloub * patofyziologie patologie MeSH
- lidé MeSH
- magnetická rezonanční tomografie metody MeSH
- ortopedické výkony metody MeSH
- perioperační období MeSH
- počítačová rentgenová tomografie metody MeSH
- pooperační komplikace MeSH
- prospektivní studie MeSH
- rentgendiagnostika metody MeSH
- statistika jako téma MeSH
- výsledky a postupy - zhodnocení (zdravotní péče) MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Facial shape is the basis for facial recognition and categorization. Facial features reflect the underlying geometry of the skeletal structures. Here, we reveal that cartilaginous nasal capsule (corresponding to upper jaw and face) is shaped by signals generated by neural structures: brain and olfactory epithelium. Brain-derived Sonic Hedgehog (SHH) enables the induction of nasal septum and posterior nasal capsule, whereas the formation of a capsule roof is controlled by signals from the olfactory epithelium. Unexpectedly, the cartilage of the nasal capsule turned out to be important for shaping membranous facial bones during development. This suggests that conserved neurosensory structures could benefit from protection and have evolved signals inducing cranial cartilages encasing them. Experiments with mutant mice revealed that the genomic regulatory regions controlling production of SHH in the nervous system contribute to facial cartilage morphogenesis, which might be a mechanism responsible for the adaptive evolution of animal faces and snouts.
- MeSH
- chondrocyty cytologie účinky léků metabolismus MeSH
- čichová sliznice cytologie účinky léků růst a vývoj metabolismus MeSH
- embryo savčí MeSH
- homeodoménové proteiny genetika metabolismus MeSH
- integrasy genetika metabolismus MeSH
- kolagen typ II genetika metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- maxilofaciální vývoj genetika MeSH
- morfogeneze účinky léků genetika MeSH
- mozek účinky léků růst a vývoj metabolismus MeSH
- mutageny aplikace a dávkování MeSH
- myši transgenní MeSH
- myši MeSH
- nosní chrupavky cytologie účinky léků růst a vývoj metabolismus MeSH
- obličej anatomie a histologie embryologie MeSH
- obličejové kosti cytologie účinky léků růst a vývoj metabolismus MeSH
- proteiny hedgehog genetika metabolismus MeSH
- rekombinantní fúzní proteiny genetika metabolismus MeSH
- signální transdukce * MeSH
- tamoxifen aplikace a dávkování MeSH
- transkripční faktory genetika metabolismus MeSH
- vývojová regulace genové exprese MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Tyrosine kinase inhibitors are being developed for therapy of malignancies caused by oncogenic FGFR signaling but little is known about their effect in congenital chondrodysplasias or craniosynostoses that associate with activating FGFR mutations. Here, we investigated the effects of novel FGFR inhibitor, ARQ 087, in experimental models of aberrant FGFR3 signaling in cartilage. In cultured chondrocytes, ARQ 087 efficiently rescued all major effects of pathological FGFR3 activation, i.e. inhibition of chondrocyte proliferation, loss of extracellular matrix and induction of premature senescence. In ex vivo tibia organ cultures, ARQ 087 restored normal growth plate architecture and eliminated the suppressing FGFR3 effect on chondrocyte hypertrophic differentiation, suggesting that it targets the FGFR3 pathway specifically, i.e. without interference with other pro-growth pathways. Moreover, ARQ 087 inhibited activity of FGFR1 and FGFR2 mutants associated with Pfeiffer, Apert and Beare-Stevenson craniosynostoses, and rescued FGFR-driven excessive osteogenic differentiation in mouse mesenchymal micromass cultures or in ex vivo calvarial organ cultures. Our data warrant further development of ARQ 087 for clinical use in skeletal disorders caused by activating FGFR mutations.
- MeSH
- aniliny farmakologie terapeutické užití MeSH
- bezbuněčný systém MeSH
- buněčná diferenciace * účinky léků MeSH
- buněčné kultury MeSH
- chinazoliny farmakologie terapeutické užití MeSH
- chondrocyty účinky léků metabolismus patologie MeSH
- extracelulární matrix účinky léků metabolismus MeSH
- fibroblastový růstový faktor 2 farmakologie MeSH
- končetinové pupeny patologie MeSH
- kraniosynostózy farmakoterapie genetika patologie MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kur domácí MeSH
- lebka patologie MeSH
- mutace genetika MeSH
- myši MeSH
- orgánové kultury - kultivační techniky MeSH
- proliferace buněk účinky léků MeSH
- receptory fibroblastových růstových faktorů genetika MeSH
- signální transdukce * MeSH
- stárnutí buněk účinky léků MeSH
- tibie účinky léků patologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
OBJECTIVE: Statins are widely used drugs for cholesterol lowering, which were recently found to counteract the effects of aberrant fibroblast growth factor receptor (FGFR3) signaling in cell and animal models of FGFR3-related chondrodysplasia. This opened an intriguing therapeutic possibility for human dwarfing conditions caused by gain-of-function mutations in FGFR3, although the mechanism of statin action on FGFR3 remains unclear. Here, we determine the effect of statins on FGFR signaling in chondrocytes. DESIGN: Cultured chondrocyte cell lines, mouse embryonic tibia cultures and limb bud micromasses were treated with FGF2 to activate FGFR signaling. The effects of atorvastatin, fluvastatin, lovastatin and pravastatin on FGFR3 protein stability and on FGFR-mediated chondrocyte growth-arrest, loss of extracellular matrix (ECM), induction of premature senescence and hypertrophic differentiation were evaluated. RESULTS: Statins did not alter the level of FGFR3 protein expression nor produce any effect on FGFR-mediated inhibition of chondrocyte proliferation and hypertrophic differentiation in cultured chondrocyte cell lines, mouse tibia cultures or limb bud micromasses. CONCLUSION: We conclude that statins do not inhibit the FGFR signaling in chondrocytes. Therefore the statin-mediated rescue of FGFR3-related chondrodysplasia, described before, is likely not intrinsic to the growth plate cartilage.
- MeSH
- buněčná diferenciace účinky léků MeSH
- buněčné linie MeSH
- chondrocyty účinky léků metabolismus MeSH
- chondrogeneze účinky léků MeSH
- končetinové pupeny účinky léků metabolismus MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- myši MeSH
- receptor fibroblastových růstových faktorů, typ 3 antagonisté a inhibitory metabolismus MeSH
- signální transdukce účinky léků MeSH
- statiny farmakologie MeSH
- techniky tkáňových kultur MeSH
- tibie účinky léků embryologie růst a vývoj MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- chondrocyty metabolismus účinky léků MeSH
- dítě MeSH
- hormonální substituční terapie MeSH
- hypertyreóza MeSH
- hypothalamus patofyziologie MeSH
- insulinu podobný růstový faktor I MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- poruchy růstu etiologie patofyziologie patologie MeSH
- Praderův-Williho syndrom * patologie terapie MeSH
- předškolní dítě MeSH
- rekombinantní proteiny terapeutické užití MeSH
- růstová ploténka MeSH
- růstové látky MeSH
- růstový hormon * dějiny farmakologie nedostatek terapeutické užití MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Oxidative stress and NF-κB signaling plays a major role in pathogenesis of osteoarthritis. In the present study, we analyzed the potent role of carnosol against osteoarthritis in cells treated using monosodium iodoacetate (MIA) model through in vitro studies. MIA caused dose-dependent cell death and induced programmed cell death by increasing subG1 accumulation and caspase-3 expressions. MIA caused oxidative stress by increasing reactive oxygen species, lipid peroxidation and further induced NF-κB expression and down regulated Nrf-2 levels. Pre-treatment with carnosol significantly protected the cells by reducing the oxidative stress markers and improved the cell viability up to 98%. Further, carnosol down regulated NF-κB nuclear expression with a concomitant increase in Nrf-2 nuclear localization and up regulated the nuclear Nrf-2 levels. Carnosol also inhibited MIA-induced subG1 accumulation and caspase-3 activation. This study demonstrates that, carnosol might act as potent antioxidant and regulate MIA-induced oxidative stress, NF-κB signaling and programmed cell death by up regulating the Nrf-2 levels.
- MeSH
- antioxidancia metabolismus MeSH
- apoptóza účinky léků MeSH
- chondrocyty patologie účinky léků MeSH
- chrupavka MeSH
- diterpeny abietanové farmakologie metabolismus terapeutické užití MeSH
- faktor 1 související s NF-E2 aplikace a dávkování MeSH
- jodacetáty farmakologie škodlivé účinky MeSH
- kultivované buňky MeSH
- NF-kappa B antagonisté a inhibitory MeSH
- osteoartróza * metabolismus patofyziologie MeSH
- oxidační stres účinky léků MeSH
- potkani Sprague-Dawley MeSH
- reaktivní formy kyslíku antagonisté a inhibitory MeSH
- zánět genetika chemicky indukované patofyziologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
Aberrant fibroblast growth factor (FGF) signaling disturbs chondrocyte differentiation in skeletal dysplasia, but the mechanisms underlying this process remain unclear. Recently, FGF was found to activate canonical WNT/β-catenin pathway in chondrocytes via Erk MAP kinase-mediated phosphorylation of WNT co-receptor Lrp6. Here, we explore the cellular consequences of such a signaling interaction. WNT enhanced the FGF-mediated suppression of chondrocyte differentiation in mouse limb bud micromass and limb organ cultures, leading to inhibition of cartilage nodule formation in micromass cultures, and suppression of growth in cultured limbs. Simultaneous activation of the FGF and WNT/β-catenin pathways resulted in loss of chondrocyte extracellular matrix, expression of genes typical for mineralized tissues and alteration of cellular shape. WNT enhanced the FGF-mediated downregulation of chondrocyte proteoglycan and collagen extracellular matrix via inhibition of matrix synthesis and induction of proteinases involved in matrix degradation. Expression of genes regulating RhoA GTPase pathway was induced by FGF in cooperation with WNT, and inhibition of the RhoA signaling rescued the FGF/WNT-mediated changes in chondrocyte cellular shape. Our results suggest that aberrant FGF signaling cooperates with WNT/β-catenin in suppression of chondrocyte differentiation.
- MeSH
- beta-katenin genetika metabolismus MeSH
- biologické modely MeSH
- buněčná diferenciace účinky léků genetika MeSH
- chondrocyty účinky léků metabolismus MeSH
- chrupavka cytologie účinky léků metabolismus MeSH
- fibroblastové růstové faktory farmakologie MeSH
- fibroblastový růstový faktor 2 farmakologie MeSH
- HEK293 buňky MeSH
- končetinové pupeny účinky léků embryologie metabolismus MeSH
- konfokální mikroskopie MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- LDL receptor related protein 6 genetika metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- nádorové buněčné linie MeSH
- polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
- protein Wnt3A farmakologie MeSH
- proteiny Wnt genetika metabolismus farmakologie MeSH
- receptory fibroblastových růstových faktorů genetika metabolismus MeSH
- signální transdukce účinky léků genetika MeSH
- synergismus léků MeSH
- transkriptom účinky léků genetika MeSH
- western blotting MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
This study was designed to investigate effects of insulin on fracture healing and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in diabetic rats. Wister rats were randomly divided into diabetic control (n=66), diabetic insulin (=66) and non-diabetic control group (n=66). Diabetes was established by peritoneal injection of alloxan. Tibia fracture was surgically created and was allowed to heal. Radiological and biomechanical examinations were performed on the healing tibia. Immuohistochemistry was used to assess VEGF expression in the healing fracture tissues. Cortical reconstruction of the fracture sites in non-diabetic control and diabetic insulin groups was more rapid than in diabetic control group within 6 weeks of the fracture. Mechanical strength of the affected tibia in the diabetic insulin and non-diabetic control group was superior to diabetic control group. Histological examination of the fracture sites revealed a delay in chondrocyte maturation and hypertrophy in diabetic control group. VEGF expression was widely distributed in fracture sites within the first 4 weeks in control and diabetic insulin treatment group. However VEGF expression in the callus and periosteum in diabetic control group was much less than in diabetic insulin or non-diabetic control group. In conclusion, diabetes delays fracture healing and adversely affects callus formation with a reduced VEGF expression at the fracture sites. Insulin therapy improves fracture healing in diabetes rats, possibly through enhancing VEGF expression in the fractured bones.
- MeSH
- biomechanika MeSH
- chondrocyty patologie účinky léků MeSH
- experimentální diabetes mellitus farmakoterapie komplikace patofyziologie MeSH
- femur patologie radiografie účinky léků MeSH
- fraktury femuru * farmakoterapie patofyziologie patologie radiografie MeSH
- hojení ran účinky léků MeSH
- imunohistochemie MeSH
- inzulin * terapeutické užití MeSH
- kostní svalek patofyziologie účinky léků MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- potkani Wistar MeSH
- studie případů a kontrol MeSH
- vaskulární endoteliální růstové faktory * analýza účinky léků MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- mužské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
AIM: Platelet derivatives serve as an efficient source of natural growth factors. In the current study, α-granules were incorporated into coaxial nanofibers. MATERIALS & METHODS: A nanofiber scaffold containing α-granules was prepared by coaxial electrospinning. The biological potential of the nanofiber scaffold was evaluated in chondrocyte and mesenchymal stem cell cultivation studies. Additionally, the concentration of TGF-β1 was determined. RESULTs: Microscopy studies showed that intact α-granules were incorporated into the coaxial nanofibers. The cultivation tests showed that the novel scaffold stimulated viability and extracellular matrix production of chondrocytes and mesenchymal stem cells. In addition, the concentration of growth factors necessary for the induction of cell proliferation significantly decreased. CONCLUSION: The system preserved α-granule bioactivity and stimulated cell viability and chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells. Core/shell nanofibers incorporating α-granules are a promising system for tissue engineering, particularly cartilage engineering.
- MeSH
- chondrocyty cytologie účinky léků MeSH
- cytoplazmatická granula chemie MeSH
- konfokální mikroskopie MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- mezenchymální kmenové buňky cytologie účinky léků MeSH
- nanovlákna chemie MeSH
- systémy cílené aplikace léků metody MeSH
- tkáňové podpůrné struktury chemie MeSH
- transformující růstový faktor beta1 MeSH
- viabilita buněk účinky léků MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH