The host immune system plays a critical role in the development and progression of sepsis, but the mechanisms that lead to cellular dysfunction, organ failure and death remain poorly defined. Peripheral blood monocytes are a major source of the effector molecules that are closely correlated with sepsis development and clinical outcomes. We aim to dissect the signalling pathways and transcription factor networks that control monocyte function in human sepsis. We will also use a newly-developed 3D organoid model to assess how patient monocyte signalling is influenced by lung tissue, which is the most common site of infection in sepsis and serves as a reservoir of monocytes for release into the blood. Given that sepsis-linked changes in monocyte function alter the metabolite content of blood, we will also use a metabolomic approach to identify novel biomarkers within the volatile fraction of patient serum. This project will better define the molecular determinants of monocyte activity in human sepsis and assist the identification of new prognostic biomarkers for use in the clinic.

Imunitní systém hraje klíčovou úlohu ve vývoji a kontrole sepse, avšak mechanismus buněčné disfunkce, selhání orgánů a smrt nejsou dostatečně pochopeny. Monocyty periferní krve jsou hlavním zdrojem efektorových molekul, které jsou úzce propojeny s rozvojem a klinickým výsledkem sepse. Hlavním cílem projektu je pochopení nevysvětlených událostí v signalizaci monocytů během sepse, především spolupráce sítě klíčových transkripčních faktorů řídících funkce monocytů v sepsi. Použijeme nový model trojrozměrných plicních organoidů, ve kterém budeme zjistíme jak monocyty pacientů signalizují v kontextu plicní tkáně, která je běžným místem infekce a slouží jako rezervoár monocytů. Protože se sepsí spojené změny v monocytech mění množství metabolitů v krvi, použijeme také měření metabolitů k identifikaci nových biomarkerů mezi těkavými látkami séra pacientů. Výsledky projektu povedou k lepšímu pochopení procesů kontrolujících osud monocytů v septických stavech, a také možnost rychlé validace diagnostických znaků sepse.

• MeSH
• metabolismus MeSH
• monocyty MeSH
• NF-kappa B MeSH
• sepse imunologie   metabolismus   MeSH
• signální transdukce MeSH
• transkripční faktory NFATC MeSH
• zánět MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• infekční lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The relationship of the content and proportion of pro-inflammatory M1 and anti-inflammatory M2 macrophages between the human artery and adjacent perivascular adipose tissue will be determined (tissues obtained in kidney transplantation procedure from living kidney donors - women). The proportion of the macrophage subpopulation will be correlated to traditional as well as non-traditional risk factors of atherosclerosis, including reproductive status and markers of subclinical inflammation in circulation. The direct effect of molecules released from adipose tissue on macrophage cholesterol efflux, monocyte adhesion, and migration will be determined in cell cultures.

Projekt je zaměřen na stanovení vztahu mezi množstvím a poměrem prozánětlivých M1 a protizánětlivých M2 makrofágů v lidské renální arterii a v přilehlé perivaskulární tukové tkáni u zdravých dárců ledvin - žen. Subpopulace makrofágů budou korelovány ke specifickým rizikovým faktorům aterosklerózy včetně reprodukčního statusu a plazmatických markerům subklinického zánětu. Přímý efekt nízkomolekulárních látek uvolňovaných tukovou tkání na efflux cholesterolu z makrofágů a adhezi a migraci monocytů bude stanoven v tkáňové kultuře.

• MeSH
• arteria renalis patologie   MeSH
• ateroskleróza epidemiologie   MeSH
• dárci tkání MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy patologie   MeSH
• rizikové faktory kardiovaskulárních chorob MeSH
• tuková tkáň patologie   MeSH
• zánět MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• kardiologie
• angiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project is focused on the study of innate immune mechanisms in kidney transplantation. The parameters of human monocytes activation will be studied in early post-transplant period and in treatment complications (delayed graft function/rejection/infection). Soluble forms of myeloid antigens (sCD14, sCD163, S100A8/S100A9) will be monitored in kidney transplant patients as potential biomarkers of monocyte/macrophage activation, in the case of complications, proportions of monocytes subpopulations CD14+CD16+ and CD14+CD163+ in peripheral blood will be also evaluated. Using an co-culture model, the effect of macrophages on renal epithelial activation (gene induction and release of cytokines, expression of activation membrane markers) and reparative ability (renewal of mechanicaly damaged monolayer) will be studied. Furthermore, mRNA markers of monocyte activation in a co-culture with autologous v.s. allogenic v.s. xenogenic cells will be tested to asses potential allo (xeno-) reactivity of innate immune cells.

Projekt je zaměřen na studium mechanismů přirozené imunity u transplantací ledvin. Studovány budou parametry aktivace lidských monocytů v časném potransplantačním období a při komplikacích léčby (oddálená funkce štěpu/rejekce/infekce). U pacientů po transplantaci ledviny budou monitorovány solubilní formy myeloidních antigenů (sCD14, sCD163, S1008/S10014) jako potenciální biomarkery aktivace monocytů a makrofágů, v průběhu komplikací léčby bude vyšetřováno také zastoupení monocytárních subpopulací CD14+CD16+ a CD14+CD163+ v periferní krvi. Na tkáňovém modelu bude sledován vliv ko-kultivovaných makrofágů na aktivaci (indukce genů a sekrece prozánětlivých cytokinů, exprese aktivačních membránových znaků) renálních epiteliálních buněk a na jejich reparační schopnosti (rychlost obnovy mechanicky porušené konfluentní vrstvy). Dále budou porovnávány na úrovni mRNA známky aktivace monocytů při kokultivaci s autologními vs. allogenními v.s. xenogenními buňkami za účelem posoudit možnost jejich případné allo- či xeno-reaktivity.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• epitelové buňky imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy imunologie   MeSH
• monocyty imunologie   MeSH
• přirozená imunita MeSH
• rejekce štěpu imunologie   MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• transplantologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

• MeSH
• akutní myeloidní leukemie MeSH
• akutní myelomonocytární leukemie MeSH
• dendritické buňky MeSH
• hematologické nádory MeSH
• hematologie MeSH
• nádorové kmenové buňky MeSH
• Publikační typ
• příručky MeSH

• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství

Pertussis or whooping cough is a life threatening infectious disease that is now spreading in the highly vaccinated populations of the most developed countries. This is largely due to use of safe but less efficient acellular pertussis vaccines that were developed without the understanding of mechanisms by which Bordetella pertussis suppresses and evades host immunity. We shall test herein the hypothesis that adenylate cyclase toxin (ACT) action suppresses adaptive cellular immune responses on respiratory mucosa through subversion of maturation of intraepithelial dendritic cells (DCs). Phenotype of DCs migrating from infected mucosa into draining lymph nodes shall be examined and the capacity of migrating DCs to activate antigen-specific T cells and/or suppress immune responses and expand of tolerogenic Treg cells will be determined. The acquired knowledge will be used to develop a next generation of immunogenic and safe pertussis vaccines consisting of suspensions of genetically detoxified bacteria, admixed with toxoids of ACT and PT.

Černý kašel (pertuse) je život ohrožující infekční onemocnění, které se opět šíří ve vysoce proočkovaných populacích nejvyspělejších zemí, jež používají bezpečné, ale málo účinné acelulární pertusové vakcíny. Tyto byly vyvinuty bez dostatečné znalosti mechanismů, jimiž bakterie Bordetella pertussis potlačuje vrozenou a adaptivní imunitu hostitele. V tomto projektu otestujeme hypotézu, že působení adenylát-cyklázového toxinu (ACT) potlačuje adaptivní buněčnou imunitní odpověď hostitele na infekci. Pokročilými zobrazovacími metodami, a s využitím specifických mutant, prověříme působení ACT na maturaci intraepitheliálních dendritických buněk. Prostudujeme fenotyp dendritických buněk migrujících z infikované sliznice do mízních uzlin a stanovíme jejich schopnost aktivovat T lymfocyty a/nebo expandovat regulační T buňky a tlumit imunitní odpověď. Toto poznání uplatníme při vývoji vysoce imunogenních a bezpečných experimentálních pertusových vakcín nové generace, založených na vícečetně geneticky detoxifikovaných bakteriálních buňkách ve směsi s toxoidy ACT a PT.

• MeSH
• adenylátcyklasový toxin imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• dendritické buňky imunologie   MeSH
• fenotyp MeSH
• imunosupresiva škodlivé účinky   MeSH
• léky zkušební MeSH
• lidé MeSH
• pertuse imunologie   prevence a kontrola   MeSH
• pertusová vakcína MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• vyvíjení léků MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• pneumologie a ftizeologie
• preventivní medicína
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Prostate cancer (PCa) accounts for the second leading cause of cancer-elicited deaths in men in Europe and the United States. The T-cell-based adoptive cellular immunotherapy (ACI) is a modern therapeutic platform increasingly used in cancer treatment often administered when other treatment options have already been exhausted. Our project proposes a development of a protocol for T-cell-based ACI of PCa. Our ACI will use ex vivo generated autologous T-cells that will recognize multiple PCa cell-associated antigens. After their autologous transfer to the patient these T-cells will attack and destroy PCa cells. For their preparation we will use ex vivo generated autologous dendritic cells (DCs) as the professional antigen-presenting cells. DCs will be used to pre-expand the cancer-specific T-cells from autologous naive T-cells. Using the expansion and isolation bead technology in combination with our DCs the pre-expanded cells will be extensively expanded to attain therapeutically relevant numbers. The developed protocol is supposed to be compliant with the standards for use in clini...

Karcinom prostaty (PCa) je druhou nejčastější příčinou úmrtí mužů na rakovinu v Evropě a USA. Adoptivní buněčná imunoterapie (ACI) je moderní léčebnou platformou stále více využívanou při léčbě rakoviny, a to zejména v případech, kdy ostatní léčebné metody již selhaly. Tématem našeho projektu je vývoj protokolu pro ACI založenou na T-buňkách. Naše ACI bude využívat ex vivo připravené autologní T-buňky, které rozeznávají velké množství antigenů asociovaných s prostatickými nádorovými buňkami. Po jejich autologním transferu zpět pacientovi budou tyto buňky napadat a likvidovat buňky PCa. K přípravě těchto T-buněk využijeme ex vivo připravené autologní dendritické buňky (DCs) jako profesionální antigen prezentující buňky. DCs umožní prvotní expanzi nádorově specifických T-buněk z autologních naivních T-buněk. Použitím expanzních a izolačních partikulí v kombinaci s našimi DCs budou tyto buňky dále extenzivně expandovány k dosažení terapeuticky relevantního množství. U výsledného protokolu se očekává, že bude splňovat kritéria pro jeho klinické využití.

• MeSH
• autologní štěp MeSH
• dendritické buňky MeSH
• imunoterapie adoptivní metody   MeSH
• lidé MeSH
• nádory prostaty terapie   MeSH
• protinádorové látky imunologicky aktivní terapeutické užití   MeSH
• protokoly protinádorové léčby MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• vyvíjení léků MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• andrologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The type 1 diabetes (T1D) is an autoimmune disease with multifactorial etiology. The involvement of adaptive immunity was clearly demonstrated. The role of innate immunity in T1D is intensively studied, mainly the role of dendritic cells (DCs) as key players in evolvement and maintenance of peripheral immune tolerance. Studies in animal models demonstrated the interactions between multiple immune cells contribute to autoimmune reaction against beta-cells. DCs after autoantigen processing and presentation produce proinflammatory cytokines, including IFNalpha and stimulate autoreactive T cells. Moreover, neutrophils induce DC maturation and influence the activation of IFNalpha-producing pDCs. This innate cell interrelation suggests the role of DCs, mainly pDCs and IFNalpha in T1D pathogenesis. This project will focused on the study of analogical interactions in T1D patients using in vitro DC models.

Diabetes mellitus 1. typu (T1D) je autoimunitní multifaktoriální onemocnění. V patogenezi T1D se uplatňují především mechanismy adaptivní imunity. V posledních letech je významně zkoumána úloha vrozené imunity u T1D, hlavně dendritických buněk (DC) jako klíčových buněk v rozvoji a udržení periferní tolerance. Mnohé studie u myší prokázaly vzájemnou interakci imunitních buněk (DC, makrofágy, lymfocyty) vedoucí k autoimunitní reakci namířené proti beta-buňkám pankreatu. DC po pohlcení autoantigenů produkují prozápalové cytokiny, včetně IFNalpha a jsou schopny stimulovat autoreativní T lymfocyty. Neutrofily indukují maturaci DC a aktivují produkci IFNalpha pDC buňkami. Tato vzájemná interakce potvrzuje roli DC, hlavně pDC, a IFNalpha v patogenezi T1D. Tato studie na in vitro modelech bude zaměřena na sledování obdobných interakcí u pacientů s T1D.

• MeSH
• dendritické buňky MeSH
• diabetes mellitus 1. typu etiologie   imunologie   MeSH
• monocyty MeSH
• neutrofily MeSH
• přirozená imunita MeSH
• techniky in vitro MeSH
• zánět MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Dendritic cells (DC), regulatory T cells (Treg) and cytokines play a key role in setting of responses of adaptive immunity including allergic reaction. Their changes in early development (perinatal period) could signalize later allergy development. We could elucidate allergy development by studying of DC, Treg and cytokines in cord blood and possibly unravel immunologic parameters with prognostic value for predicting the extent of risk of allergy development. Isolation of Tregs and CD4CD25- from cord blood will be performed using magnetic microbeads. DC will be generated from precursors. Immune parameters of DC and Tregs will be followed by flow cytometry, qPCR and ELISA after in vitro specific and polyclonal stimulation. In the effort to elucidate the beneficial effect of probiotic vaccine Colinfant New Born in allergy prevention in colonized children, proportion and functional characteristics of Treg and DC in peripheral blood of 10-12 year old children will be followed by flow cytometry. The effect of early colonization on the microbiota composition will be analyse.

Dendritické buňky (DC), regulační T lymfocyty (Treg) a cytokiny jsou hlavními regulátory adaptivní imunitní odpovědi, tedy i alergické reakce. Jejich změny v časných vývojových stádiích mohou signalizovat pozdější rozvoj alergie. Studiem vlastností a funkce DC, Treg a cytokinů v pupečníkové krvi chceme přispět k hlubšímu poznání patogeneze alergie a identifikování charakteristických imunologických ukazatelů s prognostickým významem při posuzování velikosti rizika vzniku alergie. Treg a CD4CD25- budou izolovány z pupečníkové krve pomocí magnetických kuliček, DC budou generovány z prekursorů kultivací s růstovými faktory. Vlastnosti buněk a jejich reaktivita po specifické i polyklonální stimulaci in vitro budou testovány průtokovou cytometrií, qPCR a ELISA. Při objasňování prospěšného vlivu probiotické vakcíny Colinfant New Born na snižování výskytu alergie u osídlených dětí budeme sledovat proporční zastoupení a funkční vlastnosti Treg a DC v periferní krvi 10-12ti letých dětí. Budeme analyzovat vliv osídlení dětí probiotickou vakcínou Colinfant New Born na složeni střevni mikrobio...

• MeSH
• alergie MeSH
• cytokiny imunologie   MeSH
• dendritické buňky imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• fetální krev imunologie   MeSH
• imunologické faktory MeSH
• novorozenec MeSH
• probiotika terapeutické užití   MeSH
• regulační T-lymfocyty imunologie   MeSH
• rizikové faktory MeSH
• vakcíny MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• novorozenec MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• perinatologie a neonatologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project is focussed on monitoring the activation of granulocytes in patients with common variable immunodeficiency (CVID) and complement deficiency – hereditary angioedema (HAE). We will study the signs of granulocyte activation determined as presence of cell products in plasma, as well as the expression of genes associated with granulocyte activation at the mRNA level. Using flow cytometry, we will enumerate myeloid-derived suppressor cells (MDSC). The suppressor activity of MDSC on T-lymphocyte cytokine production will be determined using co-cultivation experiments. We will also study the effect of intravenous immunoglobulin administration in CVID patients on the levels of activation products in plasma; as well as the presence of these products in the plasma of HAE patients at the time of HAE attacks. Detection of activation of myeloid cells and the consequences of this activation, expressed by activation of the immune system or its suppression, may help to identify possible mechanisms leading to complications of those diseases, both autoimmune and secondary immunodeficiency.

Projekt je zaměřen na sledování aktivace granulocytů u nemocných s poruchami imunity – primární hypogamaglobulinémií - běžným variabilním imunodeficitem (CVID) a poruchou komplementového systému - hereditárním angioedémem (HAE). Budou sledovány znaky aktivace granulocytů na úrovni přítomnosti produktů buněk v plazmě, stejně jako exprese genů asociovaných s aktivací granulocytů na úrovni mRNA. Při využití průtokové cytometrie bude sledováno zastoupení MDCS (myelodid-derived suppressor cells). Pomocí kokultivačních pokusů s T-lymfocyty bude sledována supresorová aktivita MDSC na proliferaci lymfocytů a tvorbu cytokinů. Bude sledován i efekt podání intravenózního imunoglobulinu nemocným s CVID na přítomnost aktivačních produktů v plazmě, stejně jako přítomnost těchto produktů v plazmě nemocných s HAE v době ataky onemocnění. Průkaz aktivace myeloidníích buněk a různé následky této aktivace - vyjádřené aktivací imunitního systému nebo jeho supresí mohou pomoci rozpoznat možné mechanismy vedoucí ke komplikacím uvedených chorob, a to jak autoimunitních, tak i sekundárního imunodeficitu.

• MeSH
• cytokiny MeSH
• exprese genu imunologie   MeSH
• granulocyty MeSH
• imunitní systém - jevy MeSH
• monocyty MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project aims to study regulatory cells in patients at the first stage of clinically isolated syndrome (CIS) of multiple sclerosis (MS). Regular assessment of the proportion of different types of regulatory cells, with the emphasis placed on CD8+ cells, should assist in efficient therapy guidance. The first challenge will be to define the subsets that would distinguish patients with CIS from patients with confirmed diagnosis of MS (on the basis of our preliminary results, these might be CD8+CD28-), and from healthy controls. Alterations in the subpopulation might also reflect the possible disease development. Subsequently, the results will be verified by further control groups. The number of regulatory cells will be correlated with the disease development, therapy effects and potential parasite infection. The obtained results will be published in a journal with an impact factor, with sponsor dedication, and used in clinical practice for the selection of therapeutic strategies in patients with CIS.

Projekt je zaměřen na studium regulačních buněk u pacientů ve fázi prvního klinicky izolovaného syndromu (CIS) roztroušené sklerózy (RS), ještě před její definitivní diagnózou. Monitorace zastoupení různých typů regulačních buněk se zaměřením na CD8+ by měla pomoci k účelnému vedení terapie a optimálně zabránit dalšímu vývoji nemoci. V rámci projektu budou opakovaně vyšetřováni pacienti s CIS z RS centra VFN v laboratoři buněčné imunologie ÚIM 1.LF UK. První úkolem bude určit subpopulaci regulačních buněk, která bude odlišovat pacienty s CIS od pacientů s definitivní diagnózou RS (dle předběžných výsledků CD8+CD28-) a zdravých kontrol a která bude odrážet i eventuální vývoj nemoci. Následně pak bude výběr verifikován doplněním kontrolních souborů a hodnoty regulačních buněk budou korelovány s vývojem nemoci a jejím ovlivněním léčbou a možnou parazitární infekcí. Výsledky projektu budou publikovány v časopisech s impact faktorem s dedikací IGA a využity v klinické praxi při léčení nemocných s CIS.

• MeSH
• adherence k farmakoterapii MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• interferon beta imunologie   terapeutické užití   MeSH
• Kaplanův-Meierův odhad MeSH
• lymfocyty cytologie   MeSH
• monocyty cytologie   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• ROC křivka MeSH
• roztroušená skleróza farmakoterapie   MeSH
• software MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR