The host immune system plays a critical role in the development and progression of sepsis, but the mechanisms that lead to cellular dysfunction, organ failure and death remain poorly defined. Peripheral blood monocytes are a major source of the effector molecules that are closely correlated with sepsis development and clinical outcomes. We aim to dissect the signalling pathways and transcription factor networks that control monocyte function in human sepsis. We will also use a newly-developed 3D organoid model to assess how patient monocyte signalling is influenced by lung tissue, which is the most common site of infection in sepsis and serves as a reservoir of monocytes for release into the blood. Given that sepsis-linked changes in monocyte function alter the metabolite content of blood, we will also use a metabolomic approach to identify novel biomarkers within the volatile fraction of patient serum. This project will better define the molecular determinants of monocyte activity in human sepsis and assist the identification of new prognostic biomarkers for use in the clinic.

Imunitní systém hraje klíčovou úlohu ve vývoji a kontrole sepse, avšak mechanismus buněčné disfunkce, selhání orgánů a smrt nejsou dostatečně pochopeny. Monocyty periferní krve jsou hlavním zdrojem efektorových molekul, které jsou úzce propojeny s rozvojem a klinickým výsledkem sepse. Hlavním cílem projektu je pochopení nevysvětlených událostí v signalizaci monocytů během sepse, především spolupráce sítě klíčových transkripčních faktorů řídících funkce monocytů v sepsi. Použijeme nový model trojrozměrných plicních organoidů, ve kterém budeme zjistíme jak monocyty pacientů signalizují v kontextu plicní tkáně, která je běžným místem infekce a slouží jako rezervoár monocytů. Protože se sepsí spojené změny v monocytech mění množství metabolitů v krvi, použijeme také měření metabolitů k identifikaci nových biomarkerů mezi těkavými látkami séra pacientů. Výsledky projektu povedou k lepšímu pochopení procesů kontrolujících osud monocytů v septických stavech, a také možnost rychlé validace diagnostických znaků sepse.

• MeSH
• metabolismus MeSH
• monocyty MeSH
• NF-kappa B MeSH
• sepse imunologie   metabolismus   MeSH
• signální transdukce MeSH
• transkripční faktory NFATC MeSH
• zánět MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• infekční lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project is focused on the study of innate immune mechanisms in kidney transplantation. The parameters of human monocytes activation will be studied in early post-transplant period and in treatment complications (delayed graft function/rejection/infection). Soluble forms of myeloid antigens (sCD14, sCD163, S100A8/S100A9) will be monitored in kidney transplant patients as potential biomarkers of monocyte/macrophage activation, in the case of complications, proportions of monocytes subpopulations CD14+CD16+ and CD14+CD163+ in peripheral blood will be also evaluated. Using an co-culture model, the effect of macrophages on renal epithelial activation (gene induction and release of cytokines, expression of activation membrane markers) and reparative ability (renewal of mechanicaly damaged monolayer) will be studied. Furthermore, mRNA markers of monocyte activation in a co-culture with autologous v.s. allogenic v.s. xenogenic cells will be tested to asses potential allo (xeno-) reactivity of innate immune cells.

Projekt je zaměřen na studium mechanismů přirozené imunity u transplantací ledvin. Studovány budou parametry aktivace lidských monocytů v časném potransplantačním období a při komplikacích léčby (oddálená funkce štěpu/rejekce/infekce). U pacientů po transplantaci ledviny budou monitorovány solubilní formy myeloidních antigenů (sCD14, sCD163, S1008/S10014) jako potenciální biomarkery aktivace monocytů a makrofágů, v průběhu komplikací léčby bude vyšetřováno také zastoupení monocytárních subpopulací CD14+CD16+ a CD14+CD163+ v periferní krvi. Na tkáňovém modelu bude sledován vliv ko-kultivovaných makrofágů na aktivaci (indukce genů a sekrece prozánětlivých cytokinů, exprese aktivačních membránových znaků) renálních epiteliálních buněk a na jejich reparační schopnosti (rychlost obnovy mechanicky porušené konfluentní vrstvy). Dále budou porovnávány na úrovni mRNA známky aktivace monocytů při kokultivaci s autologními vs. allogenními v.s. xenogenními buňkami za účelem posoudit možnost jejich případné allo- či xeno-reaktivity.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• epitelové buňky imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy imunologie   MeSH
• monocyty imunologie   MeSH
• přirozená imunita MeSH
• rejekce štěpu imunologie   MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• transplantologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The type 1 diabetes (T1D) is an autoimmune disease with multifactorial etiology. The involvement of adaptive immunity was clearly demonstrated. The role of innate immunity in T1D is intensively studied, mainly the role of dendritic cells (DCs) as key players in evolvement and maintenance of peripheral immune tolerance. Studies in animal models demonstrated the interactions between multiple immune cells contribute to autoimmune reaction against beta-cells. DCs after autoantigen processing and presentation produce proinflammatory cytokines, including IFNalpha and stimulate autoreactive T cells. Moreover, neutrophils induce DC maturation and influence the activation of IFNalpha-producing pDCs. This innate cell interrelation suggests the role of DCs, mainly pDCs and IFNalpha in T1D pathogenesis. This project will focused on the study of analogical interactions in T1D patients using in vitro DC models.

Diabetes mellitus 1. typu (T1D) je autoimunitní multifaktoriální onemocnění. V patogenezi T1D se uplatňují především mechanismy adaptivní imunity. V posledních letech je významně zkoumána úloha vrozené imunity u T1D, hlavně dendritických buněk (DC) jako klíčových buněk v rozvoji a udržení periferní tolerance. Mnohé studie u myší prokázaly vzájemnou interakci imunitních buněk (DC, makrofágy, lymfocyty) vedoucí k autoimunitní reakci namířené proti beta-buňkám pankreatu. DC po pohlcení autoantigenů produkují prozápalové cytokiny, včetně IFNalpha a jsou schopny stimulovat autoreativní T lymfocyty. Neutrofily indukují maturaci DC a aktivují produkci IFNalpha pDC buňkami. Tato vzájemná interakce potvrzuje roli DC, hlavně pDC, a IFNalpha v patogenezi T1D. Tato studie na in vitro modelech bude zaměřena na sledování obdobných interakcí u pacientů s T1D.

• MeSH
• dendritické buňky MeSH
• diabetes mellitus 1. typu etiologie   imunologie   MeSH
• monocyty MeSH
• neutrofily MeSH
• přirozená imunita MeSH
• techniky in vitro MeSH
• zánět MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project is focussed on monitoring the activation of granulocytes in patients with common variable immunodeficiency (CVID) and complement deficiency – hereditary angioedema (HAE). We will study the signs of granulocyte activation determined as presence of cell products in plasma, as well as the expression of genes associated with granulocyte activation at the mRNA level. Using flow cytometry, we will enumerate myeloid-derived suppressor cells (MDSC). The suppressor activity of MDSC on T-lymphocyte cytokine production will be determined using co-cultivation experiments. We will also study the effect of intravenous immunoglobulin administration in CVID patients on the levels of activation products in plasma; as well as the presence of these products in the plasma of HAE patients at the time of HAE attacks. Detection of activation of myeloid cells and the consequences of this activation, expressed by activation of the immune system or its suppression, may help to identify possible mechanisms leading to complications of those diseases, both autoimmune and secondary immunodeficiency.

Projekt je zaměřen na sledování aktivace granulocytů u nemocných s poruchami imunity – primární hypogamaglobulinémií - běžným variabilním imunodeficitem (CVID) a poruchou komplementového systému - hereditárním angioedémem (HAE). Budou sledovány znaky aktivace granulocytů na úrovni přítomnosti produktů buněk v plazmě, stejně jako exprese genů asociovaných s aktivací granulocytů na úrovni mRNA. Při využití průtokové cytometrie bude sledováno zastoupení MDCS (myelodid-derived suppressor cells). Pomocí kokultivačních pokusů s T-lymfocyty bude sledována supresorová aktivita MDSC na proliferaci lymfocytů a tvorbu cytokinů. Bude sledován i efekt podání intravenózního imunoglobulinu nemocným s CVID na přítomnost aktivačních produktů v plazmě, stejně jako přítomnost těchto produktů v plazmě nemocných s HAE v době ataky onemocnění. Průkaz aktivace myeloidníích buněk a různé následky této aktivace - vyjádřené aktivací imunitního systému nebo jeho supresí mohou pomoci rozpoznat možné mechanismy vedoucí ke komplikacím uvedených chorob, a to jak autoimunitních, tak i sekundárního imunodeficitu.

• MeSH
• cytokiny MeSH
• exprese genu imunologie   MeSH
• granulocyty MeSH
• imunitní systém - jevy MeSH
• monocyty MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

The project aims to study regulatory cells in patients at the first stage of clinically isolated syndrome (CIS) of multiple sclerosis (MS). Regular assessment of the proportion of different types of regulatory cells, with the emphasis placed on CD8+ cells, should assist in efficient therapy guidance. The first challenge will be to define the subsets that would distinguish patients with CIS from patients with confirmed diagnosis of MS (on the basis of our preliminary results, these might be CD8+CD28-), and from healthy controls. Alterations in the subpopulation might also reflect the possible disease development. Subsequently, the results will be verified by further control groups. The number of regulatory cells will be correlated with the disease development, therapy effects and potential parasite infection. The obtained results will be published in a journal with an impact factor, with sponsor dedication, and used in clinical practice for the selection of therapeutic strategies in patients with CIS.

Projekt je zaměřen na studium regulačních buněk u pacientů ve fázi prvního klinicky izolovaného syndromu (CIS) roztroušené sklerózy (RS), ještě před její definitivní diagnózou. Monitorace zastoupení různých typů regulačních buněk se zaměřením na CD8+ by měla pomoci k účelnému vedení terapie a optimálně zabránit dalšímu vývoji nemoci. V rámci projektu budou opakovaně vyšetřováni pacienti s CIS z RS centra VFN v laboratoři buněčné imunologie ÚIM 1.LF UK. První úkolem bude určit subpopulaci regulačních buněk, která bude odlišovat pacienty s CIS od pacientů s definitivní diagnózou RS (dle předběžných výsledků CD8+CD28-) a zdravých kontrol a která bude odrážet i eventuální vývoj nemoci. Následně pak bude výběr verifikován doplněním kontrolních souborů a hodnoty regulačních buněk budou korelovány s vývojem nemoci a jejím ovlivněním léčbou a možnou parazitární infekcí. Výsledky projektu budou publikovány v časopisech s impact faktorem s dedikací IGA a využity v klinické praxi při léčení nemocných s CIS.

• MeSH
• adherence k farmakoterapii MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• interferon beta imunologie   terapeutické užití   MeSH
• Kaplanův-Meierův odhad MeSH
• lymfocyty cytologie   MeSH
• monocyty cytologie   MeSH
• prediktivní hodnota testů MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• ROC křivka MeSH
• roztroušená skleróza farmakoterapie   MeSH
• software MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Stored iron as possible cardiovascular risk factor has been discussed since the early 1980s. Its role in initiation and progression of atherosclerosis has been traditionally seen its up regulation of oxidative stress resulting in formation of highly atherogenic oxidized LDL. It seems however that iron has a direct role in regulation of both humoral and cellular immunity. One of the key factors may represent the redox-active monocyte intracellular iron. The in vitro part of the project will study in cultivated THP-I monocytes the impact of manipulation with redox-active labile iron pool on expression of inflammatory cytokines, scavenger receptors and oxLDL uptake. The in vivo study will be focused on association between intracellular lympho/monocyte iron and markers of oxidative stress, inflammation, endothelial dysfunction, insulin resistance, manifestation of coronary vascular disease or asymptomatic carotid atherosclerosis.

Zásobní železo v organizmu je stále diskutovaným rizikovým faktorem aterosklerózy. Jeho role v procesu iniciace a progrese aterosklerózy byla tradičně spatřována v jeho zvyšování oxidačního stresu s následnou tvorbou vysoce aterogenních oxidovaných LDL. V poslední době se však ukazuje, že železo má i přímý vliv na regulaci buněčné i humorální imunity. Jedním z klíčových faktorů pak může představovat tzv. „redox-aktivní železo“ v monocytu. Zde bude studován "in vitro" na kultuře THP-1 monocytů vliv reaktivního železa na expresi inflamatorních cytokinů, vybraných scavengerových receptorů a na vychytávání oxidovaných LDL. Studie "in vivo" pak bude zaměřena na vztah labilního železa měřeného v lymfo/monocytech k parametrům oxidačního stresu, zánětu, endotelové dysfunkce, inzulínové rezistence, manifestace ICHS a asymptomatické aterosklerózy karotických tepen. Množství labilního železa v lymfo/monocytech bude dále korelováno s běžnými fyziologickými ukazateli metabolismu železa.

• MeSH
• arteriae carotides MeSH
• aterosklerotický plát MeSH
• ateroskleróza MeSH
• chronická nemoc MeSH
• kardiovaskulární nemoci MeSH
• LDL-cholesterol chemie   MeSH
• lymfocyty MeSH
• monocyty MeSH
• oxidační stres MeSH
• scavengery volných radikálů MeSH
• železo metabolismus   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biochemie
• kardiologie
• angiologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Interactions between the neuroendocrine and immune system are mediated by cytokines, hormones and neurotransmitters through endocrine, paracrine and autocrine signaling. They are acting in both directions with stimulating and suppressive effects. The current evidences support hypothesis about peripheral stimulation of stress hormone cortisol by Toll-like receptors (TLRs) activation. The family of TLRs is critical in the early immune response upon bacterial infection. In addition to the main stress hormone cortisol, other stress hormone prolactin abolishes the immunosuppression by cortisol, and is involved in the maintenance of specific immune functions. Prolactin is produced not only by the pituitary but also by immune system. The aims of this study are to extend our knowledge about the activation of peripheral prolactin expression and by this way to contribute elucidation of its role in periphery.

Interakce mezi neuroendokrinním a imunitním systémem jsou zprostředkována cytokiny, hormony a neurotransmitery cestou endokrinní, parakrinní i autokrinní signalizace. Jedná se o dvousměrná působení se stimulačními a supresivními efekty. Současné dokladypodporují hypotézu, že periferní stimulace stresového hormonu kortisolu je zprostředkována aktivací Toll-like receptorů (TLR). Rodina TLR je kritická u časné imunitní odpovědi na bakteriální infekci. Vedle hlavního stresového hormonu kortisolu, jiný stresový hormon prolaktin ruší imunosupresi kortisolem, a je zapojen do udržování specifických imunitních funkcí. Prolaktin není produkován pouze hypofýzou, ale také periferním imunitním systémem. Cílem studie je rozšířit naše vědomosti o aktivaci exprese periferního prolaktinu a přispět tak k objasnění jeho role na periférii.

• MeSH
• bakteriální infekce MeSH
• cytokiny MeSH
• exprese genu MeSH
• fyziologický stres MeSH
• hematologické nádory MeSH
• hydrokortison MeSH
• imunosupresivní léčba MeSH
• monocyty MeSH
• prolaktin MeSH
• sepse MeSH
• toll-like receptor 2 MeSH
• zánět MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• infekční lékařství
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The project outlines the role of CD14+CD16+ monocyte subpopulation in transplant reactions against the kidney allograft and in antibody mediated rejection. Monitoring of peripheral monocyte subpopulations will be performed with respect to clinical parameters, occurence of allospecific antibodies, and immunosupressive schedule. The determination of T regulatory cells (CD4+CD25+Foxp3+) and gene polymorphisms of CD16 molecule will be assessed. In a model of human monocyte/macrophage cell line THP-1, the expression of CD14+CD16+ phenotype will be induced by cytokines and the genotype will be assessed with respect to chemokine and cytokine production. Cytokines from IL-1 family (IL-1beta, IL-18, IL-33) and TNF alfa and furthermore, cytokines associated withTh1/Th2/Th17 polarization (IFN gama, IL-4, IL-13, IL-23, IL-17) will be used as stimuli. The project may contribute to better monitoring of kidney transplant patients and new information on cytokine interactions in mononuclear phagocyte differentiation.

Projekt vymezuje úlohu monocytární subpopulace CD14+CD16+ v transplantačních reakcích proti ledvinnému alotransplantátu a u protilátkové rejekce. Monitorováno bude zastoupení subpopulací monocytů v periferní krvi osob po transplantaci ledviny s ohledem na klinický stav, výskyt alospecifických protilátek a imunosupresivní režim. Stanoveno bude také zastoupení T regulačních buněk (CD3+CD25+Foxp3+) a vyšetřeny genové polymorfismy CD16 molekuly. Na modelu lidské monocyto-makrofágové line THP-1 bude pomocí cytokinů indukována a dále modulována exprese CD14+CD16+ fenotypu s ohledem na současné změny v cytokinovém a chemokinovém genotypu. Ke stimulaci budou využity prozánětlivé cytokiny z rodiny IL-1 (IL-1beta, IL-18, IL-33) a TNF alfa a dále i cytokiny související s koncepcí Th1/Th2/Th17 polarizace (IFN gama, IL-4, IL-13, IL-23, IL-17). Projekt může přispět ke kvalitnějšímu monitorování pacientů po transplantaci ledviny a novým poznatkům o cytokinových interakcích při diferenciaci mononukleárních fagocytů.

• MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• CD antigeny analýza   krev   MeSH
• cytokiny analýza   MeSH
• interleukin-12 sekrece   MeSH
• monitorování imunologické MeSH
• NF-kappa B fyziologie   MeSH
• podskupiny lymfocytů MeSH
• prekurzorové buňky monocytů-makrofágů MeSH
• rejekce štěpu MeSH
• TNF-alfa sekrece   MeSH
• transplantace ledvin imunologie   MeSH
• výběr pacientů MeSH
• zkracování telomer MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• nefrologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Using molecular biological techniques we will study -765GC polymorphisms in COX-2 gene and their possible impact on monocytic COX-2 phenotype in diabetic patients with nephropathy in comparison with patients without DN and healthy subjects.

S využitím molekulárně biologických metodik bude studován polymorfismus -765GC genu COX-2 a jejich možný vliv na monocytární fenotyp COX-2 u diabetiků obou typů s nefropatií ve srovnání s pacienty bez této komplikace a zdravými subjekty.

• MeSH
• albuminurie MeSH
• cyklooxygenasa 2 MeSH
• diabetické nefropatie etiologie   MeSH
• komplikace diabetu MeSH
• monocyty MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• proteinurie MeSH
• regulace genové exprese MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The project is designed to analyze relationships among Dipeptidyl peptidase-IV activity and/or structure homologous molecules, their biologically active substrates and related receptors, relevant for development, progression, diagnostics and therapy of rheumatoid arthritis

Projekt hledá funkční vztahy mezi Dipeptidylpeptidase-IV aktivitou a/nebo strukturou homologními molekulami, jejich biologicky aktivními substráty a odpovídajícími receptory, relevantní pro vznik, rozvoj, diagnostiku a léčbu revmatoidní artritidy

• MeSH
• chemokin CXCL12 MeSH
• dipeptidylpeptidasa 4 MeSH
• dipeptidylpeptidasy a tripeptidylpeptidasy MeSH
• ELISA MeSH
• monocyty MeSH
• mononukleární fagocytární systém krevní zásobení   MeSH
• osteoartróza MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• revmatoidní artritida diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• synoviální tekutina cytologie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• revmatologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR