Expozice roztoku insulinu UV zářením o vlnové délce 250 nm způsobuje v jeho struktuře přeměnudisulfidických skupin na volné SH skupiny, které mají vysokou afinitu pro značení 99m Tc. Množstvíkoncových SH závisí na době ozařování. HPLC analýza ukázala, že po ozařování insulinu (intenzitapřibližně 500 mW . cm 2 ) po dobu 15; 30; 60 a 120 min zůstává ve vzorcích 34%, 25%, 10% a 2%původního množství insulinu. Tyto hodnoty odpovídají množství fotoaktivací uvolněných SH skupin,které bylo stanoveno použitím Ellmanova činidla. Produkt degradovaného vepřového insulinu bylznačen 99m Tc použitím redox polymeru RP G25 IDA při pH 6,8–7,9 po dobu 15 min při teplotěmístnosti. Radiochemická čistota značeného produktu byla vyšší než 96 %. Insulin a jeho degradačníprodukty byly hodnoceny vylučovací chromatografií. Biodistribuce značených látek v laboratorníchzvířatech vykazovala nejvíce radioaktivity v ledvinách a játrech. U potkanů s experimentálně vyvo-laným diabetem nebyla zjištěna specifická biodistribuce těchto značených degradačních produktů.
Irradiation with UV light at a wavelength of 250 nm allows to convert disulphidic groups in thestructure of insulin to free SH groups with high affinity to direct labelling with 99m Tc. The amountof terminal SH groups depends on irradiation time. HPLC analysis revealed that while 34% of theoriginal amount of insulin was present after 15 minutes of irradiation (approx. intensity of500 mW.cm 2 ), the amounts were 25%, 10%, and 2% after 30; 60, and 120 minutes, respectively. Theseresults correlate with the amount of SH groups released by photoactivation measured using Ellman’sreagent. The product of the degraded porcine insulin was labelled with 99m Tc using the redox polymerRP G25 IDA under the following conditions: pH 6.8–7.9, labelling time 15 minutes, room tempera-ture. Radiochemical purify of the labelled product was higher than 96 %. Insulin and products ofits degradation were evaluated by means of size exclusion chromatography (SEC). The biodistribu-tion of the labelled substances in laboratory animals showed activity mostly in the kidneys and liver.No specific biodistribution of the labelled products was observed in rats with experimentally induceddiabetes.
V práci se hodnotí vliv fotoaktivace na dialyzát lidských leukocytů, na jejich značení techneciem(99mTc) a na biodistribuci v potkanech. Dialyzát lidských leukocytů byl vystaven UV záření vlnové délky 254 nm a značen techneciem(99mTc) redukcí technecistanu(99mTc) chloridem cínatým. Radiochemická čistota se hodnotila chromatografií na papíře. Biodistribuce značeného dialyzátu lidských leukocytů v potkanech s experimentálně vyvolaným zánětem se zjišťovala měřením aktivity izolovaných orgánů nebo planárním zobrazením scintílační kamerou 4 hod. po podání. Fotoaktivace mírně zvyšuje počet volných SH skupin v dialyzátu leukocytů. Bylo dosaženo vysoké účinnosti značení (97 %) a stability 8 hod. po označení (94 %). Vliv ozařování na účinnost značení i stabilitu se neprokázal. Fotoaktivace přízrávě ovlivňuje distribuci 99mTc-dialyzátu lidských leukocytů do experimentálního zánětu měřením izolovaných orgánů potkanů, avšak na scintigramech není depozice do zánětlivých lézí výrazná.
The paper evaluates the effect of photoactivation on dialysate of human leukocytes, on their labelling with technetium(99mTc), and onbiodistributioninrats. Didysate of human leukocytes was irradiated with UV light at 254 nm and labelled with technetium(99mTc) by reduction of pertechnetate( 99mTc) with stannous chloride. Radiochemical purity was evaluated using paper chromatography. The biodistribution of labelled dialysate of human leukocytes in rats with experimentally induced infiammation was determined by counting the activity of isolated organs or by planar gamma camera imaging 4 hours after adininistration. Photoactivation mildly raises the number of free SH groups in leukocyte dialysate. A high labelling efficacy (97 %) and stability 8 hours after labelling (94 %) was achieved. An effect of radiation on labelling efficacy and stability was not demonstrated. Photoactivation has a beneficial effect on the distribution of 99mTc dialysate of human leukocytes into experimental inflanunation as measured in isolated organs of rats; however, deposition into inflammatory lesions is not quite sufficient for scintigraphic imaging.
