We aimed to establish an efficient RNA interference (RNAi) system in the industrially important filamentous fungus Trichoderma koningii using the DsRed protein as a reporter of the silencing process. To accomplish this, a DsRed expression cassette was transformed into T. koningii, and a recombinant strain that stably expressed DsRed was obtained. Next, a vector-directing expression of a DsRed hairpin RNA was constructed and transformed into the T. koningii recipient strain. Approximately 79 % of transformants displayed a decrease in DsRed fluorescence, and expression of DsRed in some transformants appeared to be fully suppressed. Characterization of randomly selected transformants by genomic DNA PCR analysis, real-time PCR quantification, and western blot confirmed downregulation of gene expression at different levels. The RNA silencing approach described here for T. koningii is effective, and the DsRed reporter gene provides a convenient tool for identification of silenced fungal transformants by their DsRed fluorescence compared to the control strain. The results of this study demonstrate the power of RNAi in T. koningii, which supports the use of this technology for strain development programs and functional genomics studies in industrial fungal strains.
- MeSH
- Fluorescence MeSH
- Gene Knockdown Techniques methods MeSH
- Real-Time Polymerase Chain Reaction MeSH
- Luminescent Proteins analysis genetics MeSH
- RNA, Small Interfering genetics MeSH
- Genetics, Microbial methods MeSH
- Recombination, Genetic MeSH
- Genes, Reporter MeSH
- RNA Interference * MeSH
- Gene Expression Profiling MeSH
- Transformation, Genetic MeSH
- Trichoderma genetics MeSH
- Blotting, Western MeSH
- Publication type
- Journal Article MeSH
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
Na stanovování cílů jakosti, jejího udržování, kontrolu a sledování je vypracována a používána řada sofistikovaných metod včetně statistických. V textu jsou popsány některé z těchto nástrojů, které patří k základní výbavě moderního managementu. Uvedené postupy jsou priblíženy na konkrétních příkladech i pro oblast transfuzní služby. Většina popsaných nástrojů má široké uplatnění v celé teorii a praxi řízení, nejen managementu jakosti. Základem kvalitního řízení jakosti je mít stanoveny cíle jakosti a politiku jakosti. Jsou uvedeny výhody týmové práce, je stručně popsán Demingův cyklus. Základním nástrojem pro systematické a nezávislé zkoumání dosažené úrovně jakosti jsou její prověrky - audity. Popsáno je sedm jednoduchých nástrojů na zlepšování jakosti: 1. vývojový diagram, 2. záznamníky, 3. histogram, 4. Ishikawův diagram, 5. Paretův graf, 6. bodový (korelační) diagram a 7. regulační diagram (statistická regulace procesu).
For assessment of objectives of quality, its maintenance, control and monitoring a number of sophisticated methods incl. statistical ones were elaborated and are used. The author describes some of these tools which belong to the basic equipment of modem management. The mentioned procedures are explained on actual examples incl. the transfusion service. The majority of the described tools has a wide application in the whole theory and practice of management, not only quality control. „The basis of high standard of quality management is to establish the quality aims and quality policy." The author mentions the advantages of team work, describes briefly Deming's cycle. The basic tool for systematic and independent investigation of the achieved quality level are audits. The author describes seven simple tools for improvement of quality: 1. developmental diagram, 2. recorders, 3. histogram, 4. Ishikawa diagram, 5. Pareťs graph, 6. point (correlation) diagram and 7. regulation diagram (statistical regulation of the process).
Androgen receptor (AR) expression in prostate cancer (CaP) cells varies due to the multiple changes including epigenetic modifications such as DNA methylation and histone deacetylation. DNA methyltransferase and histone deacetylase inhibitors are promising for the treatment of CaP. The aim of our study was to analyze the 5-aza-2'-deoxycytidine (Aza‑dC) and sodium butyrate (NaB) effects on CaP cells with modified AR gene expression. The androgen-independent human prostate cancer cell lines PC3 (lacking a functional AR) and DU145 (strongly limited expression due to methylations in the AR gene) were used. PCR of bisulfite-modified DNA and RT-PCR with bisulfite-sequencing were used for AR gene analysis of DU145 and PC3 cells following their treatment with Aza-dC and/or NaB. Re-acetylated histones around the AR gene were detected by conventional PCR of immunoprecipitated DNA obtained from treated cells. In both cell lines without the AR expression, the combined treatment was followed with significant decrease of cell viability. The co-treatment of DU145 cells caused site-specific demethylation in the AR promoter region followed by gene re-expression and increased acetylation in histones H3 and H4. The co-treatment with Aza-dC and NaB was the most effective in demethylation and re-expression of the AR gene. In the AR gene promoter, the location and density of deme-thylated CpGs indicated the existence of distinct promoter hot spot that could be a target of AR gene inactivation therapy of CaP patients during androgen deprivation.
- MeSH
- 5' Untranslated Regions MeSH
- Acetylation drug effects MeSH
- Receptors, Androgen biosynthesis genetics metabolism MeSH
- Androgens genetics metabolism MeSH
- Azacitidine analogs & derivatives pharmacology MeSH
- DNA genetics MeSH
- Histone Deacetylases genetics metabolism MeSH
- Histones genetics metabolism MeSH
- Histone Deacetylase Inhibitors pharmacology MeSH
- Butyric Acid pharmacology MeSH
- Humans MeSH
- Methyltransferases antagonists & inhibitors genetics metabolism MeSH
- DNA Methylation drug effects MeSH
- Cell Line, Tumor MeSH
- Prostatic Neoplasms, Castration-Resistant drug therapy enzymology genetics metabolism MeSH
- Promoter Regions, Genetic drug effects genetics MeSH
- Cell Survival drug effects genetics MeSH
- Check Tag
- Humans MeSH
- Male MeSH
- Publication type
- Journal Article MeSH
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
... 67 -- Potřeba závazku organizace ve vztahu к informačním technologiím 69 -- Potřeba organizačních standardů ... ... Práce se statistickými vzorky 313 -- Six Sigma 315 -- Testovaní 320 -- Moderní řízení kvality 322 -- Deming ... ... -- Pochopení komunikačních potřeb skupin a jednotlivců 403 -- Jak sdělovat špatné zprávy 404 -- Stanovení ...
Vydání 1. 632 stran : ilustrace ; 24 cm
Řízení projektů je jedním z nejdůležitějších, přitom však nejobtížnějších manažerských úkolů - a v oblasti informačních technologií to platí dvojnásob. Proslulá kniha zkušené autorky se zabývá celým životním cyklem softwarového projektu a přináší neocenitelné rady, návody, postupy a znalosti z praktického vývoje, které zlevní, urychlí a zefektivní průběh a dodání vašich projektů.
- Conspectus
- Management. Řízení
- NML Fields
- management, organizace a řízení zdravotnictví
... hypotézy 210 -- 7.11 Určení hladiny významnosti 212 -- 7.12 Identifikace oblasti zamítnutí 215 -- 7.13 Stanovení ... ... 503 -- Rejstřík -- Analýza citlivosti 363,365 -- Binomické tabulky 151 -- Bod zvratu 40 -- Cena -- Demingova ... ... Interpolace 324 Management -- Interval 55 jakosti 243 spolehlivosti 204, 202, 205, 208 projektový 401 standardní ...
Vyd. 1. 507 s. : il. ; 23 cm
Výklad matematických a statistických metod, vycházející z potřeb manažerů řešit racionálně ekonomické, prognostické, kapacitní a jiné problémy.
- Keywords
- management,
- MeSH
- Mathematical Computing MeSH
- Organization and Administration MeSH
- Entrepreneurship MeSH
- Likelihood Functions MeSH
- Publication type
- Textbook MeSH