Na(+)/Ca(2+) exchanger (NCX) proteins operate through the alternating access mechanism, where the ion-binding pocket is exposed in succession either to the extracellular or the intracellular face of the membrane. The archaeal NCX_Mj (Methanococcus jannaschii NCX) system was used to resolve the backbone dynamics in the inward-facing (IF) and outward-facing (OF) states by analyzing purified preparations of apo- and ion-bound forms of NCX_Mj-WT and its mutant, NCX_Mj-5L6-8. First, the exposure of extracellular and cytosolic vestibules to the bulk phase was evaluated as the reactivity of single cysteine mutants to a fluorescent probe, verifying that NCX_Mj-WT and NCX_Mj-5L6-8 preferentially adopt the OF and IF states, respectively. Next, hydrogen-deuterium exchange-mass spectrometry (HDX-MS) was employed to analyze the backbone dynamics profiles in proteins, preferentially adopting the OF (WT) and IF (5L6-8) states either in the presence or absence of ions. Characteristic differences in the backbone dynamics were identified between apo NCX_Mj-WT and NCX_Mj-5L6-8, thereby underscoring specific conformational patterns owned by the OF and IF states. Saturating concentrations of Na(+) or Ca(2+) specifically modify HDX patterns, revealing that the ion-bound/occluded states are much more stable (rigid) in the OF than in the IF state. Conformational differences observed in the ion-occluded OF and IF states can account for diversifying the ion-release dynamics and apparent affinity (Km ) at opposite sides of the membrane, where specific structure-dynamic elements can effectively match the rates of bidirectional ion movements at physiological ion concentrations.

• MeSH
• apoproteiny chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• archeální proteiny chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• buněčná membrána chemie   MeSH
• cystein chemie   MeSH
• interakční proteinové domény a motivy MeSH
• inzerční mutageneze MeSH
• kinetika MeSH
• konformace proteinů MeSH
• ligandy MeSH
• Methanocaldococcus metabolismus   MeSH
• molekulární modely * MeSH
• mutace MeSH
• peptidové fragmenty chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• pumpa pro výměnu sodíku a vápníku chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• rekombinantní proteiny chemie   metabolismus   MeSH
• sodík metabolismus   MeSH
• stabilita proteinů MeSH
• substituce aminokyselin MeSH
• vápník metabolismus   MeSH
• vazebná místa MeSH
• vodík-deuteriová výměna MeSH
• výpočetní biologie MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• srovnávací studie MeSH

Neznámý široké veřejnosti, velmi známý v oboru výchovy v přírodě. Příspěvek je o Kurtu Hahnovi, jeho životě a výchovné filozofii, na které staví mnoho organizací na celém světě. Kurt Hahn vytvořil alternativní formu výchovy a osobnostního rozvoje (nejen) s využitím pohybových aktivit v přírodě. Jeho filozofie dosud přežila 85 let a ovlivnila milióny studentů. V úvodu je načrtnut život Kurta Hahna, následován principy jeho výchovy. Jejich aplikace je představena na několika projektech a organizacích, které využívají Hahnovy myšlenky. Na konec zůstává otázka, jestli jeho filozofie má uplatnění i v dnešní společnosti.

Unknown to the general public, very well known in the field of outdoor education. The contribution is about Kurt Hahn, his life and his educational philosophy that has served as a base for number of organizations around the world. He created an alternative form of education and personal development utilizing (not only) outdoor physical activities. His philosophy has survived for 85 years by now and touched millions of lives of students involved. In the beginning, the life of Kurt Hahn is outlined, followed by principles of his education. lťs application is introduced through numerous projects and organizations using Hahn's ideas. In the end, question is raised, whether his philosophy can be used in today's society.

• Klíčová slova
• výchova, Outward Bound,
• MeSH
• příroda MeSH
• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH
• biografie MeSH

• O autorovi
• Kahn, Kurt Autorita

• Klíčová slova
• hnutí "Outward Bound", prožitková pedagogika, zvládání stresu,
• MeSH
• duševní zdraví MeSH
• experimentální hry MeSH
• lidé MeSH
• pohybová aktivita MeSH
• psychický stres prevence a kontrola   MeSH
• relaxace * psychologie   MeSH
• vyučování * pracovní síly   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

In analogy with many other proteins, Na(+)/Ca(2+) exchangers (NCX) adapt an inverted twofold symmetry of repeated structural elements, while exhibiting a functional asymmetry by stabilizing an outward-facing conformation. Here, structure-based mutant analyses of the Methanococcus jannaschii Na(+)/Ca(2+) exchanger (NCX_Mj) were performed in conjunction with HDX-MS (hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry) to identify the structure-dynamic determinants of functional asymmetry. HDX-MS identified hallmark differences in backbone dynamics at ion-coordinating residues of apo-NCX_Mj, whereas Na(+)or Ca(2+) binding to the respective sites induced relatively small, but specific, changes in backbone dynamics. Mutant analysis identified ion-coordinating residues affecting the catalytic capacity (kcat/Km), but not the stability of the outward-facing conformation. In contrast, distinct "noncatalytic" residues (adjacent to the ion-coordinating residues) control the stability of the outward-facing conformation, but not the catalytic capacity. The helix-breaking signature sequences (GTSLPE) on the α1 and α2 repeats (at the ion-binding core) differ in their folding/unfolding dynamics, while providing asymmetric contributions to transport activities. The present data strongly support the idea that asymmetric preorganization of the ligand-free ion-pocket predefines catalytic reorganization of ion-bound residues, where secondary interactions with adjacent residues couple the alternating access. These findings provide a structure-dynamic basis for ion-coupled alternating access in NCX and similar proteins.

• MeSH
• archeální proteiny chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• Escherichia coli genetika   metabolismus   MeSH
• exprese genu MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• interakční proteinové domény a motivy MeSH
• iontový transport MeSH
• katalytická doména MeSH
• koncentrace vodíkových iontů MeSH
• Methanocaldococcus chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• molekulární modely MeSH
• pumpa pro výměnu sodíku a vápníku chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• rekombinantní proteiny chemie   genetika   metabolismus   MeSH
• sbalování proteinů MeSH
• sekundární struktura proteinů MeSH
• sekvence aminokyselin MeSH
• sodík chemie   metabolismus   MeSH
• vápník chemie   metabolismus   MeSH
• vazba proteinů MeSH
• vodík-deuteriová výměna MeSH
• vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Research Support, U.S. Gov't, Non-P.H.S. MeSH

Multidrug resistance presents one of the most important causes of cancer treatment failure. Numerous in vitro and in vivo data have made it clear that multidrug resistance is frequently caused by enhanced expression of ATP-binding cassette (ABC) transporters. ABC transporters are membrane-bound proteins involved in cellular defense mechanisms, namely, in outward transport of xenobiotics and physiological substrates. Their function thus prevents toxicity as carcinogenesis on one hand but may contribute to the resistance of tumor cells to a number of drugs including chemotherapeutics on the other. Within 48 members of the human ABC superfamily there are several multidrug resistance-associated transporters. Due to the well documented susceptibility of numerous drugs to efflux via ABC transporters it is highly desirable to assess the status of ABC transporters for individualization of treatment by their substrates. The multidrug resistance associated protein 1 (MRP1) encoded by ABCC1 gene is one of the most studied ABC transporters. Despite the fact that its structure and functions have already been explored in detail, there are significant gaps in knowledge which preclude clinical applications. Tissue-specific patterns of expression and broad genetic variability make ABCC1/MRP1 an optimal candidate for use as a marker or member of multi-marker panel for prediction of chemotherapy resistance. The purpose of this review was to summarize investigations about associations of gene and protein expression and genetic variability with prognosis and therapy outcome of major cancers. Major advances in the knowledge have been identified and future research directions are highlighted.

• MeSH
• chemorezistence genetika   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetná léková rezistence genetika   MeSH
• nádory farmakoterapie   genetika   metabolismus   patologie   MeSH
• prognóza MeSH
• proteiny spojené s mnohočetnou rezistencí k lékům genetika   metabolismus   MeSH
• xenobiotika terapeutické užití   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

Studie se zabývá významem používání bezpečnostních pásů a zraněním členů osádek osobních automobilů při silničních dopravních nehodách. Autoři se na podkladě dlouhodobé praxe domnívají, že by používání bezpečnostních pásů snížilo morbiditu a mortalitu členů osádek osobních automobilů při silničních dopravních nehodách. V rámci kvantitativního sociologického výzkumu byla použita metoda přímého pozorování použití bezpečnostních pásů řidičem, spolujezdcem na předním sedadle a spolucestujícími na zadních sedadlech za sebou projíždějících osobních automobilů. Byla vybrána dvě stanoviště v centru krajského města České Budějovice: - Ulice Na Sadech a ulice Pražská. Pozorování byla provedena v dopoledních hodinách pracovního dne a v dopoledních hodinách v sobotu, tedy v době, kdy je provoz osobních automobilů poměrně silný; - Stanoviště na výpadové silnici č. I/34 v okrajové části města České Budějovice ve směru na Brno. Pozorování probíhala ve stejném období jako pozorování první. Použité metody - sekundární a obsahová analýza dat pro hodnocení vlivu použití či nepoužití bezpečnostních pásů na rozsah zranění členů osádek osobních automobilů při silničních dopravních nehodách. V této části výzkumu bylo využito znaleckých posudků soudních znalců z oboru soudního lékařství a z oboru dopravy a konstrukce motorových vozidel a spisových materiálů silničních dopravních nehod. Analyzovány byly za sebou jdoucí dopravní nehody osobních automobilů, při kterých šlo o čelní náraz nebo náraz jemu blízký. Dále byla zkoumána energeticky ekvivalentní rychlost (dále jen EES), rozsah a charakter zranění řidiče a zda byly, či nebyly použity bezpečnostní pásy. Na použití, či nepoužití bezpečnostních pásů je usuzováno nejen podle svědeckých výpovědí, ale zejména podle typického poškození (natavení vláken) bezpečnostního pásu v místě jeho ukotvení charakteru spáleniny, nebo podle uskřípnutí bezpečnostního pásu zdeformovanou karosérií v poloze v momentě nárazu. Utrpěná zranění byla rozdělena podle běžné soudní praxe do tří kategorií: - bez poruchy zdraví, tj. bez zranění, nebo se zraněním s dobou léčení do 7 dnů, - lehké zranění, tj. s dobou léčení více než 7 dnů, nejvýše však 6 týdnů, - zranění těžké (s dobou léčení více než 6 týdnů) nebo smrtelné. Byla sledována frekvence použití bezpečnostních pásů a vliv bezpečnostních pásů na zranění osádek osobních automobilů. První soubor byl tvořen členy osádek 1756 osobních automobilů, v nichž bylo přepraveno celkem 2767 osob, tj. včetně řidičů. Druhý soubor tvořilo 200 řidičů – účastníků dopravních nehod, kdy náraz byl čelní nebo blízký čelnímu a byly známy výše uvedené charakteristiky (energeticky ekvivalentní rychlost, rozsah rozdělen do 7 tříd podle nárazové EES a do každé třídy byl zařazen stejný počet připoutaných a nepřipoutaných řidičů. Bylo zjišťováno, kolik řidičů připoutaných neutrpělo zranění, utrpělo zranění lehké, nebo těžké či zemřelo v porovnání s řidiči nepřipoutanými. Použití bezpečnostních pásů snižuje počet zraněných i zemřelých řidičů osobních automobilů při dopravních nehodách. Testem chí kvadrát byl zjištěn statisticky významný rozdíl mezi souborem připoutaných a nepřipoutaných řidičů podle závažnosti zranění (p < 0,01).

The target of the study is aimed to the significance of using safety belts and of injuries of the passengers of passenger cars in road accidents. The authors assume on the base of long-term practice that using of safety belts would reduce accident rate and mortality of car passengers in road accidents. In the scope of the quantitative sociologic research, the method of direct observation of use of safety belts by the driver, front seat fellow traveller and back seat fellow travellers in passenger cars passing in succession. Two posts in the centre of the county town of České Budějovice were selected: - The street Na sadech and the street Pražská. The observations were carried out in workday morning hours and in Saturday morning hours, i.e. in times when the passenger car traffic is quite heavy; - The post at the outward-bound road No. I/34 in the peripheral part of the city of České Budějovice towards Brno. The observations took place in the same time as the above mentioned observations. The secondary methods and the content analysis of data assessed of the impact of use or nonuse of safety belts on the extent of injuries of the passengers of cars in road accidents. This part of the research used expert opinions worked out by experts appointed by court in the branch of forensic medicine and in the branch of traffic and construction of motor vehicles and records of road accidents. Accidents of passenger cars, going in succession, in which there were frontal impacts or similar impacts, were analyzed. Further there were researched the following points: energetically equivalent speed (hereafter only “EES”), extent and character of injury of the driver and whether safety belts were or were not used. The use or non-use of safety belts is gathered not only from testimonies, but particularly from the typical damage (melting of fibres) of the safety belt in the spot of its anchoring, the character of the burn or the squeeze of the safety belt by the deformed body of the car in the position in the moment of the impact. We divided the sustained injuries in three categories according to common forensic practice: - without health disorder, i.e. without injury, or with an injury with the time of treatment under 7 days, - light injury, i.e. with the time of treatment over 7 days, but 6 weeks at most, - severe injury (with the time of treatment over 6 weeks) or fatal. The frequency of use of safety belts and the influence of safety belts on the injuries of car passengers were observed. The first complex consisted of passengers of 1756 passenger cars in which 2767 persons altogether, i.e. including drivers, were transported. The second complex consisted of 200 drivers – road accident participants, where there was a frontal or a similar impact and the above mentioned characteristics were known (energetically equivalent speed, extent and character of the driver’s injury and whether the safety belts were or were not used). The complex was divided in 7 classes according to the impact EES, and the same number of drivers with and without the belts fastened were included in each class. It was researched how many drivers with the belts fastened did not sustain any injury, sustained a light or a severe injury or died in comparison with the drivers without the belts fastened. The use of safety belts reduces the number of injured and dead drivers of passenger cars in road injuries. A statistically significant difference between the complex of drivers with and without their belts fastened according to the seriousness of the injury with the help of chi square (p smaller than 0,01).

• MeSH
• bezpečnostní pásy sedadel normy   statistika a číselné údaje   využití   MeSH
• dopravní nehody mortalita   prevence a kontrola   MeSH
• financování organizované MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• lidé MeSH
• morbidita MeSH
• mortalita MeSH
• prevence úrazů metody   MeSH
• primární prevence metody   MeSH
• sociologie metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• úrazy a nehody mortalita   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH