Q131452027
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Lymeská borrelióza (LB) je způsobena bakterií Borrelia burgdorferi s. l.; tento komplex obsahuje alespoň 21 genodruhů. Pět druhů borrelií má již prokázanou patogenitu a tři další byly alespoň jednou izolovány z lidských vzorků. V České republice se jedná o závažný zdravotní problém, neboť ročně je hlášeno více než 4000 případů onemocnění LB, mnoho dalších však pravděpodobně není diagnostikováno. Důležitý pro průběh nemoci je i genodruh původce onemocnění, neboť různé genodruhy mají odlišnou patogenitu a tkáňovou afinitu. Alternativní metodou přímé diagnostiky LB je průkaz spirochét v lidských vzorcích kultivací ve speciálním tekutém médiu. Tato metoda představuje „zlatý standard“ pro potvrzení diagnózy LB. Pro svou nízkou senzitivitu, časovou i finanční náročnost se však metoda využívá převážně pro výzkumné účely.
Lyme borreliosis (LB) is caused by the bacterium Borrelia burgdorferi s.l., with the s.l. complex consisting of at least 21 genospecies. Five species of Borrelia have already proven pathogenic and three other were isolated at least once from human samples. In the Czech Republic, LB is a serious health problem, with about 4,000 cases reported per year and probably many more cases remaining undiagnosed. The genospecies of the causative agent is significant since various genospecies may differ in pathogenicity and tissue affinity. An alternative to the direct diagnosis is the detection of live spirochetes from patients’ samples by culturing them in a special liquid medium. This method is considered the gold standard for the confirmation of an LB diagnosis. However, it has low sensitivity and is time-consuming and expensive, so it is mostly used only for research purposes.
- MeSH
- kultivační techniky metody MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc * diagnóza epidemiologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Cíl: Zjistit výskyt potenciálně patogenních druhů babesií pro člověka v klíšťatech a v krvi psů a jelenů ve vybraných regionech České republiky. Prevalenci Babesia spp. v klíšťatech porovnat s výskytem jiných patogenů přenášených klíšťaty jako Borrelia spp., Anaplasma spp., Rickettsia spp. Materiál a metody: Vzorky klíšťat byly jednotlivě homogenizovány, ze vzorků klíšťat a krve živočichů provedena izolace DNA. Detekce Babesia spp. byla stanovena metodou PCR 18S rRNA genu a sekvenační analýzou PCR produktů určeny jednotlivé druhy babesií. Výsledky: V letech 2014–2016 byla analyzována klíšťata a krev psů a jelenů na různých místech České republiky. Ze souboru 675 klíšťat Ixodes ricinus dosahovala pozitivita na přítomnost Babesia spp. hodnot od 0,0 do 3,3 %. Sekvenační analýzou byly v klíšťatech identifikovány druhy Babesia venatorum, Babesia microti (patogenní druhy pro člověka) a druh Babesia capreoli. Prevalence Babesia spp. v klíšťatech byla v porovnání s výskytem jiných patogenů jako Borrelia burgdorferi s. l. (29,3 %), Anaplasma phagocytophilum (4,9 %) nižší a srovnatelná s Rickettsia spp. (1,6 %). U třetiny pozitivních klíšťat na babesie byla zjištěna koinfekce s Borrelia burgdorferi s. l. (B. venatorum – Borrelia garinii, Borrelia afzelii a B. microti – B. afzelii). Ze 109 vzorků krve psů bylo 3,7 % pozitivních na Babesia spp. s výskytem druhů Babesia gibsoni a Babesia vulpes. Z 50 vzorků krve jelenů z přírodního ekosystému dosahovala pozitivita 4,0 %. Identifikován byl druh Babesia divergens, nejvíce patogenní druh Babesia spp. pro člověka. Z 80 vzorků krve jelenů chovaných na farmách bylo pozitivních 5,0 % s výskytem druhu Babesia odocoilei. Nukleotidové sekvence babesií způsobujících humánní babesiózu byly zaslány do genové banky a přijaty pod čísly ON892053 (B. venatorum), ON892061 (B. microti), ON892067 (B. divergens). Závěr: Metodou PCR 18S rRNA genu a sekvenací amplikonů byly na území České republiky detekovány tři druhy babesií patogenních pro člověka: B. divergens, B. venatorum, B. microti. Výskyt těchto druhů babesií znamená potenciální riziko onemocnění babesiózou, zejména pro asplenické a imunokompromitované pacienty. Zjištěné koinfekce s Borrelia burgdorferi s. l. mohou být příčinou komplikovaného průběhu onemocnění.
Aim: To determine the occurrence of species of Babesia potentially pathogenic for humans in ticks and in the blood of dogs and deer in selected regions of the Czech Republic. To compare the prevalence of Babesia spp. in ticks with that of other tick-borne pathogens, such as Borrelia spp., Anaplasma spp., and Rickettsia spp. Material and Methods: Tick samples were individually homogenized. DNA was isolated from tick samples and animal blood. The detection of Babesia spp. was based on PCR of the 18S rRNA gene, and the identification to the species level was done by sequencing analysis of the PCR products. Results: In 2014–2016, ticks and blood of dogs and deer collected in various areas of the Czech Republic were analyzed. In a set of 675 Ixodes ricinus ticks, the positivity rate for Babesia spp. varied from 0.0 to 3.3 %. The species Babesia venatorum, Babesia microti (both pathogenic for humans), and Babesia capreoli were identified in ticks by sequencing analysis. The prevalence of Babesia spp. in ticks compared to that of other pathogens such as Borrelia burgdorferi s. l. (29.3 %) or Anaplasma phagocytophilum (4.9 %) was lower and comparable to that of Rickettsia spp. (1.6 %). Co-infection with Borrelia burgdorferi s.l (B. venatorum – Borrelia garinii, Borrelia afzelii, and B. microti – B. afzelii) was found in a third of Babesia spp. positive ticks. Out of 109 dog blood samples, 3.7 % were positive for Babesia spp., specifically Babesia gibsoni and Babesia vulpes. Of 50 blood samples of wild deer from the natural ecosystem, the positivity rate reached 4.0 %. The species Babesia divergens, a major human pathogen, was identified. Out of 80 blood samples from farmed deer, 5.0 % were positive for the species Babesia odocoilei. Nucleotide sequences of the agents causing human babesiosis were deposited in the gene bank under accession numbers ON892053 (B. venatorum), ON892061 (B. microti), and ON892067 (B. divergens). Conclusions: Using PCR of the 18S rRNA gene and amplicon sequencing, three species of Babesia causing human babesiosis were detected in the Czech Republic: B. divergens, B. venatorum, and B. microti. Babesia spp. pathogenic for humans pose a potential risk especially in asplenic and immunocompromised patients. The detected co-infections with Borrelia spp. can be the cause of a complicated course of the disease.
- MeSH
- Babesia mikrobiologie MeSH
- babezióza * epidemiologie krev přenos MeSH
- Borrelia burgdorferi MeSH
- diagnostické techniky molekulární metody MeSH
- klíšťata * mikrobiologie MeSH
- koinfekce diagnóza přenos MeSH
- krev mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- nemoci přenášené klíšťaty epidemiologie přenos prevence a kontrola MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody MeSH
- psi * mikrobiologie MeSH
- vysoká zvěř * krev mikrobiologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- psi * mikrobiologie MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
The aim of our study was to find out the optimal conditions for short-term storage of cerebrospinal fluid (CSF) samples for direct diagnosis of Lyme disease. A mixture of Borrelia-negative CSFs spiked with a defined amount of cultured Borrelia garinii was used. Borrelia stability was investigated over 7 days at four different temperatures [room temperature (RT), +4, -20 and -70 °C]. Quantitative changes in CSF Borrelia were measured by quantitative PCR (qPCR), and morphological changes in the spirochetes were observed by transmission electron microscopy (TEM). These qPCR results were statistically evaluated. We found +4 °C to be an optimal temperature for short-term storage of CSF samples intended for TEM observation. There was no significant difference between the temperatures tested in the average quantity of Borrelia measured by qPCR. On the contrary, electron optical diagnosis of frozen samples and samples stored at RT showed destructive morphological changes and decreased spirochete counts. Our results show that optimal conditions for the pre-analytical phase of investigation of one type of material can differ depending on the diagnostic method employed.
Babesióza patří mezi méně běžné, ale významné infekční onemocnění přenášené klíšťaty. Během posledních 50 let byl zaznamenán zvyšující se počet případů po celém světě, zvláště v USA. Severní část USA je endemickou oblastí, kde počet případů za poslední dekádu stoupl na 2 000 ročně. Původcem většiny těchto nákaz je v tomto regionu Babesia microti, parazit drobných hlodavců. V Evropě bylo od roku 1957 zaznamenáno 56 autochtonních případů lidské babesiózy. Většina těchto onemocnění byla způsobena druhem Babesia divergens, parazitem hovězího dobytka. Od roku 1992 bylo 13 případů nákazy B. microti importováno ze Severní Ameriky do Evropy. Onemocnění je závažné zejména pro splenektomované a imunokomprimované pacienty. Ačkoli nejvýznamnějším přenašečem infekce babesií v Evropě je klíště Ixodes ricinus, byl přenos infekce u řady pacientů způsoben krevní transfuzí, která pro oslabené jedince může končit fatálně. Diagnóza babesiózy se opírá o identifikaci intraerytrocytárních parazitů v krevním roztěru, detekcí DNA babesie testy PCR a stanovením protilátek sérologickými metodami a imunofluorescencí. Onemocnění se léčí antibiotiky (azithromycin, při těžkém průběhu clindamycin) a chininem. Zvýšený nárůst humánní babesiózy je dán nejen změnami klimatu a aktivity klíšťat, pobytem lidí v přírodě a zvýšenou migrací lidí, ale významnou úlohu zde hraje i rozvoj molekulárních metod a rostoucí povědomí o tomto onemocnění.
Babesiosis is a less common but important tick-borne infectious disease. Over the last 50 years, an increasing number of cases have been reported worldwide, especially in the USA. The northern part of the US is an endemic area where the incidence has risen to 2,000 cases per year in the last decade. Babesia microti, a parasite of small rodents, is the cause of most of these infections in that region. In Europe, 56 autochthonous cases of human babesiosis have been reported since 1957. Most of them were caused by the species Babesia divergens, a parasite of cattle. Since 1992, 13 cases of B. microti infection have been imported from North America into Europe. The disease is serious especially for splenectomised and immunocompromised patients. Although the most important vector of babesiosis in Europe is the tick Ixodes ricinus, infection was transmitted through blood transfusion in number of patients, which can be fatal for immunosuppressed patients. The diagnosis of babesiosis is based on the identification of intraerythrocytic parasites in a blood smear, PCR detection of Babesia DNA, and determination of antibodies by serology and immunofluorescence assays. The disease is treated with antibiotics (azithromycin or clindamycin in a severe course of the disease) and quinine. The increase in human babesiosis is not only due to climate change and tick activity, outdoor leisure activities, and increased human migration, but an important role is also played by improved molecular methods and growing awareness of the disease.
- MeSH
- Babesia microti mikrobiologie patogenita MeSH
- Babesia klasifikace mikrobiologie patogenita MeSH
- babezióza * diagnóza epidemiologie farmakoterapie mikrobiologie přenos MeSH
- incidence MeSH
- infekce přenášené vektorem MeSH
- klíště mikrobiologie parazitologie MeSH
- lidé MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
- Spojené státy americké MeSH
Lymeská borrelióza je nejrozšířenější onemocnění přenášené vektory. Hlavním vektorem lymeské borreliózy v Evropě je klíště Ixodes ricinus. Patogenem způsobujícím toto onemocnění je komplex gram-negativních spirochét Borrelia burgdorferi sensu lato. Onemocnění postihuje mnoho orgánů a projevuje se rozmanitými klinickými symptomy od nespecifických chřipkových symptomů a nejčastější kožní manifestace, erythema migrans, po pozdní kožní manifestace, zánět kloubů, neurologické symptomy, meningopolyneuritidua postižení srdce či oka. Diagnostika lymeské borreliózy je založena na sérologickém průkazu protilátek. Molekulární metody jsou pomocné a doplňující. V současné době není vakcína pro humánní účely k dispozici. Jedinou účinnou prevencí je používání repelentů, vhodného oděvu a obuvi při pobytu v přírodě. Důležitá je i prohlídka těla a rychlé odstranění klíštěte a následná dezinfekce místa zákusu.
Lyme borreliosis is the most common vector-borne disease in Europe. The main vector of Lyme borreliosis in Europe is the Ixodes ricinus tick. The causative agent is a gram-negative spirochete of the Borrelia burgdorferi sensu lato complex. The disease affects multiple organs and has a variety of clinical symptoms, from non-specific flu-like symptoms and the most common skin manifestation, erythema migrans, to skin lesions, large joint inflammation, neurological symptoms, meningopolyneuritis, and cardiac and/or eye involvement in the later stages. The diagnosis of Lyme borreliosis is based on serological antibody testing. Molecular methods are complementary to serology. For humans, there is currently no vaccine available against Lyme borreliosis. The only effective prevention is to wear insect repellents and suitable clothing and shoes when being outside. It is also very important to check the entire body for ticks after ending outdoor activity, to remove ticks as soon as found, and to disinfect the bite site.
- MeSH
- Borrelia izolace a purifikace MeSH
- diagnostické techniky molekulární metody MeSH
- imunoanalýza metody MeSH
- infekce bakteriemi rodu Borrelia * diagnóza imunologie MeSH
- klinické laboratorní techniky metody MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc * diagnóza imunologie MeSH
- sérologické testy metody MeSH
- western blotting metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- MeSH
- biopsie metody MeSH
- diagnostické techniky a postupy MeSH
- diagnostické techniky molekulární metody MeSH
- dospělí MeSH
- doxycyklin terapeutické užití MeSH
- ELISA metody MeSH
- erytém etiologie mikrobiologie MeSH
- fluorescenční protilátková technika nepřímá metody MeSH
- infekce bakteriemi rodu Borrelia diagnóza mikrobiologie MeSH
- kousnutí klíštětem ošetřování MeSH
- kožní manifestace MeSH
- kultivační techniky metody MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc * diagnóza patofyziologie přenos MeSH
- sérologické testy metody MeSH
- výsledek terapie MeSH
- western blotting metody MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- přehledy MeSH
