Beauverolides (beauveriolides) are abundant, biologically active cyclodepsipeptides produced by many entomopathogenic fungi, including those that are used as biopesticides. Beauverolides act as cholesterol acyltransferase inhibitors in humans; thus, their mode of action has been the subject of pharmacological and clinical research. The cost-effective analytical methods are needed for fast, routine laboratory analysis of beauverolides. We isolated beauverolides from the fungal strain Isaria fumosorosea PFR 97-Apopka and opened the rings of the isolated beauverolides using a pyridine alkaline medium. We separated fractions of cyclic and linearized beauverolides by thin-layer chromatography, and found the chloroform-acetate (9:1, v/v) and chloroform-acetonitrile-acetate (8:1:1, v/v/v) mobile phases, respectively, to be the most efficient. We examined all the fractions by liquid chromatography-mass spectrometry using ion trap and Orbitrap high resolution mass spectrometry. For rapid screening of the contents of cyclic, and, particularly, linearized beauverolides, we developed a novel analytical method that consisted of using capillary electrophoresis coupled with contactless conductivity detection. Furthermore, we improved the separation of the peptides by applying capillary micellar electrokinetic chromatography with the N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid:SDS:NaOH buffer, pH 9.8 as the background electrolyte. The described novel methods allow fast and cost-effective separation of chemically related groups of beauverolides.

• MeSH
• anticholesteremika chemie   izolace a purifikace   MeSH
• chromatografie kapalinová MeSH
• Cordyceps chemie   MeSH
• depsipeptidy chemie   izolace a purifikace   MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• lidé MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

• MeSH
• biologické markery analýza   MeSH
• cyklické peptidy analýza   chemie   metabolismus   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• hmotnostní spektrometrie s elektrosprejovou ionizací MeSH
• houby klasifikace   metabolismus   MeSH
• protony MeSH
• ribozomy metabolismus   MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH

• Klíčová slova
• beauverolidy, beauveriolidy,
• MeSH
• Alzheimerova nemoc farmakoterapie   patofyziologie   MeSH
• amyloidní beta-protein MeSH
• ateroskleróza farmakoterapie   patofyziologie   MeSH
• Beauveria metabolismus   MeSH
• cholesterolacyltransferasa antagonisté a inhibitory   fyziologie   MeSH
• cyklické peptidy terapeutické užití   MeSH
• depsipeptidy * terapeutické užití   MeSH
• fungální proteiny * biosyntéza   MeSH
• kalmodulin antagonisté a inhibitory   fyziologie   MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy patologie   účinky léků   MeSH
• myši MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• aminokyseliny analýza   MeSH
• Ascomycota MeSH
• cyklické peptidy chemie   MeSH
• spektrometrie hmotnostní - ionizace laserem za účasti matrice MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie MeSH

Beauverolides represent a group of fungal cyclotetradepsipeptides, with only recently recognized potential for human medicine. Reflecting recent preclinical data, this project focuses at the use of beauverolides in modulation of pathologies associated with human metabolic syndrome and with immune system dysregulation. Current massive application of beauverolides in agriculture and forestry raises also the question on potential adverse effects of these applications on the humans, which were never addressed in detail. Thus, we would like to also focus on the association of current use of beauverolides with adverse effects on humans. Beauverolides will be produced under a spectrum of diverse cultivation conditions, which will result in a diversification of their chemical composition. Obtained fungal products will be purified and biochemically characterized in detail, and tested using the battery of biological tests, including those involving human cell lines primary cell isolates. Besides that, the exact mechanisms of metabolisation of beauverolides will be addressed as well.

Reflektujíc nedávný objev potenciálního využití beauverolidů (cyklotetradepsipeptidů produkovaných entomopatogenními houbami) v lékařství, předkládaný projekt navrhuje výzkum beauverolidů z pohledu jejich využitelnosti pro ovlivnění patologických stavů spojených s metabolickým syndromem a s deregulací buněk imunitního systému. Dopady stávající masivní aplikace beauverolidů v zemědělství a lesnictví na člověka dosud nebyly studovány. Zároveň bychom tedy v rámci předkládaného projektu rádi zjistili, zda stávající způsoby využití beauverolidů nejsou spojeny s nežádoucími účinky na člověka. Prostřednictvím modifikací v kultivačních podmínkách zdrojových organismů předpokládáme produkci širokého spektra beauverolidů navzájem odlišného chemického složení, které budou přečištěny, podrobně biochemicky charakterizovány, a následně testovány pomocí baterie biologických testů na lidských buněčných liniích a primárních buněčných izolátech. Zkoumán bude i způsob metabolizace beauverolidů.

• MeSH
• Beauveria izolace a purifikace   MeSH
• depsipeptidy MeSH
• imunitní systém mikrobiologie   patologie   MeSH
• kultivované buňky mikrobiologie   MeSH
• lidé MeSH
• metabolický syndrom mikrobiologie   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• mikrobiologie, lékařská mikrobiologie
• botanika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR