Edukační publikace popisuje strukturu protilátek, jednotlivé fragmenty, prostorovou fixaci domén, panty, úlohu disulfidi-ckých můstků, β-vláken a hypervariabilních smyček, rozdíly mezi jednotlivými imunoglobuliny a jejich izotypy. Reakce antigenu a protilátky je vysvětlována jak z hlediska komplementarity reaktantů, tak různých vazebných sil, které se na energii imunochemické vazby podílejí. Jsou uvedeny rozdíly mezi vazbou protilátky s imunogenem anebo haptenem a vlastnosti, které přispívají k imunogenicitě antigenu. Je objasněn vztah mezi afinitou a specifitou imunochemické reakce, jakož i reaktivita zárodečných a zralých protilátek.
The educational publication describes the antibody structure, various fragments, three-dimensional fixation of domains, the function of disulfide bridges, β-strands and hypervariable loops. It also deals with differences between individual immunoglobulins and their isotypes. The antigen-antibody reaction is interpreted in the aspect of complementarity of reactants, as well as various binding forces participating in the energy of the immunochemical bond. Differences between the antibody bond to immunogen or to hapten and characteristics supporting the immunogenicity of antigen are given as well. Both the relation between the affinity and specifity of immunochemical reaction and the reactivity of naive and mature antibodies are demonstrated.
- Klíčová slova
- specifita, imunogenicita,
- MeSH
- afinita protilátek MeSH
- antigeny * imunologie MeSH
- epitopy MeSH
- hapteny MeSH
- hypervariabilní oblasti imunologie MeSH
- imunoglobulin A imunologie MeSH
- imunoglobulin D imunologie MeSH
- imunoglobulin E imunologie MeSH
- imunoglobulin G imunologie MeSH
- imunoglobulin M imunologie MeSH
- imunoglobuliny imunologie MeSH
- protilátky * imunologie MeSH
Edukační publikace se zabývá některými postupy, které rozšířily aplikaci imunochemie v posledním desetiletí. Fluorescenční imunochromatografie spojuje výhody chromatografických a imunochemických metod značených fluoroforem. Nejvíce se používá průtoková horizontální analýza s fluoroforem Alexa 647 nebo sulforhodaminem B (může být i v liposomech). Dal- šími fluorofory jsou nanočástice s ionty europia, křemenem potažené či polovodičové nanokrystaly. Imunochromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií má zatím větší uplatnění ve výzkumu než v klinické laboratorní praxi. K obohacení stanovovaného analytu se využívá imunoafinitní chromatografie. Ke standardizaci slouží inkorporace stabilních izotopů do cílových peptidů. V poloprovozní fázi je zavádění ultracitlivých metod: aplikace senzoru obřího elektrického odporu magnetického pole a technologie tranzistoru řízeného polem. Klíčová slova: fluorescenční imunochromatografie, hmotnostní spektrometrie, senzor obřího elektrického odporu magnetického pole, tranzistor řízený polem.
The educational article deals with some procedures that extended applications of immunochemistry in the last decade. Fluorescence immunochromatography combines advantages of chromatographic methods and immunoassays with fluorophor labels. Flow horizontal detection using a fluorophor such as Alexa 647 or sulfo-rhodamine B (also incorporated in liposomes) is most widely used. Nanoparticles combined with europium ions, silica coated or semiconductor nanocrystals are also used as fluorophors. Immunochromatography in connection with tandem mass spectrometry has been used in research rather than in clinical laboratory practice. For enrichment of determined analyte immunoaffinity chromatography is used. For standardization incorporating stable-isotopes into the specific peptides of interest is applied. Implementing of ultrasensitive methods, such as application of giant electrical magnetoresistive sensor or field-effect transistor technology, is in a pilot stage. Keywords: fluorescence immunochromatography, mass spectrometry, giant electrical magnetoresistive sensor, field-effect transistor.
Edukační publikace se zabývá v první části využitím čipů v imunochemii pro mikroanalýzu. Je uveden přehled podkladových materiálů a značek, jakož i senzitivita jednotlivých technologií. Vysvětluje se možnost imobilizace a detekce proteinů pomocí planárního vlnovodu. Ukazuje se používání čipů při paralelní kompetitivní imunoanalýze, sendvičové imunoanalýze a fluorescenční imunoanalýze na mikrokuličkách. Druhá část je věnována kapilární elektroforéze a jejímu využití k separaci po kompetitivní a nekompetitivní homogenní imunoanalýze, a heterogenní imunoanalýze. Diskutují se možnosti detekce analytu jako laserem indukovaná fluorescence, enzymové značky, chemiluminiscence, ampérometrie, UV/VIS absorbance, hmotnostní spektrometrie a povrchová plazmonová rezonance.
The first part of the educational article covers chip application for microarray in immunochemistry. An outline of surface chemistries and labelings is presented, as well as the sensitivity of various technologies. Protein immobilization and detection using planar waveguide technology is clarified. Chip applications are shown in parallel competitive immunoassay, sandwich immunoassay and fluorescent microsphere immunoassay. The second part covers capillary electrophoresis and its use for separation after competitive and non-competitive homogeneous immunoassay or heterogeneous immunoassay. The following possibilities of analyte detection are discussed: laser-induced fluorescence, enzyme labels, chemiluminiscence, amperometry, UV/VIS absorbance, mass spectrometry and surface plasmon resonance.
Edukační publikace se zabývá v první části luminiscenčními metodami: luminiscencí lanthanidů rozloženou v čase, luminiscencí lanthanidů zesílenou enzymem, homogenní imunoanalýzou s pohlcením luminiscence, chemiluminiscencí, elektrochemiluminiscencí (kompetitivní i sendvičové uspořádání a metoda přímé interakce) a možnostmi simultánních imunoanalýz s elektrochemiluminiscenční detekcí. Druhá část je věnována imunoanalýzám s elektrochemickou detekcí, zejména anodickou rozpouštěcí voltametrií a square-wave voltametrií. Jako značky se používají různé nanomateriály: zlato, stříbro, polovodiče (CdS, PbS, ZnS, CuS), uhlíkové nanotrubičky (plněné enzymem), apoferitin (plněný ferokyanidem nebo ionty Cd 2+ nebo Pb 2+ ), liposomy (plněné ferokyanidem), křemenné částice (s kovalentně vázaným polyguaninem, nebo plněné peroxidázou a thioninem), mikrokrystaly ferrocenu a jiné.
The first part of the educational article deals with luminescence methods as follows: lanthanide-based time-resolved luminescence, enzyme-amplified lanthanide luminescence, homogeneous immunoassays with luminescence quenching, chemiluminescence, electrochemiluminescence (competitive assay, sandwich-type assay, and direct interaction) and simultaneous immunoassays options with electrochemical luminescence detection. The second part covers immunoassays with electrochemical detection, particularly anodic stripping voltammetry and square-wave voltammetry. Many kinds of nanomaterials are used as labels, e.g. gold, silver, semiconductors (CdS, PbS, ZnS, CuS), carbon nanotubes (enzyme-loaded), apoferritin (hexacyanoferrate loaded, in some cases Cd 2+ or Pb 2+ ions are used), liposomes (hexacyanoferrate loaded), silica particles (by covalently binding polyguanine or with peroxidase & thionine loaded), ferrocene microcrystals, etc. Keywords: Lanthanide-based luminescence, chemiluminescence, electrochemiluminescence, electrochemical immunoassays, nanomaterials.
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- MeSH
- biochemie dějiny MeSH
- dějiny 20. století MeSH
- dějiny 21. století MeSH
- diagnostické techniky molekulární dějiny MeSH
- lékaři MeSH
- Check Tag
- dějiny 20. století MeSH
- dějiny 21. století MeSH
- Publikační typ
- biografie MeSH
- O autorovi
- Masopust, Jaroslav, 1929-2012 Autorita
Učební texty Univerzity Karlovy v Praze
2., upr. vyd. 269 s. : il., tab. ; 30 cm + 1 CD-ROM
- MeSH
- biochemie MeSH
- klinická chemie MeSH
- Konspekt
- Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
- Učební osnovy. Vyučovací předměty. Učebnice
- NLK Obory
- biochemie
- chemie, klinická chemie
- NLK Publikační typ
- učebnice vysokých škol
