Cílem práce bylo ověřit hypotézu o vlivu tlaku, doby ošetření a teploty na snížení nebo odstranění alergenních účinků proteinů rMal dl, rDau cl. Alergeny rMal dl a rDau cl byly ošetřeny vysokým tlakem 400, 450, 500, 550 MPa při vybrané konstantní teplotě 25 °C s výdrží tlaku u 20 břízových alergiků s projevy orálního alergického syndromu po jablku a mrkvi a zároveň s laboratorně prokázanou senzibilizací na alergeny rBet v 1, rMal dl a rDau cl. Metodou Western blot bylo zjišťováno, zda reaguje sérum senzibilizovaných pacientů s ošetřenými alergeny zjišťovány metodou cirkulámího dichroismu na spektropolarimetru J-810 (Jasco. Jaoonsko). Vliv vysokého tlaku a vliv mírné teplotv na sníženi se zvyšováním p-helikálních struktur, které však neměly vliv na ieho reaktivitu v in vitro testech. Byl proveden pokus o kvantifikaci obsahu těchto proteinů v jablcích a mrkvi.
The aim of study was to verify the hypothesis of impact of the high pressure, time and moderate temperature on the reduction of allergenicity of proteins rMal d1 and rDau c1. Recombinant allergens rMal d1 and rDau c1 were treated by high pressures 400, 450, 500, 550 MP a held for 3 and 10 minutes at constant temperature of 25 °C and by the constant pressure of 500 MPa for 10 minutes at temperatures 30, 40 and 50°C. The basophile activation test was performed using cells from 20 birch allergic patients with oral allergy syndrome to apple and to carrot who have sensitisation to Bet v 1, Mal d 1 and Dau c1. The reactivity of the serum from sensitized patients with treated allergens rMal d1 and rDau c1 at pressure 500MPa for 10 minutes at 30–50°C was verified by Western blot. The modification of structures rMal d1 and rDau c1 by h igh pressure was determined by circular dichroism (spectropolarimetr J-810). We did not confirm the influence of high pressure and moderate temperature on allergenicity of rMal d1 and rDau c1 proteins in vitro. The high pressure of 500 MPa showed major spectral changes in protein r Mal d1 without the reduction of its in vitro reactivity. We have attempted to quantify the content of these proteins in apples and carrot.
- MeSH
- alergeny imunologie MeSH
- bazofily imunologie MeSH
- cirkulární dichroismus využití MeSH
- dekomprese MeSH
- financování organizované MeSH
- hydrostatický tlak MeSH
- Malus chemie imunologie MeSH
- mrkev obecná chemie imunologie MeSH
- potravinářská technologie metody MeSH
- potravinová alergie MeSH
- rostlinné proteiny ve výživě imunologie MeSH
- techniky in vitro MeSH
- western blotting využití MeSH
- MeSH
- biflavonoidy farmakologie chemie izolace a purifikace MeSH
- imunoterapie MeSH
- mrkev obecná chemie MeSH
- myši imunologie parazitologie účinky léků MeSH
- podskupiny lymfocytů MeSH
- rostlinné extrakty chemie terapeutické užití MeSH
- Schistosoma mansoni imunologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- myši imunologie parazitologie účinky léků MeSH
- zvířata MeSH