Témou práce je separácia enantiomérov aminokyselín metódou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Enantiomérne formy cieľovej skupiny analytov je možné separovať použitím chirálnych stacionárnych fáz na základe cyklodextrínov, makrocyklických polyéterov a antibiotík, polysacharidov a derivatizovaných cyklofruktánov. Pre chromatografickú separáciu racemických zmesí aminokyselín, v závislosti od typu chirálnej stacionárnej fázy, možno využiť polárno-organický, reverzno-fázový aj konvenčný separačný systém. Popri priamom spôsobe separácie sa využíva aj možnosť derivatizácie chirálnym derivatizačným činidlom. V prípade HPLC analýzy sa využívajú bežné detekčné techniky, ako aj detekcia na základe cirkulárneho dichroizmu a laserovej polarimetrie.

Enantiomeric forms of the target analytes can be separated using chiral stationary phases based on cyclodextrins, macrocyclic polyethers and antibiotics, and derivatized polysaccharides and cyclofructans. The polar-organic, reverse-phase and normal-phase separation system of the mobile phase can be used for chromatographic separation of racemic mixtures of amino acids, depending on the type of the chiral stationary phase. In addition to the direct method of separation, the possibility of derivatization with a chiral derivatization agent is used. The conventional detection techniques, circular dichroism and laser polarimetry detection can be used to detect amino acids after HPLC separation.

• MeSH
• aminokyseliny * fyziologie   chemická syntéza   izolace a purifikace   MeSH
• chemie analytická MeSH
• chemie farmaceutická MeSH
• cirkulární dichroismus metody   využití   MeSH
• farmaceutická technologie MeSH
• skenovací laserová polarimetrie metody   využití   MeSH
• stereoizomerie MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie * metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• Klíčová slova
• dynamika vysychání, FTIR,
• MeSH
• antimikrobiální peptidy MeSH
• cirkulární dichroismus metody   využití   MeSH
• dehydratace MeSH
• kationické antimikrobiální peptidy * MeSH
• lidé MeSH
• liposomy aplikace a dávkování   MeSH
• permeabilita buněčné membrány * fyziologie   MeSH
• prospektivní studie MeSH
• spektroskopie infračervená s Fourierovou transformací metody   využití   MeSH
• struktury buněčné membrány klasifikace   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• grafy a diagramy MeSH

Combination of viscometry and CD spectrometry made it possible to suggest the existence of a new conformational state of cytochrome c at high temperatures and ionic strengths. The molten globule state of cytochrome c was found at acidic pH in the presence of high concentrations of a salt at 20 °C. A low-cooperative conformational change of the cytochrome c to the unfolded state was observed with increasing temperature. Viscometry is a suitable tool for studies of similar processes in biomacromolecules.

• MeSH
• cirkulární dichroismus * metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• cytochromy c * analýza   ultrastruktura   MeSH
• konformace proteinů * MeSH
• proteiny chemie   MeSH
• spektrální analýza metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• viskozita * MeSH

Cílem práce bylo ověřit hypotézu o vlivu tlaku, doby ošetření a teploty na snížení nebo odstranění alergenních účinků proteinů rMal dl, rDau cl. Alergeny rMal dl a rDau cl byly ošetřeny vysokým tlakem 400, 450, 500, 550 MPa při vybrané konstantní teplotě 25 °C s výdrží tlaku u 20 břízových alergiků s projevy orálního alergického syndromu po jablku a mrkvi a zároveň s laboratorně prokázanou senzibilizací na alergeny rBet v 1, rMal dl a rDau cl. Metodou Western blot bylo zjišťováno, zda reaguje sérum senzibilizovaných pacientů s ošetřenými alergeny zjišťovány metodou cirkulámího dichroismu na spektropolarimetru J-810 (Jasco. Jaoonsko). Vliv vysokého tlaku a vliv mírné teplotv na sníženi se zvyšováním p-helikálních struktur, které však neměly vliv na ieho reaktivitu v in vitro testech. Byl proveden pokus o kvantifikaci obsahu těchto proteinů v jablcích a mrkvi.

The aim of study was to verify the hypothesis of impact of the high pressure, time and moderate temperature on the reduction of allergenicity of proteins rMal d1 and rDau c1. Recombinant allergens rMal d1 and rDau c1 were treated by high pressures 400, 450, 500, 550 MP a held for 3 and 10 minutes at constant temperature of 25 °C and by the constant pressure of 500 MPa for 10 minutes at temperatures 30, 40 and 50°C. The basophile activation test was performed using cells from 20 birch allergic patients with oral allergy syndrome to apple and to carrot who have sensitisation to Bet v 1, Mal d 1 and Dau c1. The reactivity of the serum from sensitized patients with treated allergens rMal d1 and rDau c1 at pressure 500MPa for 10 minutes at 30–50°C was verified by Western blot. The modification of structures rMal d1 and rDau c1 by h igh pressure was determined by circular dichroism (spectropolarimetr J-810). We did not confirm the influence of high pressure and moderate temperature on allergenicity of rMal d1 and rDau c1 proteins in vitro. The high pressure of 500 MPa showed major spectral changes in protein r Mal d1 without the reduction of its in vitro reactivity. We have attempted to quantify the content of these proteins in apples and carrot.

• MeSH
• alergeny imunologie   MeSH
• bazofily imunologie   MeSH
• cirkulární dichroismus využití   MeSH
• dekomprese MeSH
• financování organizované MeSH
• hydrostatický tlak MeSH
• Malus chemie   imunologie   MeSH
• mrkev obecná chemie   imunologie   MeSH
• potravinářská technologie metody   MeSH
• potravinová alergie MeSH
• rostlinné proteiny ve výživě imunologie   MeSH
• western blotting využití   MeSH
• Publikační typ
• techniky in vitro MeSH