Significant progress in the field of tumor immunotherapy has been recently shown to complement available treatment modalities of hematological malignancies. This novel treatment method is based on the use adoptively transferred T lymphocytes which were modified in vitro prior to transfer to express artificial signaling molecule designated Chimeric Antigen Receptor (CAR) which redirects the specificity of modified lymphocytes to surface antigens expressed by malignant cells. In this project we propose to develop methods for CAR-based therapy of lymphomas and leukemia. Next, we propose to develop methods for selective expansion of T cells specific for EBV, HCMV or adenovirus from donor lymphocytes for the use in patients who received allogeneic stem cell transplantation and as a result of immunosupresion developed acute viral infection. The goal of the project is the manufacture of GMP-grade cells and their pre-clinical testing. Proposed project meets criteria of national programme for the support of applied medical research in Aims 1.3.1., 1.6.1., 2.5.1. a 2.5.2.

Významné úspěchy v oblasti nádorové imunoterapie, kterých bylo dosaženo v nedávné době úspěšně doplňují zavedené léčebné metody hematologických malignit. Tyto nové metody jsou založené na použití modifikovaných T lymfocytů, které exprimují arteficielní signalizační molekulu označovanou jako Chimerický antigenní receptor (CAR), která přesměruje specifitu T lymfocytů na povrchové antigeny přítomné na nádorových buňkách. V tomto projektu navrhujeme vývoj metod léčby leukemií a lymfomů pomocí CAR-lymfocytů. Dále navrhujeme vývoj metody selektivní expanze T lymfocytů specifických na viry EBV, HCMV a adenoviry z dárcovských lymfocytů, které by bylo možné použít pro léčbu akutní infekce u pacientů po transplantaci kostní dřeně. Cílem projektu je příprava buněk v GMP-kvalitě a preklinická fáze jejich testování. Předkládaný projekt je plně v souladu s prioritami a cíli “Programu na podporu zdravotnického aplikovaného výzkumu a vývoje” v oblasti 1. Vznik a rozvoj chorob a oblasti 2. Nové diagnostické a terapeutické metody, kde plní dílčí cíle 1.3.1., 1.6.1., 2.5.1. a 2.5.2.

• MeSH
• buněčná a tkáňová terapie metody   MeSH
• chimerické antigenní receptory terapeutické užití   MeSH
• hematologické nádory genetika   terapie   MeSH
• imunoterapie metody   MeSH
• lidé MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• vyvíjení léků metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

T cells will be obtained from the blood of patients with B-NHL and will be stimulated with anti-CD3/CD28 antibodies and transduced with CD20 CAR lentivirus. We will work out procedures for large-scale T cell cultivation under GMP quality settings and we will prepare Standard Operating Procedures for manipulation with genetically modified cells. After expansion in vitro we will test the T cells to eliminate autologous tumor cells in vitro and also in vivo using the immunodeficient mice transplanted with autologous patient-derived malignant B cells. We will characterize transduced T cells and we will carry out safety tests in vitro and in vivo according the requirements of SUKL. In the second part of the proposed project, we will perform detailed phenotypic analysis of B-NHL cells with a goal to select additional suitable surface antigens which could be targeted by CAR. We will prepare novel CAR's to these antigens and we will test them in vitro and in vivo using immunodeficient mice.

T lymfocyty budou získány od pacientů s diagnózou B-NHL odběrem krve, stimulovány in vitro pomocí anti-CD3 a anti-CD28 protilátek a transdukovány lentivirem exprimujícím CD20 CAR. Vypracujeme postupy pro velkoobjemovou kultivaci T lymfocytů za podmínek Správné výrobní praxe a vypracujeme Standartní operační postupy pro manipulaci s geneticky modifikovanými buňkymi. Po expanzi in vitro bude testována schopnost transdukovaných T lymfocytů zabít autologní nádorové buňky in vitro nebo in vivo v imunodeficitních myších, které přihojily autologní maligní buňky B-NHL získané od pacientů. Provedeme charakterizaci transdukovaných T lymfocytů a nezbytné testy bezpečnosti in vitro a in vivo dle požadavků SÚKL. Dále, provedeme analýzu buněk B-NHL s cílem vytipovat další vhodné povrchové antigeny, které by mohly být cíleny pomocí CAR. Proti těmto antigenům připravíme nové CAR a otestujeme je in vitro a in vivo v imunodeficitních myších.

• MeSH
• antigeny CD20 MeSH
• antigeny CD28 MeSH
• antigeny CD3 MeSH
• B-buněčný lymfom terapie   MeSH
• genetická terapie MeSH
• imunoterapie adoptivní MeSH
• kultivované buňky MeSH
• Lentivirus MeSH
• nehodgkinský lymfom terapie   MeSH
• T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Project is designed as a research project within the protocol IntReALL 2010 for patients with relapsed ALL. The project focuses on development and standardization of flow cytometric minimal residual disease assessment in the specific context of treatment with anti-CD22 therapy. Each year 200 -300 patients are expected to be recruited within the IntReALL study. Complex signaling pathways of leukemic cells influenced by targeted drugs will be analyzed using protein arrays. Collaboration with the Institute of Molecular Genetics of Academy of Science will bring modern molecular techniques including synthesis of monoclonal antibodies.

V rámci projektu bude vytvořena standardní metodika pro hodnocení minimální reziduální nemoci (MRN) v kontextu mezinárodní studie pro léčbu relapsu akutní lymfoblastické leukémie, kde část pacientů bude dostávat monoklonální protilátku epratuzumab. V rámci celé studie je očekáváno zařazení 200 až 300 pacientů ročně. Součástí projektu je evaluace signalizace leukemických buněk po ovlivnění monoklonálními protilátkami a jinými cílenými léčivy pomocí komplexních proteinových arrays. Spolupráce s ÚMG AV ČR umožní odhalení patofysiologických mechanismů fungování moderních cílených léčiv na detailní molekulární úrovni.

• MeSH
• akutní lymfatická leukemie MeSH
• imunoterapie MeSH
• monitorování imunologické MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• reziduální nádor MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Project focuses on the development of dendritic cell-based vyccines for use in the immunotherapy of cancers. We will define a protocol permitting the generation of great numbers of fully mature DC, capabable of inducing antitumor immunity in vitro. We will also investigate the functional characteristics of DC generated from peripheral blood monocytes of patients undergoing chemotherapy or other standard anticancer treatment. Simultaneously, we will determine the optimal conditions for pulsing of DC Based on the results of the in vitro studies, we will elaborate a protocol permitting the initiation of Phase I, Phase II clinical trials based on the administration of DC-based vaccines to selected oncologic patients.

Projekt je zaměřen na přípravu individuálních nádorových vakcín na principu dendritických buněk (DC). V projektu bude dopracována optimální metodika k pěstování zralýchfunkčních DC schopných indukovat protinádorovou reakci in vitro. V dalším kroku bude ověřena funkčnost DC kultivovaných z monocytů od onkologických pacientů po chemoterapii nebo jiných formách protinádorové terapie. Paralelně budou vypracovány metody na optimální formu a koncentraci nádorových antigenů. Na základě výsledků in vitro studiíbude vypracován protokol pro zahájení fáze I. a II. klinických pokusů s imunoterapí dendritickými buňkami u vybraných onkologických pacientů.

• MeSH
• cytotoxicita imunologická MeSH
• dendritické buňky MeSH
• imunoterapie MeSH
• nádory MeSH
• vakcíny MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• epidemiologie
• onkologie
• neurologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

Liečba T-bunkami s chimérickým antigénnym receptorom (CAR T) patrí medzi najnovšie terapeutické postupy v hematoonkológii. Metóda využíva geneticky modifikované autológne T-lymfocyty, ktoré v organizme pacienta dokážu identifikovať cieľové nádorové bunky a zneškodniť ich. Anti-CD19 CAR T liečba je v súčasnosti indikovaná u detských a mladých dospelých pacientov s relabovanou alebo refraktérnou (R/R) B-akútnou lymfoblastovou leukémiou (B-ALL) a dospelých pacientov s R/R agresívnymi B-bunkovými lymfómami po dvoch alebo viacerých líniách systémovej liečby. V práci prezentujeme kazuistiku pacienta s refraktérnym difúznym veľkobunkovým B-lymfómom, u ktorého bola po zlyhaní predchádzajúcich línií protinádorovej liečby úspešne využitá CAR T terapia.

CAR T therapy, based on T-cells with the chimeric antigen receptor, represents one of the latest therapeutic approaches in haematooncology. It uses genetically modificated autologous T-lymphocytes that are able to identify and destroy target tumour cells in patient ́s organism. Today anti-CD19 CAR T therapy is indicated in children and young adults with relapsed or refractory (R/R) B-acute lymphoblastic leukaemia (B-ALL) and adult patients with R/R aggressive B-cell lymphoma after at least two lineages of immunochemotherapy. Here we present a case report of the patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma who was successfully treated with CAR T cells.

• MeSH
• antitumorózní látky terapeutické užití   MeSH
• chimerické antigenní receptory * terapeutické užití   MeSH
• difúzní velkobuněčný B-lymfom * terapie   MeSH
• imunologické faktory terapeutické užití   MeSH
• imunoterapie adoptivní metody   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• MeSH
• alografty imunologie   transplantace   MeSH
• antigeny CD19 genetika   krev   terapeutické užití   MeSH
• biologická terapie MeSH
• chimerické antigenní receptory * imunologie   terapeutické užití   MeSH
• genetická terapie MeSH
• hematologické nádory farmakoterapie   imunologie   MeSH
• imunoterapie metody   škodlivé účinky   MeSH
• lidé MeSH
• T-lymfocyty * cytologie   imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH