Chromý a kol. v r. 2009 zjistili, že stanovení celkové sérové bílkoviny biuretovým činidlem za použití albuminových kalibrátorů, vypracované v r. 1981 Doumasovou pracovní skupinou jako kandidáta na referenční metodu, poskytuje výsledky s neakceptovatelnou systematickou pozitivní chybou, způsobenou zejména endogenním sérovým bilirubinem a lipidy. Zjistili též, že k nápravě stačí užít bíkovinné standardy na bázi séra nebo plasmy, které jsou komutabilní se vzorky pacientů, a jsou certifikovány Kjeldahlovou metodou. V našich dvou předchozích publikacích, (Chromý a kol., 2015 a Vinklárková a kol., 2015), jsme ověřili Kjeldahlovy postupy užívané v laboratorní medicíně. Zvolili jsme přímou analýzu ze sraženiny bílkovin promyté kyselinou trichloroctovou a prověřili jsme její analytické provozní parametry. V této práci popisujeme zjednodušenou analýzu s modifikovanou Kjeldahlovou digesční baňkou, kterou lze přímo připojit k tomu přizpůsobené Parnes-Wagnerově destilační aparatuře a uvádíme její validační parametry. Zjednodušenou Kjeldahlovu metodu navrhujeme jako standardní operační postup pro stanovení celkové bílkoviny v referenčních materiálech užívaných v klinické chemii.
Chromý et al. found in 2009, that albumin-calibrated analysis of serum total protein with biuret reagent according to a candidate reference method developed by Doumas working group in 1981, provide results with unacceptable positive bias, caused namely by endogeneous serum bilirubin and lipids. They also found, that a simplest way to rectify this defect, is the use of serum and/or plasma-based protein standards, commutable with patients samples, which are certified by the Kjeldahl method. In our foregoing two articles, (Chromý et al., 2015, and Vinklárková et al., 2015), we reviewed Kjeldahl methods adopted by laboratory medicine, selected a direct analysis on washed protein precipitates with trichloroacetic acid and verified its preliminary analytical performance parameters. In this article, we describe a simplified Kjeldahl analysis with modified digestion flask, now directly connectable to accordingly adapted Parnas and Wagner distillation unit, and present its re-validation. Simplified Kjeldahl method is suggested as a standard operating procedure for total protein in reference materials used in clinical chemistry.
2. přeprac. a dopl. vyd. 331 s. : il., tab. ; 30 cm + errata (1 l. ; 50 x 280 mm)
- Konspekt
- Analytická chemie
- Učební osnovy. Vyučovací předměty. Učebnice
- NLK Obory
- chemie, klinická chemie
- NLK Publikační typ
- učebnice vysokých škol
BACKGROUND: The calibration of Jaffe method for serum creatinine using one serum-based standard complemented with artificial matrix compensating standard's Jaffe-interfering substances allows two-point calibration with results well comparable with enzymatic methods. METHOD: Spectrophotometry was used. RESULTS: Jaffe procedures compensating serum/plasma intereferents by subtracting a constant amount of creatinine poorly overcompensate creatinine in children. Two-point calibration with a pair of primary serum standards certified by the reference measurement procedure (isotope-dilution, mass spectrometry) or with a pair of secondary standards linked to primary materials could provide results well agreeable with enzymatic determination. Such a calibration comprises an absorbance offset corresponding to other-than-creatinine Jaffe-interfering chromogens present in standards in the calibration line, while a two-point calibration combining one standard with physiological saline/water always grossly distorts calibration line. We calculated/prepared artificial serum matrices capable of compensating Jaffe-interfering chromogens in serum standards. The combination of even one standard with its artificial matrix also enables two-point calibration with practically the same results as with a pair of primary standards. CONCLUSIONS: A two-point calibration of Jaffe method for serum creatinine combining only one serum standard with creatinine solution matching standard's allow matrix-present interferents present results well comparable with enzymatic determination, providing the standard is attested/linked to the reference measurement procedure.
- MeSH
- artefakty MeSH
- bilirubin metabolismus MeSH
- biochemická analýza krve metody normy MeSH
- časové faktory MeSH
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- financování organizované MeSH
- kalibrace MeSH
- kinetika MeSH
- kreatinin krev MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- oxidace-redukce MeSH
- referenční standardy MeSH
- senioři MeSH
- tartaráty metabolismus MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
1. vyd. 215 s. : il. ; 29 cm
- Klíčová slova
- chemie,
- Konspekt
- Patologie. Klinická medicína
- MeSH
- biochemie normy MeSH
- laboratoře metody organizace a řízení MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
