- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- MeSH
- chinazoliny aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- dospělí MeSH
- epidermální růstový faktor diagnostické užití genetika MeSH
- financování organizované MeSH
- lidé MeSH
- monoklonální protilátky aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- nádory prsu farmakoterapie genetika terapie MeSH
- retrospektivní studie MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Purine and pyrimidine nucleotides influence many metabolic pathways and their analogs have been widely used in medicine. A capillary electrophoretic method was developed for measuring intracellular nucleotides. The final BGE consisted of 40 mM citric acid with addition of 0.8 mM CTAB titrated by gamma-aminobutyric acid to pH 4.4. The electrophoretic separations were carried out in an uncoated silica capillary (id/od - 75/375 microm; effective/total length - 90/97 cm). The method allows a complete separation of 21 nucleotides and deoxynucleotides within 15 min with separation efficiencies up to 400,000 theoretical plates per meter. Due to the use of an acidic separation medium, the method offers a high selectivity toward the studied analytes versus possible interferences from matrices. Sample preparation was optimized in order to shorten work-time and prevent analyte degradation. The method was applied for analyzing nucleotides in human erythrocytes and Chinese hamster ovary cells. Diagnostic potential for inherited metabolic disorders of nucleotide metabolism is presented.
- MeSH
- cetrimoniové sloučeniny chemie MeSH
- CHO buňky MeSH
- Cricetulus MeSH
- elektroforéza kapilární metody MeSH
- erytrocyty chemie MeSH
- financování organizované MeSH
- GABA chemie MeSH
- koncentrace vodíkových iontů MeSH
- křečci praví MeSH
- kyselina citronová chemie MeSH
- lidé MeSH
- purinové nukleotidy analýza MeSH
- pyrimidinové nukleotidy analýza MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- křečci praví MeSH
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
Východisko. Asthma bronchiale (AB) je chronické zánětlivé onemocnění dýchacích cest, ve kterém hrají roli mnohé buňky – žírné buňky, T-lymfocyty a eozinofily. V současné době nemáme v klinické praxi ideální ukazatel sledování aktivity zánětu. V práci jsme se pokusili vyhodnotit výpovědní hodnotu stanovení eozinofilního kationického proteinu v séru (S-ECP), hladiny endotelinu (P-ET) v plazmě a procentuální zastoupení eozinofilů s expresí CD44 na povrchu (EoCD44 ) u dětských astmatiků. Metodika a výsledky. U 97 dětí s AB jsme vyhodnotili anamnézu, vyšetřili S-ECP, P-ET v séru a EoCD44 přímou fluorescencí z plné krve metodou průtokové cytometrie na cytometru BD Biosciences, absolutní počet eozinofilů (Eo) a hladinu celkového sérového imunoglobulinu E (S-IgE). U dětí jsme zahájili léčbu montelukastem (singulair, tbl 5 mg). S odstupem tří měsíců od prvního odběru jsme vyšetřili opět hladinu S-ECP, P-ET a EoCD44, jejichž sledování umožňuje hodnotit více stránek alergického zánětu. U 97 dětí s AB jsme zjistili silnou korelaci jen mezi hladinou P-ET a EoCD44 (p=0,002; r= –0,5). Závěry. Překvapivě jsme prokázali jen korelaci mezi hladinou P-ET a EoCD44. Nižší procentuální zastoupení EoCD44 v periferní krvi u astmatiků před léčbou potvrzuje aktivitu eozinofilního zánětu a intenzivní přestupu eozinofilů do dýchacích cest. I přes klinickou stabilizaci stavu (bez potřeby aplikace salbutamolu spraye, ventolin) nedošlo u 8 (8 %) dětí za 3 měsíce ke snížení hodnot S-ECP, hladiny P-ET a zvýšení procentuálního zastoupení EoCD44. Stanovení jednotlivých ukazatelů aktivity probíhajícího procesu jsou nepřímým ukazatelem mnohočetných rysů eozinofilního zánětu.
Background. Bronchial asthma is a chronic inflammatory disease of the respiratory tract where variety of cells plays a role, particularly mast cells, eosinophils (Eo), and T lymphocytes. At present, there is no clear-cut clinical or laboratory parameter to monitor the activity of this disease. Our study was designed to examine and compare serum eosinophilic cationic protein (S-ECP) levels, plasma ET-1 (P-ET) levels and percentage of eosinophils with CD44 (EoCD44) in paediatric asthmatic patients. Methods and Results. In our study, a group of 97 atopic children with persisting mild asthma, had a detailed analysis of their personal history. In addition, S-ECP, P-ET, EoCD44, eosinophil blood count (Eo) and serum levels of IgE(S-IgE) in peripheral blood were determined. Subsequently, children were treated with montelukast (singular), a leukotriene receptor antagonist for a period of three weeks (montelukast tablets in a dose of 5 mg once a day). A second S-ECP, P-ET, EoCD44 were determined in the interval of 3 months from the first collection. In 97 asthmatic children a correlation between P-ET and EoCD44 (p=0.002; r= –0.5) were found. Conclusions. Our follow-up study surprisingly confirmed a correlation between P-ET and EoCD44. The lower percentage of EoCD44 in peripheral blood in asthmatic children is due to Eo inflammation activity and attests the massive Eo invasion into the airways. The determination of combination - S-ECP, P-ET, EoCD44 – provides an indirect evidence of the multiple features of Eo inflammation.
BACKGROUND: Only three inherited metabolic defects have been identified in purine de novo synthesis (PDNS). We present here CE methods for diagnosing defects in the second half of PDNS (from sixth to tenth enzymatic conversion) based on analysis of aminoimidazole ribosides - dephosphorylated intermediates - in urine. METHODS: Assays were performed in an uncoated fused-silica capillary using two electrophoretic separation systems: 60 mmol/l borate - 2-amino-2-methyl-1-propanol-80 mmol/l sodium dodecylsulfate (pH 9.6) and 200 mmol/l phosphate - sodium (pH 1.8). RESULTS: The reported conditions allowed separation of all metabolites from major urinary constituents with analysis time less than 10 min and separation efficiency of 220 and 350 thousands theoretical plates per meter for borate and phosphate system, respectively. The intra- and interday imprecisions were less than 4.4% and 9.9% CV. Potential usefulness of the methods was demonstrated on samples from a patient with adenylosuccinate lyase deficiency and Chinese hamster ovary cell lines defective in PDNS. CONCLUSIONS: CE is a useful and effective tool in the analysis of aminoimidazole ribosides which enables diagnosis of known as well as not so far identified inherited defects of PDNS pathway.
- MeSH
- adenylsukcinátlyasa nedostatek MeSH
- biosyntetické dráhy MeSH
- buněčné linie MeSH
- časové faktory MeSH
- CHO buňky MeSH
- Cricetulus MeSH
- dítě MeSH
- elektroforéza kapilární metody MeSH
- financování organizované MeSH
- imidazoly moč MeSH
- kojenec MeSH
- křečci praví MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- molekulární struktura MeSH
- předškolní dítě MeSH
- purinové nukleosidy biosyntéza MeSH
- referenční hodnoty MeSH
- vrozené poruchy metabolismu aminokyselin diagnóza MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- křečci praví MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
