BACKGROUND: The Czech Republic decided to build the frozen red blood cell (RBC) bank for military contingency and civil emergency preparedness. Storage methods were validated with (51)Cr recovery measures out to 21 days postthaw. STUDY DESIGN AND METHODS: A total of 139 apheresis RBC units collected in additive solution (additive solution 3 [AS-3] or saline-adenine-glucose-mannitol [SAG-M]) were obtained from volunteers by double erythrocytapheresis; all were sterilely glycerolized, frozen, stored for at least 30 days at a minimum of -65 degrees C in collection or cryogenic bags, thawed, sterilely deglycerolized, and stored at 4 +/- 2 degrees C for up to 21 days in AS-3 or SAG-M. Units were sampled before storage and after thaw weekly. Metabolic intermediates and (51)Cr recovery measures were obtained to determine the index of therapeutic effectiveness (ITE). RESULTS: Despite losses associated with cryoconservation and eventual transfer to cryogenic bags, 3-week storage with optimum ITE was obtained with frozen storage in primary collection or cryogenic bags and postthaw storage in AS-3. Such cells would pass as acceptable in vitro hematology and biochemistry variables. CONCLUSIONS: A system for frozen RBC storage with 3-week, postthaw, liquid storage has been validated. With commercially available components and automated processing, it is capable of supporting civilian rare blood and emergency and international military combat and peacekeeping support use patterns.
- MeSH
- adenin MeSH
- chlorid sodný MeSH
- citráty MeSH
- dospělí MeSH
- erytrocyty metabolismus MeSH
- fosfáty MeSH
- glukosa MeSH
- hemoglobiny analýza MeSH
- konzervace krve normy MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- radioizotopy chromu diagnostické užití MeSH
- separace krevních složek MeSH
- zmrazování MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
Nestr. : il., tab. ; 31 cm
Zařazeni budou pacienti s povrchovým uroteliálním karcinomem močového měchýře před TUR. Předmětem bude hodnocení kvantitativních neinvazivních močových testů. Budou provedeny před TUR, 2 týdny po výkonu a před každou kontrolní cystoskopií. V ČR budou prováděny testy BTA TRAK a UBC IRMA. Perspektivní test BLCA-4 bude realizován v USA. Seriové odběry markerů umožní korelovat jejich dynamiku s průběhem onemocnění, tedy vznikem recidivy nebo progrese. Hodnocena a srovnávána bude senzitivita testů při záchytu primárního tumoru a recidiv. Posuzována bude dynamika změn hodnot markerů po TUR a během sledování, což umožní navrhnout metodiku stanovení individuální prahové hodnoty. Studie přinese návrh použití markerů při sledování pacientů s anamnézou povrchových nádorů měchýře. Umožní snížit počet cystoskopických kontrol, což bude mít přínos pro kvalitu pacientova života i ekonomický.; Patients with superficial bladder carcinoma before TUR will be included into the project. The subject of the project will be accessing of quantitative noninvasive urinary tests before TUR, two weeks after the operation and before every cystoscopy checks.BTA TRAK and UBC IRMA tests will be carried out in the Czech Rep. A perspectiove test BLCA-4 will be carried out in the USA. Serial sample taking of the markers will enable to correlate their dynamics with the disease development. The test sensitivity when detecting the primary tumor and recurrence will be accessed and compared. The dynamics of the markers after TUR and during the surveillance will be accessed, which will enable to suggest and individual threshold value. The project will bring a proposal of how to use markers during the surveillance of the patients with superficial bladder carcinoma. It will enable to reduce the number of cystoscopy checks, which will improve the quality of patients life.
- MeSH
- ELISA metody trendy využití MeSH
- miniinvazivní chirurgické výkony metody MeSH
- nádorové biomarkery analýza MeSH
- nádory močového měchýře diagnóza MeSH
- recidiva MeSH
- sekundární prevence MeSH
- spektrální karyotypizace metody MeSH
- Konspekt
- Patologie. Klinická medicína
- NLK Obory
- urologie
- onkologie
- hematologie a transfuzní lékařství
- radiologie, nukleární medicína a zobrazovací metody
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
Práce je dílčím výsledkem projektu, jehož cílem byl vývoj a zavedení metodiky získávání a dlouhodobého skladování erytrocytů pro strategické, speciální a léčebné potřeby Armády České republiky a státu. Jako základní zkoumaná metoda bylo zvoleno mražení erytrocytů, získaných metodou dvojité erytrocytaferézy, ve vysoké koncentraci glycerolu při -85 °C a teplotě skladování -65 °C a nižší. Glycerolizace a deglycerolizace erytrocytů, včetně jejich závěrečné resuspenze v Nutricelu (AS-3), byla prováděna uzavřeným a automatizovaným systémem na zařízení Haemonetics ACP 215. Stabilita EAK rekonstituovaných v AS-3 byla ověřena jak klinickým hodnocením u zdravých dobrovolníků pomocí tzv. indexu terapeutické účinnosti, tak biochemickými a hematologickými parametry. Rekonstituované erytrocytární jednotky byly hodnoceny ve dnech 0, 7, 14 a 21 po rozmražení 51Cr značenými erytrocyty ve dvou skupinách: mražené a skladované v primárních vacích (skupina A) a mražené a skladované po přepuštění do speciálních vaků pro hluboké zmražení (skupina B). Bylo měřeno 24hodinové přežívání autologních erytrocytů podávaných zdravým dobrovolníkům a stanoven index terapeutické účinnosti (ITE) za pomoci tzv. freeze-thaw-wash-recovery (FTW%) závislého na množství hemoglobinu v odpadu po promytí rozmražených erytrocytů. Celkem bylo zmraženo, rekonstituováno a takto vyšetřeno 104 TU erytrocytů. Hodnocené erytrocyty v obou skupinách vykazují téměř shodné hodnoty ITE: 74,01 (±CI95 %: 71,97–76,04) a 74,02 (±CI95 %: 71,18–76,87) bez ohledu na délku sledované doby uchovávání po rekonstituci (21 dní). U skupiny B bylo zjištěno 4% snížení hodnoty přežití po 24 hod. a 4% zvýšení hodnoty FTW%. Hodnoty hemolýzy na konci doby skladování byly u všech hodnocených skupin nižší než 1 %. Z hematologických a biochemických parametrů byly sledovány změny hemoglobinu, hematokritu, leukocytů, hemolýzy, osmolality, pH, K, P, ATP, NH3 a 2,3-DPG. Také výsledky měření těchto laboratorních parametrů prokázaly dobrou použitelnost zmražených erytrocytů ještě 3 týdny po rozmražení, rekonstituci v Nutricelu a uchovávání při teplotě 2–6 °C.
The article summarised partial results the project of evaluation and implementation method for collection and longterm storage packed red cells (RBC) for strategic, special and therapeutic findings Army of Czech Republic as well as the country. The essential surveyed method was freezing of RBC collected by double erythrocytapheresis in high glycerol at -80 °C and stored at -65 °C and lower. Glycerolisation, deglycerolisation and resuspension in Nutricel (AS- 3) was performed with the Haemonetics ACP 215 machine by closed system. Stability of RBC in AS-3 was evaluated by clinical study with health volunteers by index of therapeutic effectiveness (ITE) as well as by biochemical and haematological parameters. Reconstituted RBC units were evaluated in days 0,7,47 and 21 after thawing by 51Cr labelled red cells in two groups: freezing and storage in primary collection bags (group A) and freeing and storage in special bags for deep freezing (group B). 24-hour survival autologous red cell at health volunteers were observed and set ITE and via “freeze-thaw-wash-recovery” (FTW%) dependent on amount of haemoglobin in waste after washing deglycerolised RBCs. Totally 104 RBC units were frozen, reconstituted and measured. Evaluated RBCs both groups were almost statistically identical ITE: 74.01 (±CI95%: 71.97–76.04), 74.02 (±CI95%: 71.18–76.87) and 74.5 (±CI95%: 71.62–77.38), respectively, regardless of storage time after RBCs deglycerolization. The 4-percent decrease of 24-hour posttransfusion survival (%) means as well as 4-percent increase of FTW% means were statistically significant between RBCs group B and A. Haemolysis in the end of storage was below 1% at both group. From haematological and biochemical parameters haemoglobin, haematocrit, leucocytes, haemolysis, osmolality, pH, potassium, phosphorus, ATP, ammoniac and 2,3-DPG were observed. Results of these tests demonstrate good applicability frozen RBC 3 week after thawing and reconstitution in Nutricel and following storage at 2–6 °C.
- Klíčová slova
- Nutricel,
- MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- konzervace krve metody MeSH
- kryoprezervace metody využití MeSH
- lidé MeSH
- separace krevních složek metody MeSH
- transfuze erytrocytů metody MeSH
- vojenské lékařství MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- hodnotící studie MeSH
