Citrulline ureidase (CTU, EC3.5.1.20) degrades citrulline into ornithine, carbon dioxide, and ammonia. Here, we present the report on expression of recombinant CTU in Escherichia coli. The soluble and active recombinant CTU was expressed in the periplasmic space with the vector pET-22b and the His-tagged CTU was purified with Ni-Affinity Chromatography. The yield of soluble recombinant protein was significantly increased when 1% sorbitol was supplemented in medium. By using phenylisothiocyanate (PITC) pre-column derivatization HPLC, the enzyme activity of recombinant CTU was determined via measuring of the substrate citrulline and the corresponding products. Our results could be useful in the study of CTU biochemical characteristics, enzymatic preparation of ornithine and development of an enzymatic detection method of citrulline.
- MeSH
- Bacteria MeSH
- bakteriologické techniky metody využití MeSH
- chromatografie afinitní metody využití MeSH
- citrulin * izolace a purifikace metabolismus MeSH
- enzymatické testy metody využití MeSH
- Escherichia coli enzymologie imunologie izolace a purifikace MeSH
- Francisella tularensis * enzymologie izolace a purifikace metabolismus MeSH
- hydrolasy izolace a purifikace MeSH
- ornithin * izolace a purifikace metabolismus MeSH
- rekombinantní proteiny genetika izolace a purifikace metabolismus MeSH
- sorbitol diagnostické užití MeSH
- statistika jako téma MeSH
- tularemie diagnóza etiologie mikrobiologie MeSH
- ureasa izolace a purifikace metabolismus MeSH
- vysokoúčinná kapalinová chromatografie metody využití MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Pri rutinnom vyšetrení sme od dvoch pacientov s klinicky suspektnou mykózou nechtov palcov nôh (potvrdená mikroskopicky nálezom úlomkov/tenších hýf) izolovali početné kolónie morfologicky nezvyčajnej hyfomycéty. Na základe podrobného štúdia morfologických a fyziologických znakov kultúr sme izoláty identifikovali ako Arthrographis kalrae. Ide pravdepodobne o prvé zverejnené prípady izolácie tejto termálne dimorfnej keratinolytickej huby na Slovensku.
At a routine examination, multiple colonies of hyphomycetes of uncommon morphology were isolated from two patients with clinically suspected mycosis of the big toes (and confirmed microscopically by the presence of fragmented/thin hyphae). Based on the detailed study of the morphological and physiological characteristics of the cultures, the isolates were identified as Arthrographis kalrae. To our knowledge, this is the first isolation of the thermally dimorphic keratinolytic fungus to be reported in Slovakia.
- MeSH
- antifungální látky terapeutické užití MeSH
- houby izolace a purifikace růst a vývoj účinky léků MeSH
- kokultivační techniky metody využití MeSH
- mikroskopie metody využití MeSH
- onychomykóza diagnóza etiologie terapie MeSH
- palec nohy MeSH
- ureasa izolace a purifikace MeSH
- Geografické názvy
- Slovenská republika MeSH
The vacA and cagA genotypes of Helicobacter pylori exhibited distinct geographic distribution and correlation with severity of disease. In the above genotypes (obtained from 150 H. pylori-positive patients--139 with gastritis, 10 with ulcer and 1 patient with gastric cancer) combinations vacA s1/m1 and s2/m2 were detected using PCR in 75 and 25% of isolates, respectively, in patients with chronic gastritis. The of s1/m1 and s2/m2 combinations were also detected from ulcers (60 and 40%, respectively). The cagA was detected in 30% of isolates. Concentrated culture supernatants of 7 (64%) out of 11 H. pylori strains induced vacuolization in Vero cells in titers ranging from 1:5 to 1:40. The vacA s1 genotype was significantly associated with, but not predictive of the presence of vacuolating cytotoxin activity and the cagA gene.
- MeSH
- amplifikace genu genetika MeSH
- cytotoxiny izolace a purifikace MeSH
- DNA bakterií izolace a purifikace MeSH
- dyspepsie etiologie metabolismus mikrobiologie MeSH
- fenotyp MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- genotyp MeSH
- Helicobacter pylori genetika imunologie izolace a purifikace MeSH
- lidé MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody využití MeSH
- ureasa izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Geografické názvy
- Argentina MeSH
- MeSH
- sinice enzymologie MeSH
- ureasa analýza antagonisté a inhibitory izolace a purifikace MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
- MeSH
- amylasy izolace a purifikace MeSH
- Bacteria MeSH
- Brucella abortus enzymologie izolace a purifikace MeSH
- Brucella suis enzymologie izolace a purifikace MeSH
- Brucella * enzymologie izolace a purifikace klasifikace MeSH
- brucelóza enzymologie metabolismus MeSH
- hydrolasy izolace a purifikace MeSH
- katalasa izolace a purifikace MeSH
- lipasa izolace a purifikace MeSH
- sérologické testy * metody využití MeSH
- techniky typizace bakterií * metody využití MeSH
- ureasa izolace a purifikace MeSH
- zoonózy enzymologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
