Basofily a žímé buňky působí jako regulační a efektorové buňky přirozených imunitních mechanismů a v současné době jsou považovány za spojnici mezi vrozenou a adaptivní imunitou. Spolu s žímými buňkami se podílejí na vzniku alergické reakce okamžitého typu zprostředkované IgE. Nejvýznamnější úlohu v aktivaci basofilů a žímých buněk sehrává vysokoafinitní FceRI receptor. Jeho přemostění IgE molekulami je signálem pro zahájení aktivační kaskády žímých buněk a basofilů, vedoucí k uvolnění mediátorů alergického zánětu. Mezi hlavní tyrosinkinázy podílející se na FceRI mediovaných signalizačních drahách patří proteinové tyrosinkinázy Fyn, Lyn a Syk vedoucí k fosforylaci molekul signálních drah. Diagnostika alergie u pacientů s hypo-, resp. agamaglobulinémií je značně problematická vzhledem k nízké koncentraci nebo absenci IgE. I když se zdá, že vznik atopic je u těchto pacientů značně spekulativní, řada z nich vykazuje symptomy charakteristické pro alergickou hypersenzitivitu. Je známo, že řada imunodeficitů je spojena rovněž s defekty určitých signálních drah. V naší práci jsme zjišťovali, zda status non-respondéra v případě pacientů s hypo-, resp. agamaglobulinémií je spojen pouze s absencí IgE, nebojsou přítomny i změny ve funkci příslušných signálních drah. Ukázalo se, že proteináza Btk (Bmton tyrosinkináza) hraje rozhodující úlohu nejen v případě B-lymfocytů, ale rovněž v případě buněčné aktivace mediované FceRI.

Basophils and mast cells act as regulatory and effector cells of natural immune mechanisms and and are currently considered as a bridge between innate and adaptive immunity. Along with mast cells they play pivotal roles in the initiation of allergic reaction. IgE cross-linking of the highaffinity FcεRI receptor on these cells activates intracellular signaling pathways that lead to the degranulation and release of allergic inflammaton mediators. The main tyrosine kinase involved in signaling pathwas mediated FcεRI include protein tyrosine kinase Fyn, Lyn and Syk, leading to phosphorylation of signaling pathways. Patients with immunoglobulin deficiency do not react to positive, e.g. anti-IgE stimu - lation because of lack of IgE. It is generally known that immunedeficiencies are connected with defects in signal transduction pathways. The aim of our study was to find out whether the non-responder status in patients with hypo-, resp. agamaglobulinemia is related only to the absence of IgE or whether some dysfunctions in basophil signaling are also present. Our results confirmed that BTK plays crucial role in B-lymphocytes as well as mast cell activation through FcεRI.

• Klíčová slova
• Brutonova tyrosinkináza, FcεRI receptor, basofily,
• MeSH
• agamaglobulinemie MeSH
• alergie etiologie   MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• bazofily fyziologie   imunologie   MeSH
• běžná variabilní imunodeficience MeSH
• buněčná imunita MeSH
• fyziologie buňky MeSH
• lidé MeSH
• mastocyty imunologie   MeSH
• protilátky MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• receptory Fc MeSH
• receptory IgE MeSH
• signální transdukce MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti etiologie   krev   MeSH
• tyrosinkinasy MeSH
• výběr pacientů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Chronická kopř ivka (urtikarie CU) je definována jako přítomnost kopř ivky vyskytující se déle než šest týdnů . Etiologie onemocnění je různorodá, přičemž společ ným znakem většiny urtikarií je aktivace a degranulace žírných buněk a přičemž vyvolávací faktory mohou být jak neimunologického, tak imunologického charakteru. V patogenezi autoimunitní podskupiny je patogenní mechanismus spojován s přítomností protilátek IgG izotypu proti alfa podjednotce vysokoafinitního FcεRI receptoru nebo IgE. Diagnostika chronické kopřivky je obtížná a často založená pouze na klinických a anamnestických údajích. Do dnešního dne byla vyvinuta řada metod k detekci sérových autoprotilátek, je- jich nedostatkem je však značná různorodost v principu stanovení, a tudíž i vysoká metodická a mezilaboratorní variabilita. K nejužívanějším patří intradermální test za užití autologního séra (ASSST), který však nepatří mezi standardizovaná vyšetření. Laboratorní in vitro průkaz anti-FcεRI autoprotilátek je možno provádět funkč ními testy, jako je metoda uvolňování histaminu z basofilů periferní krve nebo imunoana- lytickými metodami jako western blot nebo enzymová imunoanalýza (ELISA). V této práci byla užita modifikace testu aktivace basofilů , kdy basofily zdravého byly stimulovány sérem pacientů s CU. Schopnost aktivoval basofily nealergického dárce vykazovala séra 5 z 11 vyšetřovaných pacientek a lze předpokládat, že aktivace basofilů byla mediována protilátkami proti FcεRI eventuálně anti-IgE protilátkami. Na rozdíl od metod založených na principu imunoanalýzy spočívá pozitivní přínos tohoto testu především v průkazu funkční aktivity séra vázané k FcεRI a odpovědné za aktivaci, resp. degranulaci basofilů a mohl by sloužit jako vhodná metoda pro identifikaci podskupiny pacientů s chronickou kopřivkou autoimunitního původu.

Chronic urticaria (CU) is defined as the presence of urticaria for at least 6 weeks. It is frequently caused by allergic reacti ons; however, there are many nonallergic causes. The majority of chronic urticaria cases have an unknown cause. The autoimmune subgroup is associat ed with the IgG anti-IgE receptor alpha subunit in 35–40% of patients and IgG anti-IgE in an additional 5–10%. These autoantibodies have be en shown to activate blood basophils and cutaneous mast cells in vitro with augmentation of basophil activation by complement and release o f C5a. This autoimmune subgroup can be identified by an autologous skin test or histamine release from human basophils or cutaneous mast ce lls or binding methods as immunoblot and ELISA. However, binding assays do not correlate with these functional assai. Activation of basophils or mast cells causing histamine release is quite specific for chronic urticaria and defines the autoimmune subgroup. To detect autoantibodies to the Fc ε RI in sera of CU patients by a modified serum-induced basophil activation test measured by flow cytometry. Sera of 11 CU patients wer e tested and serum of 5 of these sera upregulated CD63 expression on the surface of basophils. Chronic urticaria serum-induced CD63 expressi on assay seems to be a useful tool for identification of a subset of patiens with autoimmune CU.

• Klíčová slova
• chronická kopřivka, CD63,
• MeSH
• autoprotilátky krev   škodlivé účinky   MeSH
• bazofily imunologie   MeSH
• kožní testy MeSH
• lidé MeSH
• receptory IgE antagonisté a inhibitory   fyziologie   MeSH
• test degranulace bazofilů MeSH
• urtikarie * diagnóza   imunologie   krev   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Cílem naší práce bylo srovnat di agnostickou hodnotu kožních prick testů (SPT), testu aktivace basofilů (BAT) a specifického IgE (sIgE) u břízových alergiků s projevy orálního alergického syndromu (OAS) na jablko a mrkev a současně zjistit odpovědné alergeny za projevy zkříž ené alergie. Vysoká senzitivita byla zaznamenána v SPT s čerstvým jablkem a mrkví a v BAT s homogenátem jablka a mrkve (1,0). SPT a BAT s ko merčními extrakty jablka a mrkve prokázaly nízkou senzitivitu (senzitivita pro jablko 0,53, pro mrkev 0,71 v SPT, senzitivita BAT pro ja blko 0,1, pro mrkev 0,71). U obou skupin byla zaznamenána vysoká senzitivita při stanovení sIgE na alergeny jablka (1,0) a mrkve (0,94). Potvrdili jsme vysokou prevalenci zkřížené alergie u břízových alergiků prostřednictvím hl avních alergenů Mal d 1 a Dau c 1 udávanou pro země střední Evropy.

The aim of the study was to examine the di agnostic value of skin prick test (SPT), specific IgE (sIgE) and basophil activation test (BAT) in birch- allergic patients with history of oral allergy syndrome to apple and carrot. The highest senzitivity showed the SPT and the BAT with fresh apple and carrot (1,0 for both). The SPT and the BAT with commercial extracts of apple and carrot showed low sensitivity (sensitivity of SPT for apple was 0,53 and 0,71 for carrot, sensitivity of BAT for apple was 0,1 and 0,71 for carrot). The high sensitivity of sIgE of apple (1,0) and carrot (0,94) showed good diagnostic value in both groups. We determined the high prevalence of cross-reactivity in birch allergic patients t o main allergens Mal d 1 and Dau c 1, which corresponds to results in previous studies for middle Europe.

• MeSH
• alergeny imunologie   izolace a purifikace   MeSH
• bazofily imunologie   MeSH
• bříza imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunoglobulin G izolace a purifikace   MeSH
• kožní testy metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• Malus imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• mrkev obecná imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• potravinová alergie diagnóza   imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Prevalence hypersenzitivních reakcí na nesteroidní protizánětlivé léky (NSAID) stoupá. NSAID patří k nejčastějším lékům, které vyvoláva- jí hypersenzitivní reakce, které nejsou mediovány imunologickými mechanismy. Hypersenzitivní reakce mediované imunologickými me chanismy se vyskytují asi jen v ¼ případů a jsou vyvolány jedním nebo více NSAID př íbuzné chemické struktury. Zatímco hypersenzitivní reak- ce, které nejsou mediované imunologickými mechanismy, jsou spouštěny ně kolika NSAID odlišné chemické struktury. Vzhledem k tomu, že in vivo testy včetně provokačních testů nejsou vždy proveditelné, vkládá se naděje do vyšetřovacích metod in vitro . European Network for Drug Allergy (ENDA), zájmová skupina EAACI pro lékovou přecitlivělost, považuje funkční buněčné testy (test aktivace basofilů a test transformace lymfocytů ) za užitečné pomocné metody. Rozšiř ují možnosti diagnostiky hypersenzitivních reakcí po NSAID, kte- ré jsou mediovány imunologickými mechanismy (23). Nicméně pro přesnější diagnostiku hypersenzitivních reakcí na NSAID je žádoucí vyvinout in vitro testy s vyšší senzitivitou i specificitou, než jsou v současné době k dispozici.

Prevalence of hypersensitivity reactions to non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs ) is increasing. These are the most frequent drugs that induce hypersensitivity reactions, which are not mediated by immunological mechanisms. Hypersensitivity reactions mediated by immunological mechanisms occur in only about ¼ of the events and are triggered by one or more NSAID of similar chemical structure. Whereas hy- persensitivity reactions which are not mediated by immunological mechanisms are triggered by several NSAIDs of different chemic al structure. In view of the fact that in vivo tests, including provocation tests are not always feasible, the following hope is in the investigative methods in vitro . European Network for Drug Allergy (ENDA), EAACI interest group on drug hypersensitivity considers functional in vitro tests (baso- phil activation test and lymphocyte transformation test) to be useful methods. They extend the possibilities of diagnosis of hy persensitivity re- actions to NSAID which are mediated by immunological mechanisms. However, it is desirable for more accurate diagnosis of hypers ensitivity reactions to NSAIDs to develop in vitro assays with higher sensitivity and specificity than those currently available.

• Klíčová slova
• test aktivace bazofilů, funkční testy lymfocytů, test transformace lymfocytů,
• MeSH
• aktivace lymfocytů MeSH
• antiflogistika nesteroidní * imunologie   klasifikace   škodlivé účinky   MeSH
• bazofily imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• imunologické testy * MeSH
• léková alergie * diagnóza   epidemiologie   imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH